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油菜根腫病微生物調(diào)控防治研究

發(fā)布時(shí)間:2020-11-06 15:06
   十字花科根腫病是一種世界性的土傳病害,由于根腫病菌(Plasmodiophora brassicae)具有隨種子傳播、在土壤中長(zhǎng)期存活的特點(diǎn),造成該病在我國(guó)迅速蔓延。本試驗(yàn)從油菜根際土壤分離篩選獲得5株能有效抑制根腫病菌孢子萌發(fā)的菌株,通過盆栽試驗(yàn)和田間小區(qū)試驗(yàn),研究了單菌株及其復(fù)合菌劑的防病效果,獲得如下主要結(jié)果:(1)本試驗(yàn)從油菜及土壤中分離獲得83株內(nèi)生和根際細(xì)菌,將獲得的菌株以及實(shí)驗(yàn)室保存的菌株進(jìn)行抑制根腫病菌孢子萌發(fā)試驗(yàn),抑制效果較好的JN8、DN18、DN21、DN47和DG6菌株,其孢子萌發(fā)抑制率分別為70.8%、68.8%、65.6%、67.7%和66.7%;通過菌株生理生化指標(biāo)測(cè)定結(jié)合16S rDNA序列對(duì)比,確定JN8為蠟狀芽孢桿菌(Bacillus cereus),DN18為蘇云金芽孢桿菌(Bacillus thuringiensis),DN21為解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens),DN47為膠質(zhì)芽孢桿菌(Bacillus mucilaginosus)。(2)通過單因素水平試驗(yàn)和正交設(shè)計(jì)試驗(yàn),對(duì)篩選獲得的芽孢桿菌和不吸水鏈霉菌進(jìn)行培養(yǎng)條件優(yōu)化。4株芽孢桿菌最優(yōu)培養(yǎng)條件為牛肉膏9g/L,蛋白胨5g/L,氯化鈉5g/L,培養(yǎng)溫度為30℃;不吸水鏈霉菌DG6最優(yōu)培養(yǎng)條件為可溶性淀粉20g/L,蛋白胨2g/L,碳酸鈣3g/L,氯化鈉4g/L,磷酸氫二鉀1g/L,硫酸鎂1g/L,培養(yǎng)溫度為30℃。(3)單菌株防治油菜根腫病盆栽試驗(yàn)結(jié)果表明,5個(gè)拮抗菌株的防效分別為52.9%、55.9%、52.9%、54.4%、51.5%,防治效果均在50%以上。復(fù)合菌株防病盆栽試驗(yàn)結(jié)果表明,菌株組合A12(DG6-JN8-DN21)、A15(DG6-JN8-DN18)和A17(DG6-JN8-DN47)的防效明顯高于單個(gè)菌株,分別為67.6%、64.9%、68.9%,防治效果均達(dá)到了60%以上。(4)復(fù)合菌株(A12、A15和A17)田間小區(qū)試驗(yàn)結(jié)果表明,組合A12、A15和A17能有效防控油菜根腫病,防治效果分別為65.8%、66.3%、65.9%,最高防效可達(dá)66.3%;組合A12、A15和A17的油菜平均單株重量比對(duì)照分別增加了5.98g、14.06g、8.64 g,分別提高了6%,15%和9%。
【學(xué)位單位】:沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位年份】:2018
【中圖分類】:S435.654
【部分圖文】:

根腫,發(fā)育史,休眠孢子,原生質(zhì)


圖 1-1 根腫菌的發(fā)育史-1 The development history of root swell bacter毛形成初生原生質(zhì)團(tuán) 4.在初生原生質(zhì)團(tuán)內(nèi)同步的有絲分裂 5.多成單核游動(dòng)孢子 9.游動(dòng)孢子 10.質(zhì)配 11.雙核次生原生質(zhì)團(tuán) 12 15.原生質(zhì)團(tuán)的細(xì)胞質(zhì)分裂形成單倍體的休眠孢子究液的制備最早是由 MacFarlane 在 1958 離心獲得了根腫菌的休眠孢子,但是此不利于對(duì)休眠孢子的觀察和保存。同時(shí)組織中提取到的休眠孢子的萌發(fā)率要高Friberg 等,2005)。1994 年,Castlebui,選用了 LUDOX 法純化來提取休眠孢懸浮液(LA Castlebury 等,1994)。肖了 10%的次氯酸鈉作為消毒滅菌劑,

菌落形態(tài),菌落形態(tài),細(xì)胞形態(tài),菌株


圖 2-1 菌株 DN21 菌落形態(tài)與細(xì)胞形態(tài)Fig.2-1 Colony morphology and cell morphology of strain DN21圖 2-2 菌株 DN18 菌落形態(tài)與細(xì)胞形態(tài)Fig.2-2 Colony morphology and cell morphology of strain DN18

菌落形態(tài),菌落形態(tài),細(xì)胞形態(tài),菌株


第二章 油菜根腫病拮抗菌的篩選和鑒定分別為 66.7%、68.8%、70.8%、65.6%和 67.7%;抑制孢步鑒定狀圖 2-1 菌株 DN21 菌落形態(tài)與細(xì)胞形態(tài)Fig.2-1 Colony morphology and cell morphology of strain DN21
【參考文獻(xiàn)】

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