發(fā)布時間：2020-12-11 23:33

　　目的建立人類白細(xì)胞抗原B5801/5701/1502核酸檢測國家參考品。方法采集HLAB5801/5701/1502陽性和陰性志愿者的新鮮外周血,經(jīng)EB病毒轉(zhuǎn)化,培養(yǎng)建立永生化細(xì)胞系。細(xì)胞擴(kuò)增培養(yǎng),提取基因組DNA,制備成國家參考品并經(jīng)高通量測序驗(yàn)證。4家協(xié)作標(biāo)定單位采用熒光PCR法、高通量測序（NGS）、基因測序分型（SBT測序法）對國家參考品進(jìn)行定值,并進(jìn)行國家參考品的復(fù)溶（在-20℃and 20～25℃之間反復(fù)凍融3次）穩(wěn)定性和均勻性研究。結(jié)果 HLA-B5801/5701/1502核酸檢測國家參考品成功制備,包含5例HLA-B5801陽性、3例HLA-B5701陽性、3例HLA-B1502陽性和9例陰性樣本。該參考品定值準(zhǔn)確,均勻性結(jié)果一致,參考品復(fù)溶3次后仍然穩(wěn)定。結(jié)論人類白細(xì)胞抗原B5801/5701/1502核酸檢測國家參考品的各項(xiàng)指標(biāo)均符合要求,可用于HLA-B5801核酸檢測試劑盒、HLA-B5701核酸檢測試劑盒、HLA-B1502核酸檢測試劑盒的性能評價。 

【文章來源】：分子診斷與治療雜志. 2020年09期 第1137-1141頁

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 試劑
        1.1.2 儀器
    1.2 方法
        1.2.1 樣本收集
        1.2.2 細(xì)胞系基因組DNA提取、質(zhì)檢及定量
        1.2.3 國家參考品的制備與驗(yàn)證
        1.2.4 國家參考品的協(xié)作標(biāo)定
        1.2.5 國家參考品穩(wěn)定性和均勻性驗(yàn)證
2 結(jié)果
    2.1 國家參考品的制備及驗(yàn)證
    2.2 國家參考品的協(xié)作標(biāo)定
    2.3 國家參考品的穩(wěn)定性和均勻性驗(yàn)證
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