發(fā)布時間：2024-06-05 03:56

　　昆蟲免疫反應(yīng)與其生長發(fā)育時期具有相關(guān)性,不同的發(fā)育階段昆蟲抵抗病原物感染的能力不同。為探討免疫反應(yīng)和生長發(fā)育的相互關(guān)系,本研究對小菜蛾(Plutella xyllostella)不同生長發(fā)育階段的轉(zhuǎn)錄組進(jìn)行測序,利用生物信息學(xué)分析了小菜蛾不同發(fā)育時期的差異表達(dá)相關(guān)基因和可變剪接,篩選了小菜蛾免疫與發(fā)育的共同調(diào)控因子及差異基因,為探討害蟲免疫與發(fā)育的相互關(guān)系提供了分子網(wǎng)絡(luò);C型凝集素(C-type lectins,CTLs)是一類含有特異性糖類識別域(carbohydrate-recognition domain,CRD)的Ca²⁺依賴型模式識別受體,能特異性地識別病原物并且可以啟動免疫反應(yīng),在昆蟲免疫與發(fā)育中具有重要作用。運用RT-PCR結(jié)合RACE技術(shù)克隆了Px CTL5基因的全長序列,以此為基礎(chǔ),在體外進(jìn)行了高效原核表達(dá),并制備了多克隆抗體;分別利用qRT-PCR技術(shù)和Western blot技術(shù)檢測其在不同細(xì)菌誘導(dǎo)后mRN A和蛋白水平上的表達(dá)模式;利用PxCTL5蛋白的凝集活性檢測了對不同細(xì)菌的凝集作用。本研究結(jié)果為研究免疫與發(fā)育的相互調(diào)控作用提供了分子理...

【文章頁數(shù)】：88 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1昆蟲免疫信號通路（Hultmark,2003）

3圖1昆蟲免疫信號通路（Hultmark,2003）1.1.2絲氨酸蛋白酶級聯(lián)反應(yīng)絲氨酸蛋白酶（serineproteinases，SP）是一類蛋白水解酶，以絲氨酸為活性中心，在昆蟲免疫防御反應(yīng)、生長發(fā)育過程、消化代謝和胚胎發(fā)育中有著重要作用（Ruiz-Perezet....

圖2昆蟲免疫反應(yīng)中的蛋白酶級聯(lián)反應(yīng)（Kanostetal.,2015）

當(dāng)特異性位點被剪切或去除時被激活。胞外絲氨酸蛋白酶通路已經(jīng)在動物演化成對組織損傷和病原物入侵的刺激作出快速反應(yīng)的機制（Cereniusetal.,2010）絲氨酸蛋白酶含有一個或多個氨基末端剪接域（clipdomain）在調(diào)節(jié)昆蟲的一些免疫反應(yīng)的細(xì)胞外途徑中起作用。SP....

圖3昆蟲免疫和發(fā)育通路中的蛋白級聯(lián)反應(yīng)（Jangetal.,2006）

和Easter是參與發(fā)育和免疫的兩種不同蛋白酶級聯(lián)的末端蛋白酶，但兩者作用都是加工Sptzle以激活Toll信號途徑。SPE與Easter本質(zhì)區(qū)別是需要不同的激活機制，Toll信號途徑被不同觸發(fā)器激活，可以在非常不同的生理過程中使用。絲氨酸蛋白酶抑制劑Spn....

圖4RNA-Seq測序流程圖

組織研磨器：天根生化科技有限公司。方法組測序樣品收集小菜蛾的生長發(fā)育歷期，每隔12小時分別收集4齡幼蟲期小菜蛾6個樣品7個樣品和成蟲期小菜蛾8個樣品。每個樣品均在收集后迅速放入液氮罐，取出后迅速轉(zhuǎn)移至超低溫冰箱。組測序集到的小菜蛾4齡幼蟲期、蛹期和成蟲期的各個樣品分別混在一起....

本文編號：3989615