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視黃酸受體及長非編碼RNA在男性不育中的功能研究

發(fā)布時間:2021-01-24 13:54
  目的非梗阻性無精子癥(non-obstructive azoospermia,NOA)是男性不育癥中常見的疾病類型,其特征為精子發(fā)生過程存在異常,但具體的分子機(jī)制尚不明確。作為維生素A的活性代謝產(chǎn)物之一的視黃酸(retinoic acid,RA)是調(diào)節(jié)精子發(fā)生過程中不可或缺的因子。RA依靠其受體進(jìn)行下游活動調(diào)節(jié),這些受體可能成為NOA治療的潛在靶點。然而,由于缺乏精子發(fā)生正常以及生精異常患者中視黃酸受體定位及表達(dá)的研究,很難制定出針對這一靶點有效的治療策略。在本研究中,我們研究了精子發(fā)生正常以及NOA患者睪丸組織中視黃酸受體(RARA、RARB、RARG、RXRA、RXRB和RXRG)的定位和表達(dá)情況,為探索男性不育治療的新靶點奠定了基礎(chǔ)。另外,精子發(fā)生是一個復(fù)雜調(diào)控的生物學(xué)進(jìn)程,是有性生殖過程中是極為重要的一環(huán)。在許多精子發(fā)生相關(guān)研究中,蛋白編碼基因、m RNA以及小非編碼RNA的作用都得到了很好的印證。然而,在精子發(fā)生這一生物學(xué)進(jìn)程中仍存在許多未解之謎。長非編碼RNA(long-noncoding RNA,lnc RNA)作為新加入非編碼RNA家族的新成員,關(guān)于其在精子發(fā)生中的研究... 

【文章來源】:青島大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】:60 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

視黃酸受體及長非編碼RNA在男性不育中的功能研究


OA及NOA患者睪丸組織蘇木素-伊紅染色Fig1.1H&EstainingoftesticulartissuesfromOAandNOApatients

肌樣細(xì)胞,患者,支持細(xì)胞,精子細(xì)胞


12圖 1.2 視黃酸受體在 OA 及 NOA 患者睪丸組織的定位Fig. 1.2: The localization of retinoid receptors in the testes of OAand NOA man注: SPG:精原細(xì)胞,SPC:精母細(xì)胞,RS:圓形精子細(xì)胞,SC:支持細(xì)胞,PTM:管周肌樣細(xì)胞。放大倍數(shù)為 400 倍。3 視黃酸受體在 SCOS 和 MA 患者中表達(dá)下調(diào)另外,我們又從定量和半定量的角度檢測了視黃酸受體在 NOA 患者睪丸中的表達(dá)水平。我們選取 SCOS、MA、HYPO 患者的睪丸組織進(jìn)行 RT-qPCR 實驗(圖 1.3)。對比正常睪丸組織,實驗結(jié)果表明:在 SCOS 患者的睪丸中 RARA、RARG、RXRA、RXRB、和 RXRG 的 mRNA 表達(dá)水平均明顯降低,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。在 MA患者睪丸組織中,RARA、RARG、RXRA、RXRB 和 RXRG 的 mRNA 水平也出現(xiàn)了下調(diào),差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。不過,HYPO 患者睪丸組織中的 RARs 和 RXRs 相

黃酸,表達(dá)水平,患者,統(tǒng)計學(xué)意義


圖 1.3 OA 及 NOA 患者睪丸組織中視黃酸受體 mRNA 表達(dá)水平比較Fig.1.3 The mRNA expression levels of retinoid receptors in the different testes of OA and NOApatients注:*表示 P < 0.05, ***表示 P < 0.001。除了通過轉(zhuǎn)錄水平對視黃酸受體表達(dá)進(jìn)行研究外,我們還從翻譯水平對 NOA患者睪丸組織的視黃酸受體表達(dá)水平進(jìn)行了半定量的研究(圖 1.4)。我們選擇H-score 對免疫組化實驗數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,結(jié)果顯示 RARA、 RARG、RXRB 和 RXRG在 SCOS 和 MA 患者睪丸組織中的表達(dá)均下調(diào),差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。同時,這四類受體在 HYPO 中雖有下調(diào),但不具統(tǒng)計學(xué)意義。組織學(xué)評分結(jié)果與 RT-qPCR 結(jié)果一致,可提示視黃酸受體表達(dá)水平很可能與精子發(fā)生相關(guān)。


本文編號:2997363

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