基于HILIC-MS/MS定量測(cè)定健康人尿液和血清中內(nèi)源性糖類化合物含量的研究
發(fā)布時(shí)間:2020-12-06 17:58
隨著人口老齡化的快速發(fā)展,給當(dāng)前社會(huì)帶了一系列問(wèn)題,其中慢性非傳染性疾病是老年人的主要威脅,如高血壓、心臟病、糖尿病和癌癥等。對(duì)于這些疾病最好的辦法還是早發(fā)現(xiàn)早治療,提高患者的生存質(zhì)量。作為一門新興科學(xué),代謝組學(xué)在疾病的早期診斷、預(yù)防和治療中都具有強(qiáng)大的優(yōu)勢(shì)。疾病的變化首先從代謝變化開(kāi)始,代謝的失常,導(dǎo)致蛋白質(zhì)的異常。而長(zhǎng)期的代謝紊亂,會(huì)大大增加基因在復(fù)制中的突變幾率,最終導(dǎo)致基因的突變,進(jìn)而引發(fā)許多不可逆的重大疾病,這是代謝組學(xué)能夠準(zhǔn)確實(shí)現(xiàn)疾病早期診斷的理論基礎(chǔ)。代謝組學(xué)的研究思路主要有:代謝物靶標(biāo)分析、代謝輪廓譜分析、代謝指紋分析和生物標(biāo)志物分析。本研究沿用了代謝組學(xué)研究思路,利用親水色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)分別對(duì)人尿和血清中多種內(nèi)源性糖類化合物進(jìn)行簡(jiǎn)單快速的含量測(cè)定。本研究首先利用親水色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對(duì)人尿中15種內(nèi)源性糖類化合物進(jìn)行簡(jiǎn)單快速的含量測(cè)定。并對(duì)色譜條件、質(zhì)譜條件和樣品前處理方法進(jìn)行了優(yōu)化,最終以含內(nèi)標(biāo)的甲醇/乙腈(50:50,v/v)為沉淀劑,按體積比5:1加入到尿液中除雜,以含10 mmol·L-1醋酸銨的水/乙腈(95/5,v/v)和含10 m...
【文章來(lái)源】:上海交通大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:85 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
代謝組學(xué)總流程研究思路圖
- 25 -圖 3 15 種糖類化合物標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)母離子 UHPLC-MS/MS 圖譜Fig.3UHPLC-MS/MS chromatograms forprecursor ions of the 15 standardcarbohydrates
圖 4 流動(dòng)相中不同 pH 條件對(duì)化合物信號(hào)的影響Fig. 4 Effect of pH (acidic, neutral and basic of mobile phase) on the compoundssignal在考察不同色譜柱柱溫(30、40、50、60 ℃)對(duì)目標(biāo)化合物的色譜行為的影響時(shí)發(fā)現(xiàn),柱溫對(duì)部分糖類物質(zhì)的峰形影響較大,這也與 α 和 β 端基異構(gòu)之間互相轉(zhuǎn)換速度有關(guān)。當(dāng)溫度升高時(shí),該互變異構(gòu)轉(zhuǎn)換速度加快,在色譜圖中出現(xiàn)一個(gè)較對(duì)稱、尖銳的色譜峰且信號(hào)響應(yīng)增加。但柱溫升高同時(shí)會(huì)導(dǎo)致部分化合物信號(hào)降低(如圖 5 所示),另外還影響色譜柱的使用壽命及穩(wěn)定性,多方面考慮本實(shí)驗(yàn)柱溫最終設(shè)定為 60 ℃。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]LC-MS/MS技術(shù)在藥物代謝研究中的應(yīng)用進(jìn)展[J]. 姜艷彬,單吉浩,王瑩,蔡英華,田亞平. 藥物分析雜志. 2014(03)
[2]生物樣品定量分析方法指導(dǎo)原則(草案)[J]. 鐘大放,李高,劉昌孝. 藥物評(píng)價(jià)研究. 2011(06)
[3]代謝組學(xué)及其分析技術(shù)[J]. 王斯婷,李曉娜,王皎,凌笑梅. 藥物分析雜志. 2010(09)
[4]代謝組學(xué)的整合化發(fā)展及其新進(jìn)展[J]. 朱超,梁瓊麟,王義明,羅國(guó)安. 分析化學(xué). 2010(07)
[5]冠心病心血瘀阻證血漿代謝組學(xué)的檢測(cè)分析[J]. 簡(jiǎn)維雄,袁肇凱,黃獻(xiàn)平,陳清華,鄭景輝,李勇華,王麗萍. 中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2010(06)
[6]茶葉中糖類物質(zhì)分析方法綜述[J]. 譚和平,葉善蓉,陳麗,鄒燕. 中國(guó)測(cè)試技術(shù). 2007(05)
[7]蛋白質(zhì)糖基化工程[J]. 張旭. 生物工程進(jìn)展. 1995(02)
本文編號(hào):2901796
【文章來(lái)源】:上海交通大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:85 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
代謝組學(xué)總流程研究思路圖
- 25 -圖 3 15 種糖類化合物標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)母離子 UHPLC-MS/MS 圖譜Fig.3UHPLC-MS/MS chromatograms forprecursor ions of the 15 standardcarbohydrates
圖 4 流動(dòng)相中不同 pH 條件對(duì)化合物信號(hào)的影響Fig. 4 Effect of pH (acidic, neutral and basic of mobile phase) on the compoundssignal在考察不同色譜柱柱溫(30、40、50、60 ℃)對(duì)目標(biāo)化合物的色譜行為的影響時(shí)發(fā)現(xiàn),柱溫對(duì)部分糖類物質(zhì)的峰形影響較大,這也與 α 和 β 端基異構(gòu)之間互相轉(zhuǎn)換速度有關(guān)。當(dāng)溫度升高時(shí),該互變異構(gòu)轉(zhuǎn)換速度加快,在色譜圖中出現(xiàn)一個(gè)較對(duì)稱、尖銳的色譜峰且信號(hào)響應(yīng)增加。但柱溫升高同時(shí)會(huì)導(dǎo)致部分化合物信號(hào)降低(如圖 5 所示),另外還影響色譜柱的使用壽命及穩(wěn)定性,多方面考慮本實(shí)驗(yàn)柱溫最終設(shè)定為 60 ℃。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]LC-MS/MS技術(shù)在藥物代謝研究中的應(yīng)用進(jìn)展[J]. 姜艷彬,單吉浩,王瑩,蔡英華,田亞平. 藥物分析雜志. 2014(03)
[2]生物樣品定量分析方法指導(dǎo)原則(草案)[J]. 鐘大放,李高,劉昌孝. 藥物評(píng)價(jià)研究. 2011(06)
[3]代謝組學(xué)及其分析技術(shù)[J]. 王斯婷,李曉娜,王皎,凌笑梅. 藥物分析雜志. 2010(09)
[4]代謝組學(xué)的整合化發(fā)展及其新進(jìn)展[J]. 朱超,梁瓊麟,王義明,羅國(guó)安. 分析化學(xué). 2010(07)
[5]冠心病心血瘀阻證血漿代謝組學(xué)的檢測(cè)分析[J]. 簡(jiǎn)維雄,袁肇凱,黃獻(xiàn)平,陳清華,鄭景輝,李勇華,王麗萍. 中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2010(06)
[6]茶葉中糖類物質(zhì)分析方法綜述[J]. 譚和平,葉善蓉,陳麗,鄒燕. 中國(guó)測(cè)試技術(shù). 2007(05)
[7]蛋白質(zhì)糖基化工程[J]. 張旭. 生物工程進(jìn)展. 1995(02)
本文編號(hào):2901796
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