發(fā)布時(shí)間：2018-06-16 15:38

  本文選題：脂肪源間充質(zhì)干細(xì)胞 + 低氧　； 參考：《中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)》2007年碩士論文

【摘要】： 間充質(zhì)干細(xì)胞具有強(qiáng)大的自我更新和多系分化潛能，體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)表明其可以向神經(jīng)細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、上皮細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、成骨細(xì)胞及成軟骨細(xì)胞分化，因而在組織修復(fù)上有著誘人的前景。另一方面，間充質(zhì)干細(xì)胞有獨(dú)特的免疫抑制功能，能夠抑制T細(xì)胞的增殖、樹突狀細(xì)胞的成熟，在抑制排斥反應(yīng)和治療自身免疫性疾病方面是一可行的臨床選擇。因此如何優(yōu)化干細(xì)胞的體外培養(yǎng)條件，以更好的模擬干細(xì)胞的體內(nèi)狀態(tài)，以及在體外培養(yǎng)擴(kuò)增出更適合移植的種子細(xì)胞，又是一個(gè)十分重要的課題。目前對(duì)于干細(xì)胞生理特性的體外研究主要是在20％O_2的培養(yǎng)條件下進(jìn)行，并不符合體內(nèi)的微環(huán)境。本文初步探討了在2％O_2的培養(yǎng)條件下，脂肪源間充質(zhì)干細(xì)胞不同方面的生理特性是否有所改變，一共包括三部分的內(nèi)容。 第一部分研究了低氧對(duì)脂肪源間充質(zhì)干細(xì)胞基本表型、干細(xì)胞的標(biāo)志性基因以及遷移能力影響。結(jié)果提示2％O_2的培養(yǎng)條件下，，其基本表型沒有改變，干細(xì)胞的標(biāo)志性基因OCT-4和nanog可以保持表達(dá)；2％O_2的低氧條件使脂肪源間充質(zhì)干細(xì)胞表面CXCR4表達(dá)明顯增加，遷移試驗(yàn)證實(shí)這些細(xì)胞向SDF因子的遷移能力提高。 第二部分研究了脂肪來源的間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)T細(xì)胞的免疫抑制功能以及低氧對(duì)間充質(zhì)干細(xì)胞免疫特性的影響，體外實(shí)驗(yàn)觀察了2％O_2的培養(yǎng)條件下，脂肪來源的間充質(zhì)干細(xì)胞表面免疫相關(guān)分子的表達(dá)。結(jié)果提示脂肪源間充質(zhì)干細(xì)胞與T細(xì)胞的比率為1∶1時(shí)可顯著抑制T細(xì)胞的增殖，而AMSCs和T細(xì)胞的比率為1∶10和1∶100時(shí)沒有明顯抑制效果；低氧培養(yǎng)的脂肪源間充質(zhì)干細(xì)胞HLA-DR分子及其反式激活因子表達(dá)上調(diào)。 第三部分研究了脂肪源間充質(zhì)干細(xì)胞的成骨和成脂分化潛能，以及移植到經(jīng)全身照射過的小鼠體內(nèi)后，用PET檢測(cè)AMSCs的分布情況。結(jié)果提示脂肪來源的間充質(zhì)干細(xì)胞可向成骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞分化。AMSCs移植后在肺部潴留較多，另外主要分布于胃腸道，肝臟等組織。
[Abstract]:Mesenchymal stem cells have the potential of self-renewal and multi-lineage differentiation. In vitro and in vivo, mesenchymal stem cells can differentiate into neural cells, vascular endothelial cells, epithelial cells, adipocytes, osteoblasts and chondroblasts. As a result, there are attractive prospects for tissue repair. On the other hand, mesenchymal stem cells have a unique immunosuppressive function, which can inhibit the proliferation of T cells and the maturation of dendritic cells. It is a feasible clinical choice in inhibiting rejection and treating autoimmune diseases. Therefore, how to optimize the culture conditions of stem cells in vitro, to better simulate the status of stem cells in vivo, and in vitro culture to expand more suitable for transplantation of seed cells, is also a very important issue. At present, the physiological characteristics of stem cells are mainly studied under the culture condition of 20g / O _ 2, which does not conform to the microenvironment in vivo. In this paper, we discussed whether the physiological characteristics of adipose derived mesenchymal stem cells have changed in different aspects under the condition of 2ostack 2, which consists of three parts. In the first part, we studied the effects of hypoxia on the basic phenotype of adipose derived mesenchymal stem cells, the signature genes and migration ability of stem cells. The results showed that the basic phenotype of the stem cells remained unchanged under the culture condition of 2O 2, and the expression of CXCR4 on the surface of adipose derived mesenchymal stem cells was significantly increased by the hypoxia condition of OCT-4 and nanog, and the expression of CXCR4 on the surface of adipose derived mesenchymal stem cells was significantly increased. Migration assay confirmed that the migration ability of these cells to SDF factors was increased. In the second part, the immunosuppressive effect of adipose derived mesenchymal stem cells on T cells and the effects of hypoxia on the immune properties of mesenchymal stem cells were studied. Expression of immune-associated molecules on the surface of adipose derived mesenchymal stem cells. The results suggested that the ratio of adipose derived mesenchymal stem cells to T cells was 1:1, but the ratio of AMSCs to T cells was 1:10 and 1: 100. The expression of HLA-DR and its transactivator was up-regulated in adipose derived mesenchymal stem cells cultured in hypoxia. In the third part, the osteogenic and adipogenic potential of adipose derived mesenchymal stem cells (MSCs) was studied, and the distribution of AMSCs was detected by PET after transplantation to mice irradiated with whole body. The results suggested that adipose-derived mesenchymal stem cells could be transferred to osteoblasts. After transplantation of adipocyte differentiation. AMSCs were mainly distributed in gastrointestinal and liver tissues.
【學(xué)位授予單位】：中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類號(hào)】：R329

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本文編號(hào)：2027197