發(fā)布時(shí)間：2016-11-25 12:16

  本文關(guān)鍵詞：天麻素與寧動(dòng)顆粒對(duì)Tourette綜合征大鼠紋狀體多巴胺雙向調(diào)節(jié)作用的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《山東大學(xué)》 2015年

天麻素與寧動(dòng)顆粒對(duì)Tourette綜合征大鼠紋狀體多巴胺雙向調(diào)節(jié)作用的研究

張峰  

【摘要】：目的探討天麻素(Gastrodin, Gas)對(duì)Tourette綜合征(Tourette's syndrome, TS)模型大鼠紋狀體細(xì)胞外液多巴胺(Dopamine, DA)濃度的調(diào)節(jié)作用,并通過(guò)對(duì)紋狀體細(xì)胞外液高香草酸(Homovanillic Acid, HVA)濃度以及紋狀體多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)體(Dopamine Transporter, DAT)的檢測(cè),進(jìn)一步明確天麻素對(duì)DA調(diào)節(jié)作用的分子作用機(jī)制。方法70只雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為3組,分別予以腹腔注射：空白對(duì)照組(10只),腹腔注射生理鹽水5 ml/kg/d;阿樸嗎啡(Apomorphine, Apo)誘導(dǎo)模型組(30只),腹腔注射Apo 2 mg/kg/d;亞氨基二丙腈(3,3'-Iminodipropionitrile,IDPN)誘導(dǎo)模型組(30只),腹腔注射IDPN 150mg/kg/d。每日上午9：00進(jìn)行造模干預(yù),連續(xù)注射7天。后Apo造模繼續(xù),將Apo誘導(dǎo)模型組進(jìn)一步劃分3組,分別進(jìn)行藥物治療：Apo模型組(10只),生理鹽水10ml/kg/d灌胃；Apo+Gas組(10只),天麻素20mg/kg/d灌胃；Apo+Hal組(10只),氟哌啶醇(Haloperidol, Hal) 1.0 mg/kg/d灌胃。IDPN誘導(dǎo)模型組進(jìn)一步劃分3組,分別給予藥物干預(yù)：IDPN模型組(10只),生理鹽水10ml/kg/d灌胃；IDPN+ Gas組(10只),天麻素20 mg/kg/d灌胃；IDPN+Hal組(10只),Hal 1.0 mg/kg/d灌胃�？瞻讓�(duì)照組(10只)予生理鹽水10 ml/kg/d灌胃。每日上午9：00 Apo造模干預(yù)(共持續(xù)3周),下午2：00藥物灌胃治療(共持續(xù)8周)。Apo及IDPN造模開(kāi)始后,每隔7天對(duì)大鼠的刻板行為進(jìn)行一次行為學(xué)評(píng)價(jià)。灌胃治療結(jié)束后,處死各組大鼠,快速分離出紋狀體,后分別應(yīng)用微透析技術(shù)(Microdialysis)及高效液相色譜技術(shù)(High-performance liquid chromatography, HPLC)測(cè)定各組大鼠紋狀體細(xì)胞外液的DA濃度,蛋白質(zhì)免疫印跡技術(shù)(Western-blot)測(cè)定大鼠紋狀體DAT的蛋白表達(dá)。結(jié)果1.大鼠刻板運(yùn)動(dòng)的行為學(xué)評(píng)價(jià)重復(fù)測(cè)量性方差分析顯示,Apo及IDPN誘導(dǎo)的TS模型大鼠均表現(xiàn)出明顯的組間效應(yīng)(Apo誘導(dǎo)模型組：F2,27=28.91,p0.01；IDPN誘導(dǎo)模型組：F2,27=50.81,p0.01)。與空白對(duì)照組相比,腹腔注射Apo和IDPN均可誘導(dǎo)大鼠產(chǎn)生明顯的刻板行為(Apo誘導(dǎo)模型組：p0.01；IDPN誘導(dǎo)模型組：p0.01)。給予藥物治療后,與Apo模型組及IDPN模型組對(duì)比,統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示,天麻素和Hal均可明顯減輕兩種造模藥誘發(fā)的刻板運(yùn)動(dòng)(Apo+Gas組 vs Apo+saline組,p0.01,IDPN+Gas組 vs IDPN+saline組,p0.01：Apo+Hal組 vs Apo+saline組,p0.01,IDPN+Hal組 vs IDPN+saline組,p0.01)。2.天麻素對(duì)大鼠紋狀體細(xì)胞外液DA濃度的影響方差分析顯示,Apo誘導(dǎo)模型組與IDPN誘導(dǎo)模型組均有明顯的組間效應(yīng)(Apo誘導(dǎo)模型組：F3,36=5.68,p0.01；IDPN誘導(dǎo)模型組：F3,36=51.84,p0.01)。統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明,Apo與IDPN對(duì)大鼠紋狀體細(xì)胞外液DA濃度的作用截然相反：Apo可明顯升高大鼠紋狀體細(xì)胞外液的DA濃度：而IDPN則使紋狀體細(xì)胞外液DA濃度明顯降低。分別給予藥物治療后,結(jié)果顯示,天麻素可顯著降低Apo誘導(dǎo)升高的大鼠紋狀體細(xì)胞外液的DA濃度,同時(shí)顯著升高IDPN誘導(dǎo)降低的紋狀體細(xì)胞外液DA濃度。換言之,對(duì)異常升高或降低的紋狀體細(xì)胞外液DA濃度,天麻素均具有對(duì)其進(jìn)行調(diào)節(jié)、使之趨向于正常的作用。與天麻素的良性調(diào)節(jié)作用不同,Hal對(duì)于Apo以及IDPN誘導(dǎo)產(chǎn)生的異常的紋狀體細(xì)胞外液DA濃度,均未表現(xiàn)出明顯的干預(yù)作用。3.天麻素對(duì)大鼠紋狀體細(xì)胞外液HVA濃度的影響兩種造模干預(yù)藥物,Apo及IDPN均未對(duì)大鼠紋狀體細(xì)胞外液HVA濃度產(chǎn)生明顯影響(Apo誘導(dǎo)模型組：p0.05；IDPN誘導(dǎo)模型組：p0.05)。分別給予藥物治療后,統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示,天麻素與Hal亦未對(duì)兩種TS模型大鼠紋狀體細(xì)胞外液HVA濃度產(chǎn)生明顯的調(diào)節(jié)作用。4.天麻素大鼠紋狀體DAT表達(dá)的影響方差分析顯示,Apo誘導(dǎo)模型組與IDPN誘導(dǎo)模型組均有明顯的組間效應(yīng)(Apo誘導(dǎo)模型組：F3,36=10.92,p0.01；IDPN誘導(dǎo)模型組：F3,36=21.15,p0.01)。Apo與IDPN均可使大鼠紋狀體DAT表達(dá)量明顯增高(Apo誘導(dǎo)模型組：p0.01；IDPN誘導(dǎo)模型組：p0.01)。給予藥物治療后,統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示,天麻素可顯著降低Apo誘導(dǎo)模型組紋狀體DAT表達(dá)量,同時(shí)顯著升高IDPN誘導(dǎo)模型組紋狀體DAT的蛋白表達(dá)。與天麻素對(duì)DAT表達(dá)量的雙向調(diào)節(jié)作用不同,Hal對(duì)于Apo以及IDPN誘導(dǎo)產(chǎn)生的異常升高和降低的紋狀體DAT蛋白表達(dá)量,均未表現(xiàn)出明顯的干預(yù)調(diào)節(jié)作用。結(jié)論1.天麻素具有與Hal相似的抑制TS模型大鼠刻板運(yùn)動(dòng)的作用。2.天麻素對(duì)TS模型大鼠紋狀體細(xì)胞外液DA濃度具有雙向良性調(diào)節(jié)作用。3.天麻素對(duì)TS模型大鼠紋狀體細(xì)胞外液DA濃度的雙向良性調(diào)節(jié)作用的實(shí)現(xiàn)可能與其對(duì)DAT蛋白表達(dá)量的雙向調(diào)節(jié)作用有關(guān)。目的探討寧動(dòng)顆粒(Ningdong Granule, NDG)對(duì)Tourette綜合征(TS)模型大鼠紋狀體多巴胺(DA)濃度雙向調(diào)節(jié)作用,以進(jìn)一步明確寧動(dòng)顆粒治療Tourette綜合征的藥理作用機(jī)制。方法70只雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為3組,分別進(jìn)行腹腔注射：空白對(duì)照組(10只)：腹腔注射生理鹽水5 ml/kg/d；Apo誘導(dǎo)模型組(30只)：腹腔注射阿樸嗎啡(Apo)2mg/kg/d; IDPN誘導(dǎo)模型組(30只)：腹腔注射亞氨基二丙腈(IDPN) 150mg/kg/d。每日上午9：00予以干預(yù),連續(xù)注射7天。Apo造模繼續(xù),將Apo誘導(dǎo)模型組進(jìn)一步劃分3組,進(jìn)行藥物干預(yù)：Apo模型組(10只)：生理鹽水10ml/kg/d灌胃；Apo+ NDG組(10只)：寧動(dòng)顆粒370 mg/kg/d灌胃；Apo+Hal組(10只)：氟哌啶醇(Hal) 1.0mg/kg/d灌胃。IDPN誘導(dǎo)模型組進(jìn)一步劃分3組,進(jìn)行藥物干預(yù)：IDPN模型組(10只)：生理鹽水10ml/kg/d灌胃；IDPN+ NDG組(10只)：寧動(dòng)顆粒370mg/kg/d灌胃；IDPN+Hal組(10只)：氟哌啶醇1.0mg/kg/d灌胃�？瞻讓�(duì)照組(10只)予生理鹽水10 ml/kg/d灌胃。每日上午9：00Apo造模干預(yù)(共持續(xù)3周),下午2：00進(jìn)行藥物灌胃治療,灌胃治療共持續(xù)8周。造模干預(yù)開(kāi)始后,每隔7天對(duì)大鼠的刻板行為進(jìn)行一次行為學(xué)評(píng)價(jià)。藥物干預(yù)結(jié)束后,處死各組大鼠,取出紋狀體,分別用高效液相色譜法(HPLC)測(cè)量大鼠紋狀體多巴胺濃度,蛋白質(zhì)免疫印跡(Western-blot)測(cè)定大鼠紋狀體多巴胺D2受體蛋白表達(dá)。結(jié)果1.大鼠刻板運(yùn)動(dòng)的行為學(xué)評(píng)價(jià)重復(fù)測(cè)量性方差分析顯示,Apo及IDPN誘導(dǎo)的TS大鼠均表現(xiàn)出明顯的組間效應(yīng)(Apo誘導(dǎo)模型組：F2,27=22.73,p0.01；IDPN誘導(dǎo)模型組：F2,27=42.25,p0.01)。造模干預(yù)后,與空白對(duì)照組對(duì)比,Apo和IDPN均可誘導(dǎo)大鼠產(chǎn)生明顯的刻板行為(Apo誘導(dǎo)模型組：p0.01；IDPN誘導(dǎo)模型組：p0.01)。分別給予干預(yù)治療后,與Apo模型組及IDPN模型組對(duì)比,統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示,寧動(dòng)顆粒和Hal均可明顯減輕兩種造模藥誘發(fā)的刻板運(yùn)動(dòng)(Apo+ NDG組vs Apo+ saline組,p0.01,IDPN+ NDG組vs IDPN+ saline組,pP0.01；Apo+ Hal組vs Apo +saline組,p0.01,IDPN+ Hal組vs IDPN+ saline組,p0.01)。2.寧動(dòng)顆粒對(duì)大鼠紋狀體DA濃度的影響方差分析顯示,Apo誘導(dǎo)模型組與IDPN誘導(dǎo)模型組均有明顯的組間效應(yīng)(Apo誘導(dǎo)模型組：F3,36=30.79,p0.01；IDPN誘導(dǎo)模型組：F3,36.16.07,p0.01)。統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明,Apo與IDPN對(duì)TS大鼠紋狀體DA濃度的作用截然相反：Apo可明顯升高大鼠紋狀體的DA濃度；而IDPN則使紋狀體DA濃度明顯降低。分別給予治療干預(yù)后,結(jié)果表明,寧動(dòng)顆�？娠@著降低Apo誘導(dǎo)升高的紋狀體的DA濃度,同時(shí)顯著升高IDPN誘導(dǎo)降低的紋狀體DA濃度。一言概之,無(wú)論對(duì)異常升高或降低的DA濃度,寧動(dòng)顆粒均具有對(duì)其進(jìn)行調(diào)節(jié),使之恢復(fù)正常的作用。與寧動(dòng)顆粒對(duì)DA濃度的良性調(diào)節(jié)作用不同,Hal對(duì)于Apo以及IDPN誘導(dǎo)產(chǎn)生的異常的紋狀體DA,均未表現(xiàn)出明顯的干預(yù)調(diào)節(jié)作用。3.寧動(dòng)顆粒對(duì)大鼠紋狀體DRD2表達(dá)的影響方差分析顯示,Apo誘導(dǎo)模型組與IDPN誘導(dǎo)模型組均有明顯的組間效應(yīng)(Apo誘導(dǎo)模型組：F3,36.24.69,p0.01；IDPN誘導(dǎo)模型組：F3,36.29.73,p0.01)。統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明,Apo與IDPN均可使TS模型大鼠紋狀體DRD2表達(dá)明顯升高(Apo誘導(dǎo)模型組：p0.01；IDPN誘導(dǎo)模型組：p0.01)。分別給予干預(yù)治療后,與Apo模型組及IDPN模型組對(duì)比,統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示,寧動(dòng)顆粒和Hal均可降低兩種造模藥誘發(fā)產(chǎn)生的紋狀體DRD2表達(dá)增高(Apo+ NDG組vsApo+ saline組,p0.01,IDPN+ NDG組vs IDPN+ saline組,p0.01；Apo+Hal組vs Apo+ saline組(?)p0.01；IDPN+ Hal組vs IDPN+ saline組,p0.01)。結(jié)論1.寧動(dòng)顆粒具有與Hal相似的、抑制TS模型大鼠刻板運(yùn)動(dòng)的作用。2.寧動(dòng)顆粒對(duì)TS模型大鼠紋狀體DA具有雙向良性調(diào)節(jié)作用。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R285.5
【目錄】：

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【參考文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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10 袁鑫;二甲雙胍對(duì)鏈脲佐菌素所致大鼠認(rèn)知功能障礙的作用研究[D];湖北科技學(xué)院;2015年

  本文關(guān)鍵詞：天麻素與寧動(dòng)顆粒對(duì)Tourette綜合征大鼠紋狀體多巴胺雙向調(diào)節(jié)作用的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：191952