發(fā)布時間：2020-11-21 05:08

　　 本論文通過四個試驗研究了L-蛋氨酸和DL-蛋氨酸及添加水平對北京鴨生長性能、屠宰性能、血漿生化和血常規(guī)指標的影響,從而估測L-Met相對于DL-Met的生物學效價,并確定肉鴨蛋氨酸需要量和最大安全限量,并利用RNA-Seq技術(shù)研究了過量蛋氨酸對肉鴨肝臟轉(zhuǎn)錄組的影響,以期為肉鴨生產(chǎn)中晶體蛋氨酸的合理使用和蛋氨酸對肉鴨毒性作用的分子機制研究提供理論依據(jù)。試驗一采用玉米-花生粕型飼糧比較了生長前期北京鴨飼糧中L-Met和DL-Met的相對生物學效價。本試驗采用2×7+1雙因子完全隨機試驗設(shè)計,試驗設(shè)1個基礎(chǔ)飼糧對照組(蛋氨酸0.29%,代謝能12.56MJ/Kg,粗蛋白22.15%),7個L-Met或DL-Met添加組(0.03%,0.06%,0.10%,0.14%,0.19%,0.24%和0.29%),共15個處理組。選取720只1日齡健康雄性北京鴨隨機分為15個處理,每個處理8個重復,每個重復6只鴨。試驗期21d。結(jié)果表明:與基礎(chǔ)飼糧組相比,飼糧添加適量L-Met和DL-Met均能顯著提高北京鴨平均體重(ABG)、日增重(ADG)、日采食量(ADFI)和腿肌率(P0.05)。L-Met組,隨飼糧蛋氨酸水平升高,肉鴨ABG和ADG呈現(xiàn)先升高后降低的規(guī)律,而DL-Met組肉鴨ABG和ADG則先升高而后趨于穩(wěn)定。采用二次曲線模型,以ADG為評價指標,以L-Met和DL-Met為蛋氨酸源時,獲得的1~21日齡北京鴨飼糧蛋氨酸需要量分別為0.46%和0.54%,T檢驗表明以L-Met為蛋氨酸源時肉鴨對蛋氨酸的需要量顯著低于以DL-Met為蛋氨酸源。根據(jù)飼糧蛋氨酸總水平為0.29%,0.32%,0.35%,0.39%,0.43%和0.48%處理組,以ADG為評價指標,利用線性斜率比法,估測L-Met相對于DL-Met的生物學效價為134%。試驗二采用玉米-花生粕型飼糧比較了生長后期北京鴨飼糧中L-Met與DL-Met的相對生物學效價。本試驗采用2×7+1雙因子完全隨機試驗設(shè)計,試驗設(shè)1個基礎(chǔ)飼糧對照組(蛋氨酸0.22%,代謝能12.75MJ/Kg,粗蛋白18.18%),7個L-Met或DL-Met添加組(0.03%,0.06%,0.09%,0.13%,0.17%,0.22%和0.27%),共15個處理組。選取720只15日齡健康北京鴨隨機分為15個處理,每個處理6個重復,每個重復8只鴨。試驗期21d。結(jié)果表明:與基礎(chǔ)飼糧組相比,飼糧添加適量L-Met和DL-Met均能顯著提高北京鴨生長性能和第四主翼羽長度(P0.05),有顯著提高胸肌率的趨勢(0.05P0.10)。采用二次曲線模型,以ADG為評價指標,以L-Met和DL-Met為蛋氨酸源時,獲得的15~35日齡北京鴨飼糧蛋氨酸需要量分別為0.41%和0.37%,但T檢驗表明二者差異不顯著。根據(jù)飼糧蛋氨酸總水平為0.22%,0.25%,0.28%,0.31%,0.35%和0.39%處理組,以ADG為評價指標,利用線性斜率比法,估測L-Met相對于DL-Met的生物學效價為125%。試驗三采用玉米-豆粕型飼糧比較了生長前期北京鴨飼糧中過量的L-Met和DL-Met的相對生物學效價。本試驗采用2×5+1雙因子完全隨機試驗設(shè)計,試驗設(shè)1個基礎(chǔ)飼糧對照組(蛋氨酸0.47%,代謝能12.03MJ/Kg,粗蛋白18.99%),5個L-Met或DL-Met添加組(0.25%,0.50%,0.75%,1.00%和1.25%),共11個處理組。選取492只8日齡健康北京鴨隨機分為11個處理,每個處理7個重復,每個重復6只鴨。試驗期21d。結(jié)果表明:與基礎(chǔ)飼糧對照組相比,飼糧蛋氨酸過量時會降低北京鴨ABG、ADG、ADFI、料重比、胸肌率和腹脂率(P0.05);顯著升高鴨血漿中高半胱氨酸、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、總膽紅素、乳酸脫氫酶、平均紅細胞體積和紅細胞體積分布寬度(P0.05),而顯著降低血紅蛋白、平均血紅蛋白含量和平均紅細胞血紅蛋白濃度(P0.05),并有降低紅細胞計數(shù)的趨勢(0.05P0.10)。采用折線模型,以日增重為評價指標,以L-Met和DL-Met為蛋氨酸源時,獲得的飼糧蛋氨酸最大安全限量分別為0.86%和0.89%,T檢驗表明二者無顯著差異。以日增重和日采食量的抑制程度為評價指標,采用線性模型斜率比法,估測L-Met相對于DL-Met的生物學效價分別是100%和102%。試驗四利用轉(zhuǎn)錄組學技術(shù)探究過量蛋氨酸對北京鴨產(chǎn)生毒性作用的分子機制。本試驗是在試驗三的基礎(chǔ)上從基礎(chǔ)飼糧組(0.47%)和蛋氨酸過量組(1.72%)中分別選取試驗鴨各3只,提取肝臟總RNA進行轉(zhuǎn)錄組測序分析。結(jié)果表明,根據(jù)|log_2Fold Change|≥0.58且P-value≤0.05,共篩選出1082個差異表達基因,表達上調(diào)基因467個,表達下調(diào)基因615個,這些基因主要與脂質(zhì)代謝、能量代謝和線粒體凋亡有關(guān);GO功能富集分析顯示,差異表達基因主要富集在脂質(zhì)代謝、免疫反應和線粒體凋亡等生物學過程;KEGG Pathway分析顯示,差異表達基因主要富集在代謝通路、鈣離子信號通路、炎癥因子與其受體相互作用和PPAR信號通路等代謝通路。綜上,飼糧中適量水平的L-Met和DL-Met均能提高生長前期和生長后期北京鴨的生長性能和胴體品質(zhì),而過量的L-Met和DL-Met均會抑制動物生長,導致動物肝臟損傷并出現(xiàn)貧血。本試驗條件下,當飼糧中總蛋氨酸水平對北京鴨生長有促進作用時,L-Met的生物學利用率高于DL-Met;飼糧中總蛋氨酸水平對北京鴨生長產(chǎn)生抑制作用時,L-Met和DL-Met的生物學利用率相當。本試驗條件下,飼糧過量蛋氨酸會引起肝臟中脂質(zhì)代謝相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄水平發(fā)生顯著變化,脂質(zhì)代謝相關(guān)的信號通路被激活。
【學位單位】：中國農(nóng)業(yè)科學院
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2018
【中圖分類】：S834.81
【部分圖文】：

顯著Pathway統(tǒng)計

顯著GO條目統(tǒng)計
【參考文獻】

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本文編號：2892572