舞毒蛾Methuselah-like受體激動劑性肽功能分析
發(fā)布時間：2020-12-11 07:29
舞毒蛾（Lymantria dispar）是一種世界性的害蟲,對森林造成嚴(yán)重的危害。目前對舞毒蛾的防治仍以化學(xué)防治為主,而其導(dǎo)致的“3R”問題亦不容忽視。因此,尋找新的分子作用靶標(biāo)來創(chuàng)制新型殺蟲劑進行無公害防治具有重要意義。研究報道Mth受體對一系列外界脅迫因素（饑餓、高溫、氧化）的耐受性顯著增強。昆蟲Mth受體的結(jié)構(gòu)功能、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的研究,為我們揭示生物衰老機制提供了新的途徑,而其內(nèi)源性配體研究將為我們研究Mth受體的功能和新殺蟲劑靶標(biāo)的創(chuàng)制打開新思路。本研究以亞洲型舞毒蛾為對象,克隆Mthl受體內(nèi)源性配體性肽（Sex Peptide,命名為LdSP）基因,并對LdSP基因進行生物信息學(xué)分析,利用RNAi技術(shù)和轉(zhuǎn)基因果蠅技術(shù)分析LdSP基因?qū)ハx生長發(fā)育、新陳代謝及抗逆性的影響。具體研究結(jié)果如下:1、成功從舞毒蛾轉(zhuǎn)錄組文庫中篩選1個Methuselah-like受體內(nèi)源性配體基因序列,并克隆LdSP基因全長。LdSP基因的閱讀框（ORF）長度為1263 bp,編碼420個氨基酸,蛋白質(zhì)分子量為48.79 kDa,pI為8.79,為堿性蛋白,不含信號肽,LdSP蛋白具有G蛋白偶聯(lián)受體...
【文章來源】：東北林業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】：68 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
圖１－１黑腹果蠅Ｍｔｈ受體胞外結(jié)構(gòu)域１７１??－１７１??
２．３．１?ＲＮＡ提取和消化??提取的舞毒蛾ＲＮＡ電泳條帶整齊，２８Ｓ?ｒＲＮＡ條帶亮度約為１８Ｓ?ｒＲＮＡ的１．５￣２．０倍??（圖２－１），說明ＲＮＡ完整性好，可用于反轉(zhuǎn)錄，進行實時熒光定量ＰＣＲ。??：?ｆ??圖２－１舞毒蛾各齡期總ＲＮＡ??Ｆｉｇ．?２－１?Ｔｏｔａｌ?ＲＮＡ?ｏｆ?Ｌｙｎｍｎｔｒｉａ?ｄｉｓｐａｒ?ｏｉ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ?ｓｔａｇｅｓ??注：１：．？卵；２：?１齡；３：?２齡；４：?３齡；５：?４齡；６：?５齡；７：?６齡；８、９：蛹；１０：雄成蟲；１１：雌成蟲??２．３．２?Ｌ必／＾基因克隆??ＲＴ－ＰＣＲ檢測Ｕ斯基因大小與預(yù)期結(jié)果一致（圖２－２和２－３），可以進行如下試驗。??，〇〇〇ｂ，＾＇??－１２－??
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【參考文獻】：
期刊論文
[1]轉(zhuǎn)LdOA1基因果蠅品系GSTs基因表達及對溴氰菊酯脅迫響應(yīng)[J]. 孫麗麗,劉鵬,王志英,梁斌,曹傳旺. 北京林業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2016(06)
[2]沉默GSTs基因影響棉鈴蟲對甲氧蟲酰肼的敏感性[J]. 徐希寶,張靖,芮昌輝. 植物保護. 2015(02)
[3]轉(zhuǎn)飛蝗CYP408B1和CYP409A1基因果蠅品系對殺蟲劑的敏感性[J]. 高翠娥,張建琴,張徐波,張建珍,封云濤,吳�；�,馬恩波. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2015(06)
[4]荊條蜜對果蠅生長發(fā)育和抗氧化能力的影響[J]. 柴霞,許志軍,李芝彪,魏園媛,馮曉磊,陶樹興. 食品工業(yè)科技. 2013(12)
[5]淺談轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應(yīng)用[J]. 閆紅. 科技創(chuàng)業(yè)家. 2013(04)
[6]果蠅長壽基因methuselah的研究進展[J]. 張正紅,張儒. 昆蟲學(xué)報. 2012(12)
[7]RNA干擾在昆蟲中的作用機理及應(yīng)用進展[J]. 施秀珍,吳青君,王少麗,徐寶云,謝文,張友軍. 生物安全學(xué)報. 2012(03)
[8]果蠅來源的GPCR Methuselah G蛋白偶聯(lián)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路研究[J]. 張靜,張儒,葉晨立,謝欣. 中國細胞生物學(xué)學(xué)報. 2011(08)
[9]動物轉(zhuǎn)基因新技術(shù)研究進展[J]. 孫振紅,苗向陽,朱瑞良. 遺傳. 2010(06)
[10]舞毒蛾研究進展[J]. 侯雅芹,南楠,李鎮(zhèn)宇. 河北林果研究. 2009(04)
博士論文
[1]花絨寄甲轉(zhuǎn)錄組測序及重要功能基因分析[D]. 張偉.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2014
本文編號：2910130
【文章來源】：東北林業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】：68 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
圖１－１黑腹果蠅Ｍｔｈ受體胞外結(jié)構(gòu)域１７１??－１７１??
２．３．１?ＲＮＡ提取和消化??提取的舞毒蛾ＲＮＡ電泳條帶整齊，２８Ｓ?ｒＲＮＡ條帶亮度約為１８Ｓ?ｒＲＮＡ的１．５￣２．０倍??（圖２－１），說明ＲＮＡ完整性好，可用于反轉(zhuǎn)錄，進行實時熒光定量ＰＣＲ。??：?ｆ??圖２－１舞毒蛾各齡期總ＲＮＡ??Ｆｉｇ．?２－１?Ｔｏｔａｌ?ＲＮＡ?ｏｆ?Ｌｙｎｍｎｔｒｉａ?ｄｉｓｐａｒ?ｏｉ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ?ｓｔａｇｅｓ??注：１：．？卵；２：?１齡；３：?２齡；４：?３齡；５：?４齡；６：?５齡；７：?６齡；８、９：蛹；１０：雄成蟲；１１：雌成蟲??２．３．２?Ｌ必／＾基因克隆??ＲＴ－ＰＣＲ檢測Ｕ斯基因大小與預(yù)期結(jié)果一致（圖２－２和２－３），可以進行如下試驗。??，〇〇〇ｂ，＾＇??－１２－??
?Ｔｎｒ?Ｖ＊９ｌ?Ｉｒｏ?１＞ｔ??Ａｆｆｉｒｍ?Ｕｏｉ??圖２－６?ＬｄＳＰ蛋白的氨基酸組成??Ｆｉｇ．２－６?Ａｍｉｎｏ?ａｃｉｄ?ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ?ｏｆ?ＬｄＳＰ?ｐｒｏｔｅｉｎ??用ＳｉｇｎａｌＰ４．１軟件進行信號肽分析，預(yù)測結(jié)果顯示，ＬＷＰ基因不含信號肽序列??（圖２－７）�？缒そY(jié)構(gòu)分析結(jié)果顯示，ＬｄＳＰ蛋白擁有７個跨膜螺旋結(jié)構(gòu)（圖２－８），??跨膜情況見表２－２。ＬｄＳＰ蛋白的保守結(jié)構(gòu)域分析結(jié)果顯示，ＬｄＳＰ蛋白存在Ｇ蛋白??偶聯(lián)受體家族成員基本的７－跨膜受體結(jié)構(gòu)（７ｔｍ－ｌ），屬于ＧＰＣＲｓ?Ｂ家族（圖２－??９）〇??ＳｉｇｎａｌＰ－４．１?ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ?（ｅｕｋ?ｎｅｔｗｏｒｋｓ）：?ＬｄＳＰ??￣￣１?￣Ｃ－ｓｃｏｒｅ?＇?二??－?Ｓ－ｓｃｏ「ｅ?????Ｙ－ｓｃｏｒｅ??０．８?－?－??０．６?－?－??ｃｏ?０－４?－?－??０．２?－?＇?－??〇．〇??Ｗ＾ＱＤ?ＫＥＡ＇ＶＤＹＦＧＤ?ＦＮＡＴ?Ｒ?ＫＤＶ?ＰＮＤＶＴＤＤ?Ｉ?Ｋ?Ｉ?ＮＹ?ＰＹ?ＦＤＮＱＴＱＹ?ＰＣｉ?ＹＳ?Ｎ?ＦＳ?Ｓ?ＥＤ?ＦＣＱＳ?ＮＨ?ＳＨ?ＦＹ?ＬＮＶＴＣ?ＥＦ?Ｆ??０?１０?２０?３０?４０?５０?６０?７０??Ｐｏｓｉｔｉｏｎ??圖２－７?ＬｄＳＰ蛋白信號肽分析??Ｆｉｇ．?２－７?Ｓ
【參考文獻】：
期刊論文
[1]轉(zhuǎn)LdOA1基因果蠅品系GSTs基因表達及對溴氰菊酯脅迫響應(yīng)[J]. 孫麗麗,劉鵬,王志英,梁斌,曹傳旺. 北京林業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2016(06)
[2]沉默GSTs基因影響棉鈴蟲對甲氧蟲酰肼的敏感性[J]. 徐希寶,張靖,芮昌輝. 植物保護. 2015(02)
[3]轉(zhuǎn)飛蝗CYP408B1和CYP409A1基因果蠅品系對殺蟲劑的敏感性[J]. 高翠娥,張建琴,張徐波,張建珍,封云濤,吳�；�,馬恩波. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2015(06)
[4]荊條蜜對果蠅生長發(fā)育和抗氧化能力的影響[J]. 柴霞,許志軍,李芝彪,魏園媛,馮曉磊,陶樹興. 食品工業(yè)科技. 2013(12)
[5]淺談轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應(yīng)用[J]. 閆紅. 科技創(chuàng)業(yè)家. 2013(04)
[6]果蠅長壽基因methuselah的研究進展[J]. 張正紅,張儒. 昆蟲學(xué)報. 2012(12)
[7]RNA干擾在昆蟲中的作用機理及應(yīng)用進展[J]. 施秀珍,吳青君,王少麗,徐寶云,謝文,張友軍. 生物安全學(xué)報. 2012(03)
[8]果蠅來源的GPCR Methuselah G蛋白偶聯(lián)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路研究[J]. 張靜,張儒,葉晨立,謝欣. 中國細胞生物學(xué)學(xué)報. 2011(08)
[9]動物轉(zhuǎn)基因新技術(shù)研究進展[J]. 孫振紅,苗向陽,朱瑞良. 遺傳. 2010(06)
[10]舞毒蛾研究進展[J]. 侯雅芹,南楠,李鎮(zhèn)宇. 河北林果研究. 2009(04)
博士論文
[1]花絨寄甲轉(zhuǎn)錄組測序及重要功能基因分析[D]. 張偉.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2014
本文編號：2910130
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