發(fā)布時(shí)間：2020-12-22 03:42

　　光是光合作用的重要原料,為一切光合生物的生長(zhǎng)提供能量。然而,當(dāng)光超過植物能承受的范圍時(shí),則會(huì)起反作用。近年來,自然環(huán)境的變化和人類活動(dòng)的干擾,產(chǎn)生了高光、高溫、干旱等一系列脅迫,直接或間接地影響著植物的CO2同化作用,導(dǎo)致降低光合作用效率,甚至破壞光合器官。為了減緩環(huán)境脅迫對(duì)光合作用的影響,植物在進(jìn)化過程中形成了許多重要的適應(yīng)機(jī)制,例如,環(huán)式電子傳遞（CET）。這一機(jī)制能夠通過形成跨膜質(zhì)子梯度（Δp H）,產(chǎn)生額外ATP,從而達(dá)到改善光合作用的目的。藍(lán)藻中,NADPH脫氫酶（NDH-1）介導(dǎo)的CET（NDH-CET）是一種抵抗高光等脅迫的重要機(jī)制。NDH-1復(fù)合體介導(dǎo)了一系列的能化反應(yīng),包括細(xì)胞呼吸、圍繞系統(tǒng)I（PSI）的CET和CO2吸收。盡管在藍(lán)藻全基因組中不存在與complex I催化活性中心3個(gè)亞基同源的基因,但是從結(jié)構(gòu)上來看,藍(lán)藻NDH-1復(fù)合體類似于細(xì)菌和線粒體呼吸電子傳遞鏈的能量轉(zhuǎn)換器complex I。最近的研究結(jié)果表明,Ndh S亞基的羧基末端與PSI的亞基Psa E存在高度同源,并均包含一個(gè)蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)相互作用的SH3結(jié)構(gòu)域。因此,人們推測(cè)NDH-1可能與PSI存... 

【文章來源】：上海師范大學(xué)上海市

【文章頁(yè)數(shù)】：85 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
縮寫
摘要
Abstract
第1章 文獻(xiàn)綜述 藍(lán)藻環(huán)式電子傳遞的研究進(jìn)展
    摘要
    1.1 前言
    1.2 途徑
        1.2.1 NDH-CET
        1.2.2 FQR-CET
        1.2.3 其它
    1.3 關(guān)鍵酶
        1.3.1 NDH-1
        1.3.2 FQR
    1.4 電子供體
        1.4.1 種類
        1.4.2 進(jìn)化改變
    1.5 本論文研究的目的和意義
第2章 材料方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料和培養(yǎng)條件
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 總DNA提取
        2.2.2 突變體篩選
        2.2.3 構(gòu)建同源重組載體
            2.2.3.1 p UC-Δfg1
            2.2.3.2 p UC-Δfg2
            2.2.3.3 p UC-Δfg3
            2.2.3.4 p EYFP-Fg1-YFP-His6
        2.2.4 RT-PCR檢測(cè)
            2.2.4.1 總RNA提取
            2.2.4.2 RT-PCR
        2.2.5 葉綠素?zé)晒饧癙700氧化還原的檢測(cè)
            2.2.5.1 PQ庫(kù)氧化還原檢測(cè)
            2.2.5.2 P700氧化還原檢測(cè)
        2.2.6 粗類囊體膜提取
        2.2.7 蛋白電泳和免疫印跡
            2.2.7.1 藍(lán)綠凝膠電泳（BN-PAGE）
            2.2.7.2 SDS-PAGE
            2.2.7.3 蛋白免疫印跡
        2.2.8 液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜分析
            2.2.8.1 樣品準(zhǔn)備及酶解
            2.2.8.2 質(zhì)譜分析及數(shù)據(jù)檢索
        2.2.9 融合蛋白的表達(dá)和純化
        2.2.10生長(zhǎng)曲線測(cè)定
        2.2.11 YFP熒光檢測(cè)
            2.2.11.1 樣品準(zhǔn)備
            2.2.11.2 熒光檢測(cè)
第3章 結(jié)果與分析
    3.1 NDH-PSI超分子復(fù)合體的鑒定
        3.1.1 NDH-CET受損突變株的篩選
        3.1.2 fg1基因的缺失影響NDH-CET活性
        3.1.3 Fg1蛋白對(duì)NDH-1L/M復(fù)合體起穩(wěn)定作用
        3.1.4 NDH-PSI超分子復(fù)合體的發(fā)現(xiàn)
        3.1.5 NDH-1L和NDH-1MS參與NDH-PSI超復(fù)合體的形成
        3.1.6 超復(fù)合體中NDH-1, Fg1和PSI的化學(xué)計(jì)量
    3.2 NDH-PSI超分子復(fù)合體的功能分析
第4章 討論
    4.1 藍(lán)藻和高等植物用不同的連接蛋白形成NDH-PSI超復(fù)合體
    4.2 Fg2和Fg3不參與超分子復(fù)合體的形成
    4.3 藍(lán)藻NDH-PSI超復(fù)合體的結(jié)構(gòu)模型
    4.4 超復(fù)合體的形成與NDH-1 穩(wěn)定性無(wú)關(guān)，但與活性相關(guān)
第5章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄：攻讀博士學(xué)位期間發(fā)表和在投文章



本文編號(hào)：2931072