發(fā)布時間：2020-11-12 06:56

　　 本文對'碭山酥梨'和'秋月'在內(nèi)的88個品種進行石細(xì)胞含量的測定,然后以'碭山酥梨'和'秋月'雜交的110個F1代單株為作圖群體,采用GBS分子標(biāo)記技術(shù)結(jié)合“擬測交”策略構(gòu)建了分子遺傳圖譜,并通過KW法和ICIM法對控制梨果實石細(xì)胞性狀進行了 QTL定位研究。梨高密度遺傳圖譜的構(gòu)建和果實石細(xì)胞QTL定位以及候選基因,為今后梨分子標(biāo)記輔助育種提供了可靠的理論依據(jù)和方法材料,也為其遺傳育種及分子標(biāo)記輔助選擇提供了有益的參考,對提高梨果實品質(zhì)具有重要意義。主要結(jié)果如下:1以'碭山酥梨'和'秋月'在內(nèi)的的88個梨品種資源為試材,利用冷凍分離法對成熟期的不同梨果實中的石細(xì)胞含量進行測定。結(jié)果表明:(1)88個梨品種的果肉石細(xì)胞含量平均值為0.227g,其變化范圍為0.032～1.024g,變異系數(shù)為76%。秋子梨品種果肉石細(xì)胞含量總體最高,種間雜交品種最低。(2)基于對梨果實中石細(xì)胞含量頻度分析,同時篩選出'六月酥'、'滿天紅'、'龍泉19'、'中1A3'、'豐水'等5個石細(xì)胞含量低的品種和'金川野生梨2號'、'白皮酥'、'紅香酥'、'八月酥'等4個石細(xì)胞含量高的品種。(3)對不同梨果實中石細(xì)胞含量的聚類分析,將所有的梨品種分為兩大類群,砂梨和白梨存在較近的親緣關(guān)系,秋子梨和種間雜交品種有共同特征。2通過對'碭山酥梨'和'秋月'及雜交F1代群體的果實石細(xì)胞含量進行測定,并進行聚類和頻率分析。聚類分析結(jié)果將112份材料分為父本類群和母本類群,頻率分析結(jié)果顯示作圖頻率分布基本接近正態(tài)分布,因此,此雜交后代群體適合作QTL定位。3利用'碭山酥梨'與'秋月'與的110株雜交F1代群體,以GBS分子標(biāo)記方法構(gòu)建梨的遺傳圖譜,構(gòu)建了一張包含2600個標(biāo)記位點的圖譜,共17個遺傳連鎖群,覆蓋了 1824.11 cM的遺傳距離,每個連鎖群的長度為0.26～1.14cM,平均長度為0.71 cM,每個連鎖群上平均分布153個位點。通過Joinmap5.0分析軟件基于構(gòu)建的遺傳圖譜,結(jié)合F1群體果實石細(xì)胞含量的表型值,利用KW和ICIM法進行了 QTL定位分析,共檢測出16個QTL位點和2個重要區(qū)域。最后通過對16個位點延伸區(qū)域內(nèi)基因以及與2個重要區(qū)域重疊區(qū)域內(nèi)的基因進行KEGG和GO分析,找出了苯丙烷合成途徑,得到了 16個相關(guān)基因并篩選出3個候選基因。
【學(xué)位單位】：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2017
【中圖分類】：S661.2
【部分圖文】：

０．８００；?１７：＞０．８００￣０．８５０；?１８：＞０．８５０￣０．９００；?１９：＞０．９００￣０．９５０；２０：＞０．９５０—?１．０００；２１＞１．０００??２．２不同品種的石細(xì)胞含量的聚類分析??梨果實中總石細(xì)胞含量的變化范圍是從０．０３２?ｇ到１．０２４ｇ?（圖１－３），平均值是??０．２２７?ｇ，變異系數(shù)為７６％。根據(jù)聚類分析結(jié)果（圖１－２），可將所有的梨品種分為兩??大類群。??第一大類分為砂梨、白梨兩大品系，其根據(jù)石細(xì)胞含量又細(xì)分為不同的亞群，即??砂梨Ｉ、砂梨ＩＩ、砂梨ＩＩＩ、砂梨ＩＶ和白梨Ｉ、白梨ＩＩ、白梨ＩＩＩ。砂梨品種共３７個，??石細(xì)胞含量的平均值為０．２２４?ｇ，變化范圍為０．０４６－１．０２４?ｇ?（圖１－３），變異系數(shù)為??８６．８５％；其中白梨品種共１８個，石細(xì)胞含量的平均值為０．２４９?ｇ，變化范圍為??０．０３２￣０．５６１ｇ?（圖?１－３），變異系數(shù)為?６６．１６ｇ。??砂梨品系Ｉ的石細(xì)胞含量區(qū)間為０．０４６？０．０６５?ｇ，共５個，如‘龍泉１９’，‘豐水’、??‘黃金梨’等；砂梨品系ＩＩ的石細(xì)胞含量區(qū)間為０．１０１？０．１４３?ｇ

的典型分布。通過果實石細(xì)胞含量的變異系數(shù)（０．７０５）可知被調(diào)査的群體個體間存在??著明顯的分離，均存在一定數(shù)量的超親類型，性狀在親本間具有一定的差異。??果實石細(xì)胞含量在群體中頻率分布見圖２－２所示，作圖頻率分布基本接近正態(tài)分??布，表明被調(diào)查的性狀受多基因控制，是典型的數(shù)量性狀，因而用此雙親構(gòu)建群體有??可能獲得控制梨果實相關(guān)性狀的ＱＴＬ。??表２－２果實石細(xì)胞含量正態(tài)分布檢測??Ｔａｂｌｅ?４－１?Ｔｅｓｔ?ｏｆ?ｎｏｒｍａｌ?ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ?ｆｏｒ?ｓｔｏｎｅ?ｃｅｌｌ?ｃｏｎｔｅｎｔ?ｉｎ?ｍａｐｐｉｎｇ?ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ??ｍｉ?ｉｉ?標(biāo)準(zhǔn)差?變異系數(shù)?５ｉｉ??Ｔｒａｉｔ?Ｍｅａｎ?ＳＤ?ＣＶ?（％）?Ｋｕｒｔｏｓｉｓ?Ｓｋｅｗｎｅｓｓ??石細(xì)胞含量?０．１５２?０Ａ０１?０．７０５?９．９８２?２．４３３??Ｍｂ??３（＾??〇?ｉ??將ｓ??遐?Ｉ?Ｊ??ｒ?＼??１?１?１?１?Ｍ?１?Ｉｒ＾ＬＪ—．—．??〇〇〇?〇?｜〇?０?２０?Ｏ?ｉＯ?０４０?０?５０?０．６０?０?７０?０８０??石細(xì)胞含量范圍?Ｒａｎｇｅ?ｏｆ?ｓｔｏｎｅ?ｃｅｌｌ?ｃｏｎｔｅｎｔ??圖２－２?ＦＩ后代石細(xì)胞含量在群體中的頻率分布??Ｆｉｇ．２－２?Ｔｈｅ?ｆｒｅｑｕｅｎｃｙ?ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ?ｏｆ?ｓｔｏｎｅ?ｃｅｌｌ?ｃｏｎｔｅｎｔ?ｏｆ?ＦＩ?ｉｎ?ｐ

１．２．２測序?qū)嶒??用干冰將提取的ＤＮＡ運輸至深圳華大基因科技服務(wù)有限公司，采用??ＩｌｌｕｍｉｎａＨｉＳｅａ２０００儀進行測序工作。具體建庫流程如圖４－１所示：首先將提取的ＤＮＡ??進行檢測，質(zhì)量合格的進行樣品、ｂａｒｃｏｄｅ及接頭的準(zhǔn)備及干燥；之后利用限制性酶??（ＲｅｓｔｒｉｃｔＥｎｚｙｍｅ，ＲＥ）?ＡｐｅＫＩ?（ＧＣＷＧＣ）消化?ＤＮＡ；消化后的?ＤＮＡ?片段兩端加接??頭（ａｄａｐｔｅｒ），其中一端的接頭含有ｂａｒｃｏｄｅ序列，另一端的接頭不含有ｂａｒｃｏｄｅ序列；??然后進行Ｐｏｏｌｉｎｇ和純化；純化后進行ＰＣＲ擴增，只有兩端接頭種類不同的片段以及??片段長度在１７０－３５０?ｂｐ之間的可被選擇性擴增；最后純化ＰＣＲ產(chǎn)物并將構(gòu)建好的文??庫質(zhì)檢合格后進行測序。??４．?Ｐｏｏｌ?ＤＮＡｓ?＆?Ｃｌｅａｎ?ｕｐ??６．?Ｃｌｅａｎ?ｕｐ?ＰＣＲ??１．?Ｐｌａｔｅ?ＤＮＡ?＆??ａｄａｐｔｅｒｐｌｆ?ｆ?＼??Ｍ?５．?Ｐｅｒｆｏｒｍ?ｆｅｌ?？，??２．?Ｄｉｇｅｓｔ?ＤＮＡ?ｗｉｔｈ?ＡｐｅＫＩ?７．?Ｅｖａｌｕａｔｅ??３．?Ｌｉｇａｔｅ
【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 張可煒;石細(xì)胞[J];生物學(xué)教學(xué);1992年02期

2 亞爾買買提·哈斯木;阿依夏木;;不同品種梨果實石細(xì)胞含量的比較研究[J];農(nóng)業(yè)科技通訊;2011年11期

3 張振銘;胡化廣;;不同品種梨果實石細(xì)胞含量的比較研究[J];安徽農(nóng)學(xué)通報;2007年16期

4 高運學(xué),朱遠(yuǎn)成;12種藥材石細(xì)胞鑒別[J];時珍國醫(yī)國藥;2000年10期

5 嚴(yán)啟新,潘明順,陳凌云;39種中藥石細(xì)胞特征的研究及分析[J];時珍國藥研究;1998年02期

6 葉紀(jì)溝;中藥材中石細(xì)胞的初步研究[J];中國藥業(yè);1998年01期

7 阿拉木薩,李寶江;梨果實石細(xì)胞團的發(fā)育、分布及其對果實品質(zhì)的影響[J];北方果樹;1999年04期

8 段增強;石細(xì)胞永久制片的新方法[J];河南科學(xué);1996年S1期

9 牟其蕓，李文香，張華云，王善廣，孫萍;梨果實中石細(xì)胞含量測定及與果實品質(zhì)相關(guān)性的研究[J];落葉果樹;1996年01期

10 金延明，李勝華，蔡少青;植物性中藥材石細(xì)胞類型與特征鑒別[J];中國中藥雜志;1994年02期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

1 盧曉鵬;砂梨（Pyrus pyrifolia Nakai）果實石細(xì)胞、褐色果皮和檸檬酸形成機制研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 王紅寶;梨高密度遺傳連鎖圖譜構(gòu)建與石細(xì)胞性狀定位[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2017年

2 劉盼盼;硼肥對梨木質(zhì)素代謝酶及石細(xì)胞合成的影響研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

3 馬策;梨石細(xì)胞形成相關(guān)HCT基因家族分析及MYB基因克隆表達(dá)研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

4 李玲;光強對碭山酥梨石細(xì)胞發(fā)育過程生理代謝的影響[D];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué);2004年

5 王斌;套袋對梨果實糖酸、木質(zhì)素代謝與石細(xì)胞發(fā)育的影響[D];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

6 于娟娟;碭山酥梨石細(xì)胞發(fā)育過程中POD酶學(xué)特性及POD克隆[D];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

7 王丹陽;木質(zhì)素代謝相關(guān)酶在梨石細(xì)胞合成中的作用[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

8 邱景香;碭山酥梨木質(zhì)素超微結(jié)構(gòu)、光譜學(xué)結(jié)構(gòu)及中間產(chǎn)物分析[D];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

9 方志;碭山酥梨肉桂酸4-羥化酶基因克隆及表達(dá)分析[D];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

10 閆沖沖;不同品種梨石細(xì)胞分布及木質(zhì)素結(jié)構(gòu)的研究[D];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

本文編號：2880419