發(fā)布時間：2024-05-21 19:12

　　線粒體是細胞有氧能量代謝的重要器官,線粒體研究對動物高原適應(yīng)性、低氧脅迫耐受性具有重要意義;越來越多的疾病被發(fā)現(xiàn)是線粒體基因組發(fā)生突變造成的。因此,線粒體基因組編輯逐漸成為了科學家們的研究熱點。隨著CRISPR/Cas9技術(shù)的迅速發(fā)展和完善,鑒于鋅指核酸酶(Zinc-Finger Nucleases,ZFNs)、TALE核酸酶(Transcription Activator-Like Effector Nucleases,TALENs)等核酸酶技術(shù)在哺乳動物線粒體基因組編輯方面的成功應(yīng)用,人們開始嘗試改造CRISPR/Cas9系統(tǒng)進行線粒體基因組編輯。CRISPR/Cas9系統(tǒng)主要是利用Cas9核酸酶與單鏈導(dǎo)向RNA(sg RNA)復(fù)合物,通過更有效地誘導(dǎo)基因組DNA中特定位點的雙鏈斷裂,進而實現(xiàn)高效的基因組編輯。對于線粒體基因組DNA(mt DNA)來說,其雙鏈斷裂的修復(fù)機制尚不明確,細胞會在清除斷裂mt DNA的同時增加其拷貝數(shù)至正常水平。另外,RNA進入線粒體的機制亦不明確,利用CRISPR/Cas9系統(tǒng)進行mt DNA編輯時,sg RNA的線粒體靶向遞送尚存在困難。本研究針對哺...

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1-1鋅指核酸酶識別靶序列示意圖(Urnov,FDetal.2010)

西北農(nóng)林科技大學碩士學位論文2圖1-1鋅指核酸酶識別靶序列示意圖(Urnov,FDetal.2010)Fig.1-1Sketchofazincfingernuclease(ZFN)dimerbindingtoitstarget(Urnov,FDetal.2010)2001年，Bi....

圖1-2TALE核酸酶識別靶序列示意圖(Nemudryi,AAetal.2014)

第一章文獻綜述3結(jié)合域進行改造，開發(fā)特異性的人工TALE核酸內(nèi)切酶，并成功實現(xiàn)了對酵母基因組DNA的靶向切割(Christian,Metal.2010)。圖1-2TALE核酸酶識別靶序列示意圖(Nemudryi,AAetal.2014)Fig.1-2TALENucleaseIde....

圖1-3CRISPR/Cas系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)

西北農(nóng)林科技大學碩士學位論文4圖1-3CRISPR/Cas系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)Fig.1-3StructureoftheCRISPR/CassystemCRISPR/Cas系統(tǒng)根據(jù)Cas蛋白的不同分為3類，分別為I型、II型和III型�，F(xiàn)在人們常用的來自于嗜熱鏈球菌的CRISPR/Cas9....

圖1-4雙RNA和單鏈RNA介導(dǎo)的CRISP

西北農(nóng)林科技大學碩士學位論文4圖1-3CRISPR/Cas系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)Fig.1-3StructureoftheCRISPR/CassystemCRISPR/Cas系統(tǒng)根據(jù)Cas蛋白的不同分為3類，分別為I型、II型和III型。現(xiàn)在人們常用的來自于嗜熱鏈球菌的CRISPR/Cas9....

本文編號：3979805