發(fā)布時間：2020-11-19 18:25

【摘要】：本文采用白首烏蛋白為主要材料,果膠、玉米油為輔助材料,對姜黃素構(gòu)建遞送體系,旨在改善姜黃素一類功能活性物質(zhì)生物利用率低、穩(wěn)定性差等限制其應(yīng)用的缺點,本文中構(gòu)建出三種不同遞送體系,具體研究內(nèi)容及實驗結(jié)果如下:(1)蛋白遞送體系:以白首烏蛋白、大豆蛋白為原料。對姜黃素與白首烏蛋白與大豆蛋白相互作用進行比較研究。通過采用穩(wěn)態(tài)熒光分析、傅里葉-變換紅外光譜分析、圓二色譜分析、差示掃描量熱分析以及粒徑和姜黃素的熱穩(wěn)定性分析。得出姜黃素通過靜態(tài)方式淬滅白首烏蛋白和大豆蛋白的內(nèi)源熒光,在疏水相互作用,發(fā)生吉布斯自由能降低的自發(fā)反應(yīng)。條件相同下姜黃素與大豆蛋白的結(jié)合能力略高于白首烏蛋白。傅里葉-變換紅外光譜分析進一步證實了姜黃素與兩種蛋白質(zhì)通過疏水相互作用結(jié)合。姜黃素結(jié)合改變了兩種蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)。白首烏蛋白與大豆蛋白蛋白可以有效提高姜黃素在熱處理過程中的穩(wěn)定性,白首烏蛋白的保護效果相對較弱。(2)復(fù)合納米遞送體系:以白首烏蛋白、果膠為材料,通過熱處理,白首烏蛋白/果膠在pH 3.5形成可溶性靜電復(fù)合物制備納米顆粒。結(jié)果顯示白首烏蛋白/低甲酯化果膠納米粒子相比,白首烏蛋白/高甲酯化納米粒子尺寸更小,結(jié)構(gòu)更緊密,表面絕對電勢和疏水性更高。姜黃素主要通過氫鍵和疏水相互作用被包埋于納米載體內(nèi),納米復(fù)合物可以顯著增強在紫外線照射下姜黃素的光穩(wěn)定性。(3)白首烏蛋白與果膠在不同pH條件下形成復(fù)合的凝聚物,發(fā)現(xiàn)白首烏蛋白/果膠復(fù)合凝聚物在pH 3~4過程中時復(fù)合凝聚物粒徑達最大值,在pH和操作條件相同下,白首烏蛋白:果膠比例在4:1時,復(fù)合凝聚物具有更佳流變性,且高甲酯化果膠相比于低甲酯化果膠具有更好的流變特性,持油性也更佳,為后續(xù)制備高內(nèi)相乳液打下理論基礎(chǔ)。乳液遞送體系:根據(jù)復(fù)合凝聚物,高壓均質(zhì)制備高內(nèi)相乳液,觀察外觀,通過光學(xué)顯微鏡和激光共聚焦觀察內(nèi)部微觀狀態(tài),進一步通過流變學(xué)和觸變實驗研究高內(nèi)相乳液的粘彈性。結(jié)構(gòu)表明,在適宜pH條件下,呈現(xiàn)奶油體狀,乳液穩(wěn)定性良好,可穩(wěn)定儲存。后負(fù)載活性物質(zhì)姜黃素,研究荷載了姜黃素乳液的物理性能,實驗結(jié)果表明,負(fù)載了姜黃素的高內(nèi)相乳液流變學(xué)特性良好,證明其內(nèi)部有凝膠網(wǎng)絡(luò)體系穩(wěn)固,姜黃素在該乳液中抗輻,可提高了姜黃素的生物利用度。
【學(xué)位授予單位】：哈爾濱商業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2020
【分類號】：TS201.2
【圖文】：

哈爾濱商業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文第14頁圖2-1不同濃度（0-44.8×10-5M）姜黃素對CAP（A）和SPI（B）熒光發(fā)射光譜的影響在激發(fā)波長278nm條件下Fig2-1Effectsofcurcuminatdifferentconcentrations(0-44.8×10-5M)onCAP(A)andSPI(B)fluorescenceemissionspectraattheexcitationwavelengthof278nm圖2-2Cur與CAP（A）和SPI（B）在35、42、49℃溫度下相互作用的Stern-Volmer曲線Fig2-2Stern-volmercurveofCurinteractingwithCAP(A)andSPI(B)at35,42and49℃表2-1Cur與CAP和SPI在35、42、49℃溫度下結(jié)合的Stern-VolmerTab2-1Stern-volmerofCurcombinedwithCAPandSPIat35,42and49℃T(°C)Stern-volmerequationKSV（L/mol）Kq（L/mol/s）R2Cur-CAP35F0/F=1.299+4.851×103[Cur]4.851×1034.851×10110.90142F0/F=1.190+4.676×103[Cur]4.676×1034.676×10110.97849F0/F=1.167+4.277×103[Cur]4.277×1034.277×10110.985Cur-SPI35F0/F=2.125+7.914×103[Cur]7.914×1037.914×10110.96042F0/F=1.986+7.134×103[Cur]7.134×1037.134×10110.96449F0/F=1.726+6.971×103[Cur]6.971×1036.971×10110.985

哈爾濱商業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文第14頁圖2-1不同濃度（0-44.8×10-5M）姜黃素對CAP（A）和SPI（B）熒光發(fā)射光譜的影響在激發(fā)波長278nm條件下Fig2-1Effectsofcurcuminatdifferentconcentrations(0-44.8×10-5M)onCAP(A)andSPI(B)fluorescenceemissionspectraattheexcitationwavelengthof278nm圖2-2Cur與CAP（A）和SPI（B）在35、42、49℃溫度下相互作用的Stern-Volmer曲線Fig2-2Stern-volmercurveofCurinteractingwithCAP(A)andSPI(B)at35,42and49℃表2-1Cur與CAP和SPI在35、42、49℃溫度下結(jié)合的Stern-VolmerTab2-1Stern-volmerofCurcombinedwithCAPandSPIat35,42and49℃T(°C)Stern-volmerequationKSV（L/mol）Kq（L/mol/s）R2Cur-CAP35F0/F=1.299+4.851×103[Cur]4.851×1034.851×10110.90142F0/F=1.190+4.676×103[Cur]4.676×1034.676×10110.97849F0/F=1.167+4.277×103[Cur]4.277×1034.277×10110.985Cur-SPI35F0/F=2.125+7.914×103[Cur]7.914×1037.914×10110.96042F0/F=1.986+7.134×103[Cur]7.134×1037.134×10110.96449F0/F=1.726+6.971×103[Cur]6.971×1036.971×10110.985

哈爾濱商業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文第15頁對于靜態(tài)淬滅，研究者多采用雙對數(shù)Stern-Volmer模型來研究小分子與蛋白質(zhì)的結(jié)合常數(shù)Kb和結(jié)合位點數(shù)n[47]：。圖2-3Cur與CAP（A）和SPI（B）在35、42、49℃溫度下Stern-Volmer曲線Fig2-3CurandCAP(A)andSPI(B)curvesstern-volmerat35,42and49℃如圖2-3所示，Cur與兩種蛋白質(zhì)互作的雙倒數(shù)Stern-Volmer曲線的線性擬合度較高（R2>0.94），在不同溫度條件下。因此，Kb和n可以通過擬合直線與y軸的交點和斜率來確定。在溫度35、42和49°C條件下，Cur與CAP的結(jié)合常數(shù)分別為7.620×103、8.786×103以及9.508×103L/mol，而Cur與SPI的結(jié)合常數(shù)分別為8.382×103、9.183×103、9.931×103L/mol（表2-2）。由此可知，Cur與兩種蛋白質(zhì)的結(jié)合常數(shù)均隨溫度的升高而增加，并且相同溫度下Cur與SPI的結(jié)合常數(shù)高于CAP。Cur與CAP或者SPI互作的結(jié)合位點數(shù)接近于1，表明兩者之間形成了一個結(jié)合位點。表2-2Cur與CAP和SPI在35、42、49℃溫度下的結(jié)合常數(shù)Kb、結(jié)合位點數(shù)nTab2-2ThecombinationconstantsofcurcurandCAPandSPIat35,42and49℃wereKbandnT(°C)Double-logarithmStern-volmerequationKb（L/mol）nR2Cur-CAP35Log[(F0-F)/F]=3.882+0.964Log[Cur]7.620×1030.9640.94242Log[(F0-F)/F]=3.944+0.986Log[Cur]8.786×1030.9860.95649Log[(F0-F)/F]=3.978+1.002Log[Cur]9.508×1031.0020.991Cur-SPI35Log[(F0-F)/F]=3.923+0.881log[Cur]8.382×1030.8810.97342Log[(F0-F)/F]=3.963+0.916Log[Cur]9.183×1030.9160.98249Log[(F0-F)/F]=3.997+0.947Log[Cur]9.931×1030.9470.947在此基礎(chǔ)上，進一步結(jié)合熱力學(xué)方程計算Cur與蛋白質(zhì)結(jié)合的吉布斯自由能（ΔG）、焓變（ΔH）和熵變（ΔS）等熱力學(xué)參數(shù):ΔH、ΔS>0主要表現(xiàn)為疏水作用力
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本文編號：2890317