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杜鵑素直接抑制GSK-3β發(fā)揮對氧化應(yīng)激損傷血管內(nèi)皮細胞的保護作用及其機制研究

發(fā)布時間:2024-10-24 19:42
  目的:杜鵑素是來源于中藥興安杜鵑(Rhododendron dauricum L.)葉中的一種二氫黃酮類生物活性成分,有祛痰止咳的功效,此外其還具有抗氧化、抗炎、抗菌、抗腫瘤和抑制血管平滑肌細胞增殖等生物活性。本課題組前期研究顯示杜鵑素對氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細胞凋亡以及緊密連接損傷具有保護作用。然而,與杜鵑素所介導(dǎo)內(nèi)皮細胞保護作用相關(guān)的作用機制和作用靶標(biāo)仍有待進一步闡明。Nrf2(Nuclear factor erythroid 2-related factor 2)-ARE(Antioxidant response element)通路是細胞氧化應(yīng)激反應(yīng)中的關(guān)鍵通路,介導(dǎo)眾多抗氧化酶和II相解毒酶的表達。近期研究表明,GSK-3β(Glycogen synthase kinase 3β)是獨立于Keap1(Kelch-like epichlorohydrin-associated protein 1)的Nrf2負調(diào)控因子。本論文第一部分首先探索并鑒定杜鵑素與EA.hy926血管內(nèi)皮細胞的特異性親和蛋白,并進一步研究其與親和蛋白(GSK-3β)的相互作用及對激酶活性的抑制作用;第二部分...

【文章頁數(shù)】:114 頁

【學(xué)位級別】:博士

【部分圖文】:

杜鵑素直接抑制GSK-3β發(fā)揮對氧化應(yīng)激損傷血管內(nèi)皮細胞的保護作用及其機制研究



為了尋找杜鵑素在血管內(nèi)皮細胞中的特異性親和蛋白,本部分實驗采用DARTS和LC-MS/MS聯(lián)用的技術(shù)手段進行探索。DARTS實驗所獲得的蛋白樣品經(jīng)SDS-PAGE分離和考馬斯亮藍染色后進行分析。對比考馬斯亮藍染色凝膠中空白溶劑對照組和杜鵑素(640μmol/L)處理組的條帶發(fā)現(xiàn),....


杜鵑素直接抑制GSK-3β發(fā)揮對氧化應(yīng)激損傷血管內(nèi)皮細胞的保護作用及其機制研究



差異條帶經(jīng)LC-MS/MS鑒定,蛋白條帶1(上方條帶)共檢測出譜圖7221張,通過搜索引擎鑒定后,匹配到3742張譜圖,共鑒定出440個候選蛋白,2715個肽段。蛋白條帶2(下方條帶)共檢測出譜圖8208張,通過搜索引擎鑒定后,匹配到359張譜圖,共鑒定出15個候選蛋白,92個肽....


杜鵑素直接抑制GSK-3β發(fā)揮對氧化應(yīng)激損傷血管內(nèi)皮細胞的保護作用及其機制研究



圖1-2唯一譜圖分布(左側(cè)圖為蛋白條帶1,右側(cè)圖為蛋白條帶2)圖1-4蛋白質(zhì)量分布圖(左側(cè)圖為蛋白條帶1,右側(cè)圖為蛋白條帶2)


杜鵑素直接抑制GSK-3β發(fā)揮對氧化應(yīng)激損傷血管內(nèi)皮細胞的保護作用及其機制研究



圖1-3唯一肽段分布圖(左側(cè)圖為蛋白條帶1,右側(cè)圖為蛋白條帶2)圖1-5蛋白覆蓋度分布圖(左側(cè)圖為蛋白條帶1,右側(cè)圖為蛋白條帶2)



本文編號:4008157

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