發(fā)布時(shí)間：2024-06-11 23:04

　　為研究鄰苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)是否通過sirt1/pgc-1a通路對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷效應(yīng),通過體外培養(yǎng)HepG2細(xì)胞,在1.6,8,40,200,1000mmol/L DEHP處理24或48h后,采用CCK-8測定細(xì)胞活力,ATP試劑盒檢測細(xì)胞內(nèi)ATP含量,NO試劑盒檢測細(xì)胞上清NO含量,ELISA試劑盒檢測細(xì)胞上清炎癥因子TNF-a、IL-6的含量;同時(shí)在DEHP作用于HepG2細(xì)胞24或48h后,用Western blot檢測線粒體調(diào)控基因sirt1、pgc-1a,nrf1、tfam的蛋白表達(dá).結(jié)果表明:不同濃度的DEHP處理24,48h后,細(xì)胞活力在高劑量都呈顯著下降趨勢.DEHP能引起ATP含量的顯著下降、炎癥因子含量的顯著提高,但NO含量無顯著變化.4種線粒體調(diào)控基因的蛋白表達(dá)水平sirt1、pgc-1a,nrf1、tfam在24h時(shí)無顯著變化.而在48h時(shí),隨著劑量增加蛋白含量呈上升后下降趨勢,并且sirt1在8mmol/L呈顯著上升趨勢,隨后每個(gè)蛋白都在1000mmol/L顯著下降(P<0.05).DEHP能引起HepG2細(xì)胞氧化應(yīng)激,并通過影響sir...

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【部分圖文】：

圖3DEHP處理48h對(duì)HepG2細(xì)胞NO(a)、TNF-?(b)和IL-6(c)水平的影響

由圖3可知,DEHP處理對(duì)NO含量無顯著影響,但顯著影響炎癥因子水平.與對(duì)照組相比,TNF-?在200和1000?mol/L處理組極顯著上升,IL-6在大于40?mol/L處理組均極顯著上升.2.4DEHP暴露對(duì)HepG2細(xì)胞sirt1、pgc-1?、nrf1、tfam蛋白表達(dá)....

圖1DEHP暴露對(duì)HepG2肝癌細(xì)胞細(xì)胞活力的影響

DEHP可引起HepG2細(xì)胞不同程度的細(xì)胞毒性效應(yīng).由圖1可知,不同濃度的DEHP作用于HepG2細(xì)胞24h后,HepG2細(xì)胞活力呈先上升后下降的趨勢.其中1.6,8?mol/L處理組相對(duì)于對(duì)照組明顯上升,隨后在1000?mol/L顯著下降.作用48h后,HepG2細(xì)胞活力呈下....

圖2DEHP對(duì)HepG2肝癌細(xì)胞ATP含量的影響

由圖2可知,DEHP刺激48h后與對(duì)照組相比,低濃度DEHP暴露對(duì)細(xì)胞內(nèi)ATP含量無明顯影響,只在高濃度(1000?mol/L)時(shí)極顯著下降.2.3DEHP對(duì)HepG2細(xì)胞NO、TNF-?、IL-6的影響

圖4DEHP處理24,48h對(duì)HepG2細(xì)胞中sirt1、pgc-1?、nrf1、tfam蛋白表達(dá)水平的影響

由圖4可知,DEHP作用于HepG2細(xì)胞處理24h后,各組細(xì)胞sirt1/pgc-1?通路相關(guān)蛋白水平變化均沒有顯著變化.DEHP作用于HepG2細(xì)胞48h后,細(xì)胞中sirt1、pgc-1?、nrf1、tfam蛋白表達(dá)水平都隨劑量增加呈逐先上升后下降趨勢.處理48h后,與對(duì)照組相....

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