家蠶蛹致敏原蛋白的表達(dá)水平差異研究
【學(xué)位單位】:江蘇科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位年份】:2019
【中圖分類】:S881.2
【文章目錄】:
摘要
Abstract
第1章 緒論
1.1 致敏原研究進(jìn)展
1.1.1 致敏原概述
1.1.2 食物過(guò)敏的機(jī)制
1.1.3 食物過(guò)敏動(dòng)物模型研究
1.1.4 致敏原的檢測(cè)技術(shù)
1.2 致敏原致敏的機(jī)理
1.2.1 致敏原的抗原表位
1.2.2 致敏原的分子模擬
1.3 家蠶致敏原的研究進(jìn)展
1.3.1 家蠶致敏原的致敏方式
1.3.2 家蠶致敏的臨床表現(xiàn)
1.3.3 家蠶致敏原的致敏成分
1.3.4 家蠶蛹致敏原分子生物學(xué)研究
1.4 本研究的目的與意義
1.5 本研究的主要內(nèi)容
第2章 家蠶蛹致敏原基因轉(zhuǎn)錄水平表達(dá)差異
2.1 實(shí)驗(yàn)材料與設(shè)備
2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備和試劑
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 家蠶蛹RNA的提取
2.2.2 反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)
2.2.3 實(shí)時(shí)熒光定量分析
2.3 結(jié)果與分析
2.4 討論
第3章 原核表達(dá)及多克隆抗體制備
3.1 實(shí)驗(yàn)材料與設(shè)備
3.1.1 試劑和實(shí)驗(yàn)儀器
3.2 實(shí)驗(yàn)方法
3.2.1 RNA提取與反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)
3.2.2 PCR擴(kuò)增反應(yīng)
3.2.3 目的片段膠回收
3.2.4 目的基因與載體的酶切、純化、連接
3.2.5 轉(zhuǎn)化及克隆測(cè)序
3.2.6 重組DNA的篩選和鑒定
3.2.7 誘導(dǎo)表達(dá)
3.2.8 His柱洗脫
3.2.9 抗體制備
3.3 結(jié)果與分析
3.3.1 HSP20.8和CI-8A基因的克隆
3.3.2 原核表達(dá)及抗體制備
3.4 討論
第4章 家蠶蛹致敏原在蛋白水平表達(dá)的差異
4.1 實(shí)驗(yàn)材料
4.1.1 設(shè)備與試劑
4.1.2 常用試劑和緩沖液的配制
4.2 實(shí)驗(yàn)方法
4.2.1 家蠶蛹總蛋白的提取
4.2.2 蠶蛹總蛋白濃度定量
4.2.3 SDS-PAGE分析
4.2.4 Western-blot檢測(cè)
4.3 結(jié)果與分析
4.4 討論
結(jié)論與展望
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間所發(fā)表的論文
致謝
【相似文獻(xiàn)】
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