發(fā)布時(shí)間：2018-06-17 17:27

  本文選題：循環(huán)腫瘤細(xì)胞 + 無(wú)標(biāo)記��； 參考：《重慶醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：目的癌癥是全球死亡率最高的疾病,其引起死亡的主要原因是腫瘤細(xì)胞的侵襲及轉(zhuǎn)移,所以對(duì)腫瘤轉(zhuǎn)移的早期監(jiān)測(cè)具有重要的臨床價(jià)值。血液中的循環(huán)腫瘤細(xì)胞包含大量的腫瘤表型信息,是腫瘤轉(zhuǎn)移的重要標(biāo)志物。因此,高靈敏的檢測(cè)與高特異的收集循環(huán)腫瘤細(xì)胞對(duì)癌癥轉(zhuǎn)移的早期監(jiān)測(cè)以及分子機(jī)制的研究是十分有意義的。方法基于電化學(xué)阻抗譜法設(shè)計(jì)一種新型無(wú)標(biāo)記的電化學(xué)細(xì)胞傳感器用于循環(huán)腫瘤細(xì)胞的檢測(cè)。首先,將6-巰基-1-乙醇(MCH)固定在金電極表面,使捕獲探針定向插入MCH分子所形成的間隙中,可促進(jìn)捕獲探針站立且更加均勻地分布在電極表面,進(jìn)而提高細(xì)胞傳感器的靈敏度與穩(wěn)定性。利用高親和力的適體特異地識(shí)別腫瘤細(xì)胞膜上過(guò)表達(dá)的上皮細(xì)胞粘附分子捕獲靶細(xì)胞以提高檢測(cè)特異性。由于細(xì)胞具有很強(qiáng)的阻礙電子轉(zhuǎn)移特性,因此我們選擇電化學(xué)阻抗譜法對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)。檢測(cè)后,借助脫氧尿嘧啶水解酶水解適體與捕獲探針結(jié)合部分的脫氧尿苷實(shí)現(xiàn)電極的重復(fù)利用以及循環(huán)腫瘤細(xì)胞的收集。結(jié)果此傳感器具有良好穩(wěn)定性和可重復(fù)性,檢測(cè)范圍可達(dá)到30-1×106cells/m L,檢測(cè)限可低至10cells/m L。并且該細(xì)胞傳感器憑借上皮細(xì)胞黏附分子與相應(yīng)適體的特異性結(jié)合可精準(zhǔn)的在實(shí)際血液樣本中區(qū)分出靶細(xì)胞。此細(xì)胞傳感器還可通過(guò)脫氧尿嘧啶水解酶特異性切除適體與捕獲探針結(jié)合部分的脫氧尿苷,成功地實(shí)現(xiàn)電極的8次重復(fù)利用及循環(huán)腫瘤細(xì)胞的富集。結(jié)論綜上所述,我們?cè)O(shè)計(jì)的細(xì)胞傳感器有很大的潛力可以應(yīng)用于臨床,可望對(duì)癌癥的轉(zhuǎn)移進(jìn)行早期監(jiān)測(cè)。
[Abstract]:Objective Cancer is the disease with the highest mortality in the world, and the main cause of death is the invasion and metastasis of tumor cells, so it has important clinical value for early monitoring of tumor metastasis. Circulating tumor cells in blood contain a lot of phenotypic information and are important markers of tumor metastasis. Therefore, high sensitive detection and high specific collection of circulating tumor cells for early detection of cancer metastasis and molecular mechanisms are of great significance. Methods A novel unlabeled electrochemical cell sensor was designed based on electrochemical impedance spectroscopy (EIS) to detect circulating tumor cells. First of all, by immobilization of 6-mercapto-1-ethanolol (MCH) on the surface of the gold electrode, the trapping probe is inserted into the gap formed by the MCH molecule, which can promote the trap probe to stand and distribute more evenly on the electrode surface. Furthermore, the sensitivity and stability of the cell sensor are improved. High affinity aptamers are used to specifically recognize the overexpression of epithelial cell adhesion molecules on tumor cell membranes to capture target cells in order to improve detection specificity. Because of the strong resistance to electron transfer, we choose electrochemical impedance spectroscopy (EIS) to detect the cells. After detection, deoxyuridine was used to reuse the electrode and collect circulating tumor cells by using deoxyuridine hydrolase to hydrolyze aptamer and capture probe part of deoxyuridine. Results the sensor has good stability and repeatability. The detection range can reach 30-1 脳 106cells/m / L, and the detection limit can be as low as 10cells/m L. The cell sensor can accurately distinguish target cells from actual blood samples by the specific binding of epithelial cell adhesion molecules to corresponding aptamers. This cell sensor can also remove deoxyuridine from aptamer and capture probe specifically by deoxyuridine hydrolase, and successfully reuse the electrode for 8 times and enrich tumor cells in circulation. Conclusion in conclusion, the cell sensor designed by us has great potential for clinical application and can be used for early detection of cancer metastasis.
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類(lèi)號(hào)】：R730.43;TP212

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本文編號(hào)：2031868