發(fā)布時(shí)間：2020-11-06 18:27

　　 肥胖是指可損害健康的異�；蜻^(guò)量脂肪積累,隨著生活水平的提高以及生活方式的改變,肥胖已經(jīng)成為世界性的公共衛(wèi)生難題。研究表明肥胖不僅是一種代謝性異常疾病,還是2型糖尿病、非酒精性脂肪肝病、心血管疾病以及腫瘤等眾多疾病的重要危險(xiǎn)因素�，F(xiàn)有治療肥胖的藥物大都存在毒副作用大及易反彈等缺點(diǎn),因此,尋找一種安全有效的減肥活性物質(zhì)是科研工作者的努力方向。課題組前期研究發(fā)現(xiàn)殼聚糖具有良好的減肥降脂活性,但由于其水溶性差、不易吸收等缺點(diǎn)極大地限制了其開(kāi)發(fā)利用。殼寡糖(Chitosan oligosaccharides,COS)作為殼聚糖的水解產(chǎn)物,來(lái)源廣泛價(jià)格低廉,其水溶性好、生物利用度高并且具有多種生物活性,在生物醫(yī)藥及保健食品領(lǐng)域有廣泛的應(yīng)用前景。本課題以平均分子量小于等于1000 Da的COS(COST)為研究對(duì)象,首先對(duì)COST進(jìn)行安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià),再將安全無(wú)毒的COST制備成顆粒劑(COST granules,COSTG),采用營(yíng)養(yǎng)型肥胖大鼠模型評(píng)估COSTG的減肥活性以及對(duì)機(jī)體脂質(zhì)代謝的影響,隨后以肝臟組織為研究對(duì)象,對(duì)其作用機(jī)制進(jìn)行初步探討,為COSTG的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。為了評(píng)估COST的安全性,對(duì)其進(jìn)行了系統(tǒng)的安全性毒理學(xué)研究。急性毒性試驗(yàn)結(jié)果表明,COST對(duì)雌雄小鼠的最大耐受量均超過(guò)54g/kg·bw,按照急性毒物分級(jí),屬于無(wú)毒級(jí)物質(zhì)。采用Ames試驗(yàn)、小鼠骨髓細(xì)胞微核試驗(yàn)以及小鼠精子畸形試驗(yàn)來(lái)評(píng)價(jià)COST的致突變作用,以上三項(xiàng)遺傳毒性試驗(yàn)結(jié)果均為陰性,表明在試驗(yàn)劑量范圍內(nèi)COST沒(méi)有遺傳毒性作用。30天喂養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)果表明,COST對(duì)大鼠的最大未觀察到有害作用劑量在5.00 g/kg·bw以上,即為人體推薦劑量0.05 g/kg·bw的100倍以上。上述結(jié)果表明COST為無(wú)毒級(jí)物質(zhì),安全性高。按照最優(yōu)處方:5%聚維酮作為黏合劑,0.6%阿司帕坦作為矯味劑,無(wú)水乙醇作為潤(rùn)濕劑,采用手工濕法制粒制備COSTG。制得的COSTG為淡黃褐色固體顆粒,色澤一致,無(wú)潮解、軟化、結(jié)塊現(xiàn)象,口味微甜,成型率為94.63%,含水量為6.28%,干燥失重為1.32%,溶化性檢查顆粒全部溶解,無(wú)渾濁現(xiàn)象,各指標(biāo)均符合《中國(guó)藥典(2015年)》要求。方法學(xué)研究表明,采用苯酚硫酸法測(cè)定COSTG中COST含量的方法準(zhǔn)確度、精密度以及穩(wěn)定性良好。COSTG中COST的含量測(cè)定平均值為92.13%,RSD為0.74%,符合設(shè)定要求。通過(guò)高脂飲食建立營(yíng)養(yǎng)型肥胖大鼠模型,對(duì)COSTG的減肥活性及其在肥胖大鼠脂質(zhì)代謝方面的影響進(jìn)行了評(píng)價(jià)。研究發(fā)現(xiàn),COSTG在不影響攝食量的前提下,顯著減少肥胖大鼠的體重增重,有效抑制肥胖大鼠脂肪組織的肥大與增生,顯著降低肥胖大鼠的脂/體比,表現(xiàn)出良好的減肥活性,并呈現(xiàn)出一定的劑量依賴性。此外,在脂質(zhì)代謝方面,COSTG能改善肥胖大鼠的血脂異常,主要表現(xiàn)為顯著減低血清中TC和TG含量;COSTG能顯著降低肥胖大鼠的肝重以及肝重指數(shù),抑制肥胖大鼠肝臟組織中脂質(zhì)堆積,預(yù)防肝臟脂肪變性,主要表現(xiàn)為減少肝臟中TG含量;高劑量COSTG還能顯著增加TC和TG在糞便中的排泄量。為了進(jìn)一步探究COSTG改善肥胖大鼠脂質(zhì)代謝的分子機(jī)制,從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和脂質(zhì)合成及分解代謝方面對(duì)其作用機(jī)制進(jìn)行了探討。結(jié)果表明,COSTG一方面可下調(diào)肝臟中SREBP-1c、FAS以及PPARγ的轉(zhuǎn)錄,抑制脂質(zhì)合成代謝;另一方面可上調(diào)肝臟中PPARα的轉(zhuǎn)錄,促進(jìn)脂肪酸β-氧化分解代謝;另外還可以下調(diào)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)通路中相關(guān)因子的轉(zhuǎn)錄,減輕肝臟內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激。COSTG可能通過(guò)上述三條途徑改善肥胖大鼠的脂質(zhì)代謝紊亂。綜上,COST為無(wú)毒級(jí)物質(zhì),以其為主藥制備質(zhì)量合格的COSTG。COSTG可顯著減少肥胖大鼠體重增重,糾正血脂紊亂,改善脂質(zhì)代謝,在減肥降脂以及預(yù)防脂肪肝方面具有顯著活性。COSTG對(duì)肝臟脂質(zhì)代謝的調(diào)節(jié)作用可能與抑制脂質(zhì)合成、促進(jìn)脂質(zhì)氧化分解以及減輕內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激有關(guān)。本研究結(jié)果將為COSTG在減肥降脂和預(yù)防脂肪肝的保健產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)利用提供重要的理論支持。
【學(xué)位單位】：廣東藥科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R99
【部分圖文】：

肥胖患病率的進(jìn)展圖

男性和女性的全球體重指數(shù)分布圖

廣東藥科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文（3）使用高脂飲食誘導(dǎo)建立營(yíng)養(yǎng)型肥胖 SD 大鼠模型，對(duì) COSTG 的減肥功能進(jìn)行評(píng)價(jià)，并探討其對(duì)肥胖大鼠脂質(zhì)代謝的影響。（4）采用 FQRT-PCR 技術(shù)對(duì)大鼠肝臟中的脂質(zhì)代謝以及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)基因進(jìn)行檢測(cè)，初步探討 COSTG 改善肝臟脂質(zhì)代謝的藥理機(jī)制。1.4.3 本課題的技術(shù)路線
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1 葉芷君;COST安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)及COSTG對(duì)肥胖大鼠脂質(zhì)代謝的影響[D];廣東藥科大學(xué);2019年

本文編號(hào)：2873501