發(fā)布時間：2020-12-01 15:19

　　番茄青枯病是番茄栽培過程中的一個重要細(xì)菌病害,其病原物青枯勞爾氏菌經(jīng)土壤傳播,是病害防治中的一個難題。本實(shí)驗(yàn)室前期分離到一株對番茄青枯菌有抑菌活性,并且具有一定防效的惡臭假單胞菌A1。本文擬探索能否利用合理的技術(shù)方案增強(qiáng)對番茄青枯病的防治效果,并研究A1菌株合成的抑菌活性物質(zhì)是什么:(1)在灌根接種試驗(yàn)中,施用5 mL不同濃度的惡臭假單胞菌A1,雖然每種施用濃度都可以減輕青枯病的發(fā)生,但在OD600=0.6施用濃度時,對青枯病的防治效果最好。7天后比對照的病情指數(shù)低37%,過高濃度施用后防治效果反而有所下降。(2)惡臭假單胞菌A1與生防枯草芽孢桿菌K1沒有相互拮抗作用,將兩種生防菌混合施用后,增強(qiáng)了對番茄青枯病的防效。防治效果最好的比例是2:1,病害發(fā)生延緩4天,在所觀察的各個時間點(diǎn),病情指數(shù)都是最低的。處理后第11天,其它處理的病情指數(shù)都達(dá)到或接近100%時,2:1比例混合的處理的病情指數(shù)只有78%。(3)惡臭假單胞菌A1對番茄成株期的生長有促進(jìn)作用,但高濃度的菌液抑制種子發(fā)芽率。(4)為了解惡臭假單胞菌A1所產(chǎn)生的抑菌活性物質(zhì),本文構(gòu)建了 400個Tn5隨機(jī)插入突變體,其中MATE... 

【文章來源】：福建農(nóng)林大學(xué)福建省

【文章頁數(shù)】：45 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
1 前言
    1.1 茄科青枯病的發(fā)生與防治
    1.2 生物防治在青枯病防控中的應(yīng)用進(jìn)展
        1.2.1 假單胞菌（Pseudomonas）
        1.2.2 芽孢桿菌（Bacillus）
        1.2.3 無致病力青枯菌
        1.2.4 噬菌體
    1.3 本研究的目的意義
2 材料與方法
    2.1 試驗(yàn)材料
        2.1.1 供試菌株和質(zhì)粒
        2.1.2 主要儀器
        2.1.3 培養(yǎng)基及抗生素
        2.1.4 植株材料
    2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.1 惡臭假單胞菌A1與枯草芽孢桿菌K1的最適施用濃度
        2.2.2 惡臭假單胞菌A1與枯草芽孢桿菌K1的相互拮抗檢測
        2.2.3 惡臭假單胞菌A1和枯草芽孢桿菌K1混合菌液的防治試驗(yàn)
        2.2.4 生防菌對番茄出芽和生長的影響
        2.2.5 Tn5轉(zhuǎn)座子插入突變的篩選
        2.2.6 抑菌活性喪失突變體的功能驗(yàn)證
3 結(jié)果
    3.1 生防惡臭假單胞菌A1的最佳施用濃度
    3.2 生防惡臭假單胞菌A1與枯草芽孢桿菌K1的相互拮抗檢測
    3.3 生防枯草芽孢桿菌K1的最佳施用濃度
    3.4 惡臭假單胞菌A1與枯草芽孢桿菌K1混合后增強(qiáng)了對番茄青枯病的防治效果
    3.5 惡臭假單胞菌A1和枯草芽孢桿菌K1在高濃度條件下影響番茄發(fā)芽率
    3.6 惡臭假單胞菌A1抑菌肽突變體篩選
4 分析與討論
參考文獻(xiàn)
附錄A 大腸桿菌熱轉(zhuǎn)化
附錄B 大腸桿菌質(zhì)粒提�。ㄌ旄�生物公司試劑盒）
附錄C DNA回收純化（天根生物公司試劑盒）
附錄D SDS-PAGE電泳所需試劑
附錄E 大腸桿菌感受態(tài)的制備
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文--------
[1]青枯雷爾氏菌拮抗放線菌的篩選及其抗菌活性物質(zhì)的分離[J]. 羅文建,劉雨虹,施河麗,譚軍,王瑞,趙秀云,向必坤.  中國煙草科學(xué). 2017(02)
[2]番茄青枯病植物疫苗膠懸菌劑的制備及其對病害的防治效果[J]. 鄭雪芳,朱育菁,劉波,葛慈斌.  植物保護(hù). 2017(02)
[3]青枯雷爾氏菌噬菌體研究進(jìn)展[J]. 蘇靖芳,于浩,劉俊杰,郭兆奎,孫宏偉,顧剛,王光華.  土壤與作物. 2017(01)
[4]幾種生物藥劑對煙草青枯病防效的研究[J]. 楊興平,左銳,潘首慧,李沛柏,吳洪林,李登發(fā).  現(xiàn)代園藝. 2017(03)
[5]不同藥劑對海南茄子青枯病病原菌的室內(nèi)藥效測定[J]. 周運(yùn)瑤,張斌,林海秀,羅宏偉,李珍,丘鳳蓮,張英樊,王沛政.  海南熱帶海洋學(xué)院學(xué)報. 2016(05)
[6]番茄青枯病生防芽胞桿菌的篩選與鑒定[J]. 鄭雪芳,劉波,朱育菁,葛慈斌,劉國紅.  中國生物防治學(xué)報. 2016(05)
[7]煙草青枯病拮抗菌株X-60的分離鑒定及其表型組學(xué)分析[J]. 汪漢成,王茂勝,黃艷飛,王進(jìn),商勝華,張長青.  植物病理學(xué)報. 2016(03)
[8]假單胞菌產(chǎn)生的抗生素[J]. 張力群,張俊威.  中國生物防治學(xué)報. 2015(05)
[9]放線菌混合菌劑對西瓜枯萎病的防治作用研究[J]. 甘良,藍(lán)星杰,戴蓬博,劉繼紅,王陽,宗兆鋒.  中國生物防治學(xué)報. 2015(04)
[10]莆田市番茄青枯病流行影響因子及防治關(guān)鍵技術(shù)[J]. 蔡瑜,陳祖禎.  現(xiàn)代農(nóng)業(yè). 2015(06)
[1]Identification of a Pseudomonas putida as biocontrol agent for tomato bacterial wilt disease[J] . Dongling Sun,Tao Zhuo,Xun Hu,Xiaojing Fan,Huasong Zou.  Biological Control . 2017
[2]Enhanced in planta Fitness through Adaptive Mutations in EfpR, a Dual Regulator of Virulence and Metabolic Functions in the Plant Pathogen Ralstonia solanacearum[J] . Anthony Perrier,Rémi Peyraud,David Rengel,Xavier Barlet,Emmanuel Lucasson,Jér?me Gouzy,Nemo Peeters,Stéphane Genin,Alice Guidot.  PLOS Pathogens . 2016 (12)
[3]Escaping Underground Nets: Extracellular DNases Degrade Plant Extracellular Traps and Contribute to Virulence of the Plant Pathogenic Bacterium Ralstonia solanacearum[J] . Tuan Minh Tran,April MacIntyre,Martha Hawes,Caitilyn Allen.  PLOS Pathogens . 2016 (6)
[4]Evaluation of biological control agents against Ralstonia wilt on ginger[J] . Wei Yang,Quan Xu,Hong-Xia Liu,Yun-Peng Wang,Yong-Ming Wang,He-Tong Yang,Jian-Hua Guo.  Biological Control . 2012 (3)
[5]Host recognition and integration of filamentous phage ?RSM in the phytopathogen, Ralstonia solanacearum[J] . Ahmed Askora,Takeru Kawasaki,Shoji Usami,Makoto Fujie,Takashi Yamada.  Virology . 2008 (1)
[6]Highly specific PCR-diagnosis to determine Pseudomonas solanacearum strains of different geographical origins[J] . F. Hartung,R. Werner,H.-P. Mühlbach,C. Büttner.  TAG Theoretical and Applied Genetics . 1998 (6-7)
[7]Thermal asymmetric interlaced PCR: automatable amplification and sequencing of insert end fragments from P1 and YAC clones for chromosome walking[J] . Yao-Guang Liu,Robert F. Whittier.  Genomics . 1995 (3)
[8]Four new derivatives of the broad-host-range cloning vector pBBR1MCS, carrying different antibiotic-resistance cassettes[J] . Michael E. Kovach,Philip H. Elzer,D. Steven Hill,Gregory T. Robertson,Michael A. Farris,R.Martin Roop,Kenneth M. Peterson.  Gene . 1995 (1)
[9]Biological control of bacterial wilt caused by Pseudomonas solanacearum in India with antagonistic bacteria[J] . C. S. Anuratha,S. S. Gnanamanickam.  Plant and Soil . 1990 (1)



本文編號：2894913