發(fā)布時(shí)間：2018-02-25 17:38

  本文關(guān)鍵詞： 胰腺炎 肝損傷 瘦素 核因子-κB 細(xì)胞凋亡　出處：《瀘州醫(yī)學(xué)院》2014年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目的：通過檢測外源性瘦素（Leptin）對重癥急性胰腺炎（severe acutepancreatitis，SAP）模型大鼠的肝細(xì)胞凋亡指數(shù)、肝組織NF-kappaB（unclearfactor-kappa B，NF-κB）的表達(dá)的影響，以及瘦素干預(yù)后的大鼠血清腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor，TNF-α）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（Aspertateaminotransferase，AST）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（Alanine aminotransferase，ALT）、血清淀粉酶（Amylase，AMY）的表達(dá)水平變化，探討外源性瘦素對重癥急性胰腺炎大鼠模型的肝損傷的作用機(jī)制。方法：30只雄性SD大鼠，體重在250g-300g之間，隨機(jī)分為三組：假手術(shù)組、重癥急性胰腺炎模型組（SAP組）、重癥急性胰腺炎瘦素治療組（leptin組）。在麻醉顯效開腹后只翻動十二指腸、胰腺及其周圍組織制作假手術(shù)組動物模型。SAP組及瘦素組大鼠開腹后將3.5%的�；悄懰徕c（按照1ml/kg劑量，0.2ml/min的速度）緩慢逆行注入胰膽管中，制作SAP模型。瘦素組大鼠在關(guān)腹前給予瘦素20μg/kg腹腔注射。于假手術(shù)組和SAP組大鼠腹腔內(nèi)注射與瘦素組大鼠同等劑量的生理鹽水后關(guān)腹。術(shù)后各組大鼠禁食但自由飲水。術(shù)后12時(shí)處死各組大鼠，并對各組大鼠的胰腺及肝臟組織進(jìn)行大體標(biāo)本的觀察，將肝臟組織及胰腺組織進(jìn)行HE染色觀察，并將肝臟HE圖片進(jìn)行光鏡下的病理學(xué)評分，免疫組化染色法檢測肝組織NF-κB的表達(dá)。抽取下腔靜脈血提取血清，血清ALT、AST、AMY水平采用全自動生化儀進(jìn)行檢測。各實(shí)驗(yàn)組大鼠血清TNF-α水平采用酶聯(lián)免疫測定法(ELISA）檢測。采用細(xì)胞凋亡原位標(biāo)記（terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick end labeling，TUNEL）法測定肝臟組織的細(xì)胞凋亡指數(shù)。以上所有的檢測結(jié)果均采用SPSS12.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)數(shù)據(jù)分析。結(jié)果：1、各實(shí)驗(yàn)組大鼠死亡情況，假手術(shù)組在十二小時(shí)剖殺時(shí)無大鼠死亡。SAP組大鼠死亡3只。瘦素干預(yù)組大鼠死亡1只。2、各實(shí)驗(yàn)組腹腔內(nèi)外觀變化：（1）假手術(shù)組大鼠腹腔內(nèi)未見到腹水，胰腺及肝臟組織大體標(biāo)本未見到明顯的形態(tài)學(xué)改變，腹腔內(nèi)無皂化斑塊形成，腸腔無積氣。（2）SAP組胰腺組織外觀呈極度水腫的灰白色，可見周圍的胰腺組織壞死、出血，胰腺周圍及腹腔脂肪壞死明顯，組織彈性明顯下降，與周圍肝臟、腸管、腹壁等組織廣泛粘連。肝臟組織包膜張力增高，組織脆性增加，觸之易破裂，體積稍增大，表面呈暗黑紅色，與胰腺組織部分粘連，粘連處包膜下可見點(diǎn)狀出血。腹腔內(nèi)較多黃紅色腹水形成，腸腔廣泛積氣明顯，部分模型胃極度擴(kuò)張，其內(nèi)可見較多食物潴留，腸系膜及后腹壁均可見較多皂化斑塊附著。（3）瘦素組胰腺組織呈灰白色，與周圍組織部分粘連，可見少量出血，周圍脂肪組織壞死較SAP組明顯減少，胰腺周圍皂化斑塊減少，腸系膜及腹腔未見到皂化斑塊。肝臟組織體積無明顯變化，顏色暗紅、均勻，未見到出血點(diǎn)，與胰腺組織無明顯粘連。腹腔內(nèi)可見少量的淡黃色腹水，部分腸腔輕度積氣，無明顯胃潴留。3、各實(shí)驗(yàn)組胰腺組織光鏡下改變：（1）假手術(shù)組胰腺組織光鏡下HE染色后觀察，可見光鏡下胰腺組織結(jié)構(gòu)完整，未見壞死灶，葉間隔及細(xì)胞間隙未見水腫、出血及炎癥細(xì)胞浸潤。（2）SAP組鏡下可見大量炎癥細(xì)胞浸潤胰腺組織，明顯增寬的胰腺葉間隔、小葉間隔及胰腺腺泡間隔，腫脹的胰腺腺泡細(xì)胞。大片胰腺組織出血、壞死、小葉結(jié)構(gòu)紊亂，部分胰腺小葉結(jié)構(gòu)消失�？稍诓糠中∪~壞死區(qū)內(nèi)見到鈣化灶。（3）瘦素組：部分胰腺小葉可見結(jié)構(gòu)紊亂，間質(zhì)內(nèi)可見少量的炎細(xì)胞浸潤，胰腺腺泡細(xì)胞腫脹，并可見胰腺組織存在著不同程度的出血、壞死等病理改變。與SAP組相比較，瘦素組胰腺組織壞死、出血程度及炎癥細(xì)胞浸潤數(shù)量均有減少，且壞死灶內(nèi)未見鈣化灶。4、肝臟病理學(xué)改變：（1）假手術(shù)組肝臟組織肝細(xì)胞排列整齊，細(xì)胞無水腫，細(xì)胞間隙無增寬，未見到細(xì)胞壞死及凋亡。組織間無炎癥細(xì)胞浸潤。（2）SAP組可見肝細(xì)胞水腫，細(xì)胞間隙增寬，可見較多細(xì)胞嗜酸性變，可見細(xì)胞點(diǎn)狀壞死，組織間可見紅細(xì)胞浸潤，肝竇及匯管區(qū)可見較多量的紅細(xì)胞堆積和炎癥細(xì)胞浸潤。（3）瘦素組肝細(xì)胞輕度水腫，細(xì)胞間隙稍增寬，，可見少量嗜酸性變細(xì)胞，未見到明顯的肝細(xì)胞壞死，匯管區(qū)及肝竇炎癥細(xì)胞數(shù)較SAP組明顯減少。組織間未見到紅細(xì)胞。5、肝細(xì)胞凋亡指數(shù)、肝組織NF-κB的表達(dá)SAP組與瘦素組均較假手術(shù)組增高（P0.05）,瘦素組較SAP組降低（P0.05）。血清AMY、AST、ALT、TNF-α值瘦素組較SAP組降低（P0.05），SAP組較假手術(shù)組增高（P0.05）。結(jié)論：1、外源性瘦素對急性胰腺炎的肝損傷起保護(hù)作用，可能通過抑制炎癥反應(yīng)，減輕肝細(xì)胞的凋亡程度，可能為臨床治療重癥急性胰腺炎肝損傷提供新的途徑。2、TNF-α在重癥急性胰腺炎的肝損傷的發(fā)生及病情的演變過程中起了重要作用，通過抑制TNF-α的活化可減輕個(gè)體因炎癥反應(yīng)而導(dǎo)致的組織損傷。3、肝細(xì)胞的凋亡在SAP肝損傷中起了重要作用，外源性瘦素可能通過抑制NF-κB的表達(dá)而減輕肝細(xì)胞的凋亡程度，從而達(dá)到保護(hù)肝組織的作用。
[Abstract]:Objective : To investigate the effects of leptin on the apoptosis index , NF - kappa B ( NF - 魏B ) expression in rats with severe acute pancreatitis ( SAP ) and to investigate the effect of leptin on liver injury in rats with severe acute pancreatitis . Methods : Thirty male SD rats were randomly divided into three groups : sham operation group , severe acute pancreatitis model group ( SAP group ) , and serum amylase ( leptin group ) . The rats were divided into three groups : sham operation group , severe acute pancreatitis model group ( SAP group ) and serum amylase ( leptin group ) . The results showed that there were no obvious morphological changes in the abdominal cavity of SAP group . ( 2 ) There was no obvious change in the pancreatic tissue structure of the pancreatic tissue , but there was no obvious adhesion to the pancreatic tissue . Conclusion : 1 . The expression of TNF - 偽 plays an important role in the pathogenesis of liver injury in severe acute pancreatitis .

【學(xué)位授予單位】：瀘州醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R576

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前4條

1 徐明清,龔建平,薛蘭,韓本立,徐鳳;Kupffer細(xì)胞NF-κB激活對膽道梗阻合并肝部分切除鼠肝細(xì)胞再生的影響[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2001年10期

2 莊永敬;曹云飛;吳桂榮;盧良聲;;缺血預(yù)處理對大鼠肝臟缺血/再灌注早期核因子κB活性及細(xì)胞凋亡的影響[J];肝膽胰外科雜志;2009年06期

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本文編號：1534522