發(fā)布時間：2020-12-04 14:08

　　類彈性蛋白（Elastin-Like Polypeptides,ELPs）是一種參照彈性蛋白中高度重復(fù)序列、通過基因工程技術(shù)構(gòu)建的由五肽重復(fù)序列Val-Pro-Gly-Xaa-Gly（VPGXG）n串聯(lián)重復(fù)而成的多肽,其中Xaa稱為客座殘基,是除了Pro以外的任意一種氨基酸,Xaa和重復(fù)次數(shù)n不同,則ELPs不同。ELPs與天然彈性蛋白相似,具有良好的細(xì)胞相容性,在體內(nèi)可降解為天然氨基酸,免疫排斥反應(yīng)低。當(dāng)外界溫度低于相變溫度時,ELPs處于溶解狀態(tài),當(dāng)外界溫度高于相變溫度（Transition temperature,Tt）時,ELPs自動聚集,從溶液中析出形成沉淀,該特性被稱為相轉(zhuǎn)變特性,已被廣泛用于組織工程材料、藥物靶向遞送和蛋白純化研究。課題組的前期工作已經(jīng)構(gòu)建了多種序列組成ELPs,但是其相轉(zhuǎn)變溫度較高,用作藥物遞送載體或組織工程材料的潛力不大,也難以實現(xiàn)廉價的相變循環(huán)純化。因此,本課題的目的是在文獻(xiàn)資料基礎(chǔ)上,設(shè)計、構(gòu)建、篩選相轉(zhuǎn)變溫度較低、生物相容性較好的ELPs,為研制藥物靶向遞送載體、組織工程材料分子奠定基礎(chǔ)。目的:篩選出相變溫度接近體溫、生物活性較好的ELPs。方法... 

【文章來源】：西北大學(xué)陜西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

BglⅠ酶切檢測結(jié)果

2 Nco Ⅰ& Xho Ⅰ雙酶切檢測結(jié)果未酶切的 pUC18; 2-7: Nco Ⅰ& Xho Ⅰ對突變的 pUC18 質(zhì)粒進(jìn)行檢測，電粒未被切開，泳道中只出現(xiàn)一條pUC18 載體中的 Bgl Ⅰ酶切位點(diǎn)18 質(zhì)粒被切開，泳道中出現(xiàn)兩條 pUC18 載體中成功引入 Nco Ⅰ酶切的 pUC18 質(zhì)粒被切開，泳道0bp，說明多克隆位點(diǎn)起始處的 酶切的 pUC18 質(zhì)粒被切開，泳道bp~3000bp，引入的 Nco Ⅰ酶切位ar Ⅰ之后，因此 pUC18 載體可以

圖 3 多種限制性內(nèi)切酶酶切檢測結(jié)果AMarker Ⅲ; 1: 未酶切的 pUC18; 2: Bgl Ⅰ單酶切; 3: Nco Ⅰ& Xho Ⅰo Ⅰ雙酶切; 5: Nco Ⅰ& Nar Ⅰ雙酶切; 6: BamH Ⅰ& Hind Ⅲ雙酶切;Ⅰ雙酶切; 8: Nco Ⅰ& Pst Ⅰ雙酶切; 9: Nco Ⅰ& Kpn Ⅰ雙酶切隆載體突變測序結(jié)果功的 pUC18 載體質(zhì)粒送至上海生工生物工程有限公司進(jìn)行示，突變后的 pUC18 載體全長為 2689bp，引入的 Nco Ⅰ、gl Ⅰ酶切位點(diǎn)與預(yù)期結(jié)果完全相同。經(jīng)過 DNAMAN 軟件的 次突變，但不影響這種 pUC18 克隆載體的正�？截�。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]類彈性蛋白多肽的分子動力學(xué)研究[J]. 張光亞,陳智山,李紅春,黃凱宗.  計算機(jī)與應(yīng)用化學(xué). 2011(04)
[2]類彈性蛋白多肽及其在生物醫(yī)學(xué)材料的應(yīng)用[J]. 黃凱宗,王文研,張光亞.  中國生物工程雜志. 2010(05)

碩士論文
[1]類彈性蛋白融合止血肽RADA-16的止血性能研究[D]. 楊莎莎.西北大學(xué) 2018
[2]類彈性蛋白—堿性成纖維細(xì)胞生長因子融合蛋白的制備及活性研究[D]. 魏琪.西北大學(xué) 2016
[3]類人彈性蛋白—堿性成纖維細(xì)胞生長因子融合蛋白的原核表達(dá)、分離純化和生物性能研究[D]. 趙軼君.西北大學(xué) 2014



本文編號：2897739