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新型凝膠多糖納米粒子的制備及體外遞送siRNA研究

發(fā)布時(shí)間:2024-05-26 20:52
  RNA干擾(RNAi)是一種轉(zhuǎn)錄后水平的基因調(diào)節(jié)作用,利用RNAi所產(chǎn)生的基因沉默現(xiàn)象能夠用于癌癥等疾病的臨床治療,而RNAi臨床應(yīng)用的關(guān)鍵之一是構(gòu)建安全有效的遞送載體,以實(shí)現(xiàn)對(duì)基因藥物的有效遞送。本文以天然curdlan多糖為原料,首先通過(guò)對(duì)其結(jié)構(gòu)單元的C6位進(jìn)行疊氮和還原,制備不同氨基化程度(30%,50%,70%和100%)的6-氨基-6-脫氧-凝膠多糖(6AC)。經(jīng)IR和13CNMR確定結(jié)構(gòu),通過(guò)激光粒度儀和掃描電鏡測(cè)試所形成納米粒子的粒徑分布、形貌、Zeta電位,并通過(guò)酸堿滴定的方法測(cè)定對(duì)H。的緩沖能力;然后通過(guò)體外細(xì)胞siRNA轉(zhuǎn)染試驗(yàn)對(duì)其作為基因載體的安全性及對(duì)基因遞送效率等做了研究。研究結(jié)果表明此新型的6AC能形成粒徑約為120nm的納米粒子,且其水溶液具有很好的氫離子負(fù)載能力和正的Zeta電位值,6AC與siRNA結(jié)合后形成粒徑約為130nm的粒子:此載體對(duì)于HepG2細(xì)胞和Hela細(xì)胞顯示了較低的細(xì)胞毒性,對(duì)于A549、H727、HCT116, THP-1和MEF細(xì)胞,能夠高效率遞送siRNA使內(nèi)源性靶標(biāo)mRNA水平下調(diào)70-90%,而且對(duì)于小鼠胚胎干細(xì)胞能顯著地在...

【文章頁(yè)數(shù)】:70 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖1.3?siRNA的基因沉默機(jī)理??Fig.1.3?Delivery?of?si民NA?化erapeutic??

圖1.3?siRNA的基因沉默機(jī)理??Fig.1.3?Delivery?of?si民NA?化erapeutic??

Fig.1.3?Delivery?of?si民NA?化erapeutic??1.3.2?SiRNA治療的限制因素??通過(guò)靜脈注射可W將SiRNA遞送到組織,如圖1.4所示,SiRNA經(jīng)過(guò)靜脈注射后,通過(guò)??血液循環(huán)將SiRNA遞送分散到組織,在姐織內(nèi),SiRNA離開(kāi)血管進(jìn)入間隙,....


圖1.4?SiRNA進(jìn)入細(xì)胞的過(guò)程??Fig?1.4?The?process?of?delivering?siRNA?imo?cells??

圖1.4?SiRNA進(jìn)入細(xì)胞的過(guò)程??Fig?1.4?The?process?of?delivering?siRNA?imo?cells??

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圖1.6單層脂質(zhì)體(A)與多層脂巧體(B)的結(jié)構(gòu)??Figl?.6?structures?ofMonolayer?liposomes?(A)?and?the?multilayer?liposomes?(B)??

圖1.6單層脂質(zhì)體(A)與多層脂巧體(B)的結(jié)構(gòu)??Figl?.6?structures?ofMonolayer?liposomes?(A)?and?the?multilayer?liposomes?(B)??

內(nèi)蒙古大學(xué)碩+學(xué)位論文脂質(zhì)體載體??質(zhì)體具有雙分子層的囊泡結(jié)構(gòu),是一種人工膜,己經(jīng)成為基因治療中的常用水的部分圍繞在磯脂雙分子層的內(nèi)部,為單層脂質(zhì)體,如圖(A)所示;如果上,雙分子脂質(zhì)膜與水層交替排列形成層脂質(zhì)體,如圖巧)所示。在緩沖液中,可組成多層脂質(zhì)體;具有特定尺寸(100-....


圖1.?7樹(shù)枝狀分于體內(nèi)遞送過(guò)程??Figure?1.7?Dendrimers?delivery?processes?in?the?cell??

圖1.?7樹(shù)枝狀分于體內(nèi)遞送過(guò)程??Figure?1.7?Dendrimers?delivery?processes?in?the?cell??

為了提高血液流動(dòng)過(guò)程中環(huán)境的穩(wěn)定性,Taratula提出用一個(gè)帶有二硫鍵的樹(shù)枝狀分子與??與SiRNA組裝形成納米粒子進(jìn)入細(xì)胞,細(xì)胞質(zhì)中的還原物質(zhì)谷脫甘膚的存在能夠使二硫鏈還??原,進(jìn)而使SiRNA在範(fàn)細(xì)胞質(zhì)內(nèi)釋放。如圖1.7所示,裸露的siRNA?(A’)經(jīng)過(guò)內(nèi)吞作用進(jìn)入???....



本文編號(hào):3982291

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