發(fā)布時間：2020-12-07 23:59

　　六價鉻Cr（VI）是金屬鉻多種價態(tài)之一。研究表明,六價鉻在所有價態(tài)中毒性最強,具有皮膚黏膜腐蝕性和致癌性,能夠引起機體的肝損傷和細胞損傷。ATF-6是內質網上的三大感受蛋白之一,作為ER應激的近端傳感器能夠引起細胞內質網未折疊蛋白反應的發(fā)生。同時ATF-6也是內質網應激誘導細胞凋亡途徑中的一個重要的調節(jié)因子,能夠激活多種內質網應激和凋亡相關蛋白的轉錄與表達。細胞凋亡通常被稱為I型程序性死亡,是一種細胞在生理或病理條件下程序性的主動死亡模式。內質網是細胞穩(wěn)態(tài)的重要因素,線粒體是細胞凋亡調節(jié)的重要中樞,兩者在細胞凋亡過程中都有著十分重要的作用。本研究旨在探討ATF6對Cr（VI）誘導的DF-1細胞凋亡的調控作用,并通過siRNA干擾ATF6表達從而抑制細胞凋亡,為Cr（VI）中毒病的解毒劑篩選提供理論依據。將DF-1細胞暴露于不同濃度的Cr（VI）中建立細胞毒性和細胞凋亡模型。通過CCK-8試劑盒測定DF-1的細胞活力,結果顯示Cr（VI）處理DF-1細胞可以誘導DF-1細胞以時間和劑量依賴性方式發(fā)生細胞損傷,使用150μM的Cr（VI）處理細胞8小時的抑制率為49.3%。通過Hoechs... 

【文章來源】：山東農業(yè)大學山東省

【文章頁數】：58 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

六價鉻誘導的DF-1細胞損傷Figure1.Cr(VI)-inducedinsulttoDF-1cells.

ATF-6調控Cr(VI)誘導DF1細胞凋亡的機理研究18圖2.不同處理條件的六價鉻對DF-1細胞活力影響Figure2EffectofCr(VI)ontheactivityofDF-1cellsunderdifferenttreatmentconditions注：與對照組相比較。不同字母間P<0.05，表示差異顯著。Comparedwiththecontrolgroup.Betweendifferentletters，P<0.05indicatessignificantdifference.3.2Cr(VI)對DF-1細胞形態(tài)與核形態(tài)的影響為了研究Cr(VI)對DF-1細胞凋亡形態(tài)的影響，使用不同濃度Cr(VI)處理DF-1細胞8小時，15μMCCCP處理細胞8小時作為陽性對照組。細胞處理后使用光學顯微鏡觀察細胞形態(tài)，使用Hoechst33342試劑進行細胞核染色，置于激光共聚焦顯微鏡下觀察細胞核形態(tài)變化。圖3A中可見，在分別使用100μMCr(VI)和200μMCr(VI)單獨處理細胞8小時后，觀察到細胞形態(tài)發(fā)生顯著變化，包括細胞皺縮，懸浮以及數量減少等。并且這種變化在200μMCr(VI)處理時更加明顯，并且與陽性對照組(15μMCCCP)處理后變化相同。在圖3B中，用Cr(VI)處理后細胞核形態(tài)發(fā)生明顯的改變，表現為核濃縮，核內陷以及核碎片的出現。同樣的，相較于100μMCr(VI)處理組，200μMCr(VI)處理組核變形現象增多更為明顯。對核形變細胞進行定量分析，結果如圖4所示，與對照組相比100μMCr(VI)處理組核損傷細胞顯著增多(P<0.01)。與100μMCr(VI)處理組相比，200μMCr(VI)處理組中核損傷細胞數量顯著增多(P<0.01)。以上結果表明，Cr(VI)能夠誘導細胞形態(tài)發(fā)生改變并造成細胞核損傷，并且呈濃度依賴性。

山東農業(yè)大學碩士專業(yè)學位論文19圖3.六價鉻誘導DF-1細胞形態(tài)變化(200×)Figure3.Cr(VI)inducesmorphologicalchangesinDF-1cells(200×)

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本文編號：2904104