煙粉虱Bemisia tabaci(Gennadius)屬半翅目Hemiptera,粉虱科Aleyrodidae,是棉花、蔬菜和園林花卉等植物的重要害蟲(chóng)。煙粉虱有至少34個(gè)外型無(wú)法區(qū)分的生物型(隱種),而B(niǎo)和Q是入侵我國(guó)、為害最為嚴(yán)重的兩個(gè)生物型。煙粉虱通過(guò)成若蟲(chóng)刺吸取食植物汁液造成危害,并分泌蜜露導(dǎo)致植株出現(xiàn)生理異常;更嚴(yán)重的是,煙粉虱通過(guò)傳播病毒使植株感染病毒病,給農(nóng)業(yè)生產(chǎn)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。目前化學(xué)防治仍然是煙粉虱爆發(fā)為害時(shí)的主要防控手段,但化學(xué)農(nóng)藥的長(zhǎng)期使用導(dǎo)致煙粉虱產(chǎn)生了明顯的抗藥性,給煙粉虱的化學(xué)防治帶來(lái)巨大的挑戰(zhàn)和困難。生物防治是煙粉虱綜合治理中的重要組成部分。麗蚜小蜂Encarsia formosa Gahan(膜翅目、蚜小蜂科)是粉虱類害蟲(chóng)的一種重要寄生性天敵昆蟲(chóng),可以寄生并取食煙粉虱若蟲(chóng),在國(guó)內(nèi)外很多設(shè)施栽培中應(yīng)用并取得優(yōu)良防效。在麗蚜小蜂的規(guī);庇^(guò)程中,糖類能夠促進(jìn)小蜂產(chǎn)卵及延長(zhǎng)小蜂壽命,但不同糖類對(duì)麗蚜小蜂寄生Q煙粉虱的性能及對(duì)其糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白誘導(dǎo)表達(dá)的影響尚不明確。針對(duì)上述問(wèn)題,本論文主要從以下三個(gè)方面開(kāi)展研究工作。首先,通過(guò)收集麗蚜小蜂寄生煙粉虱后的生長(zhǎng)發(fā)育數(shù)據(jù),研究了麗蚜小蜂寄生B和Q煙粉虱后的種群發(fā)育參數(shù)及其后續(xù)寄生效果;然后,研究了補(bǔ)充6種不同糖分后麗蚜小蜂對(duì)Q煙粉虱的產(chǎn)卵和寄生特性的影響;最后在克隆麗蚜小蜂糖運(yùn)轉(zhuǎn)蛋白EfST1基因的基礎(chǔ)上,研究了糖分對(duì)EfST1基因的誘導(dǎo)表達(dá)。取得了以下研究結(jié)果。1、麗蚜小蜂寄生B和Q煙粉虱的種群參數(shù)分析為明確麗蚜小蜂寄生B和Q煙粉虱后的生長(zhǎng)發(fā)育和繁殖狀況,組建了麗蚜小蜂寄生B和Q煙粉虱的生命表。結(jié)果表明,麗蚜小蜂寄生B煙粉虱后卵-蛹期存活率在第17d開(kāi)始緩慢下降,直至27 d小蜂全部死亡,比寄生Q煙粉虱后的后代存活時(shí)間更長(zhǎng)。麗蚜小蜂寄生Q煙粉虱后內(nèi)稟增長(zhǎng)率(r)、周限增長(zhǎng)率(λ)、凈增值率(R_0)和平均世代周期(T)分別為0.198、1.218、37.806和18.341;而寄生B煙粉虱后分別為0.207、1.230、42.697和18.148。由種群動(dòng)態(tài)參數(shù)可知,寄生B煙粉虱的麗蚜小蜂后代種群數(shù)量增長(zhǎng)快于寄生Q煙粉虱的麗蚜小蜂。表明,田間釋放麗蚜小蜂后,寄生蜂對(duì)B煙粉虱種群寄生后其種群增長(zhǎng)快于寄生Q煙粉虱,可推測(cè)田間釋放麗蚜小蜂進(jìn)行生物防控時(shí),小蜂對(duì)B煙粉虱的控害效率高于對(duì)Q煙粉虱的控害效率。研究結(jié)果有助于為田間煙粉虱種群的綜合治理策略制定提供理論依據(jù)。2、補(bǔ)充糖分對(duì)麗蚜小蜂寄生Q煙粉虱的生物學(xué)特性影響評(píng)估了補(bǔ)充6種不同糖分(濃度10%的葡萄糖、果糖、蔗糖、海藻糖、松三糖和蜂蜜)對(duì)麗蚜小蜂生殖特性和其后代對(duì)我國(guó)優(yōu)勢(shì)Q煙粉虱種群的3齡若蟲(chóng)寄生特性的影響。與清水對(duì)照相比,取食6種糖分2 h之后,麗蚜小蜂成蜂能產(chǎn)生更多的成熟卵,而飼喂清水的小蜂后代則沒(méi)有成熟卵。當(dāng)麗蚜小蜂取食葡萄糖、果糖、蔗糖和蜂蜜2 h后,對(duì)煙粉虱若蟲(chóng)的寄生率和褐蛹的羽化率最高;6種糖分均可縮短麗蚜小蜂的發(fā)育歷期;果糖和葡萄糖顯著延長(zhǎng)麗蚜小蜂的壽命。綜合分析,果糖、葡萄糖和蜂蜜可以增加麗蚜小蜂的生殖力和提高對(duì)煙粉虱的寄生率。補(bǔ)充糖分可提升麗蚜小蜂種群增長(zhǎng)及對(duì)煙粉虱的控害率,為田間煙粉虱的生物防治提供可續(xù)基礎(chǔ)。3、麗蚜小蜂糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因克隆及其誘導(dǎo)表達(dá)克隆獲得了麗蚜小蜂的糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白EfST1基因,與其他寄生蜂的糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因序列同源性達(dá)65%以上;實(shí)時(shí)熒光定量qPCR技術(shù)檢測(cè)發(fā)現(xiàn),飼喂不同濃度的葡萄糖溶液均可顯著提高EfST1基因的表達(dá)量,且飼喂不同時(shí)間段(2-48h)后,麗蚜小蜂EfST1基因表達(dá)量均顯著高于對(duì)照組,2h和48h處理組間差異不顯著。綜上,EfST1基因可能與糖分補(bǔ)充及其轉(zhuǎn)運(yùn)密切相關(guān),該基因誘導(dǎo)表達(dá)受糖分濃度影響小。研究結(jié)果為進(jìn)一步研究寄生蜂生物防治過(guò)程中補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)及其轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制奠定基礎(chǔ)。
【學(xué)位單位】:中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位年份】:2018
【中圖分類】:S476.3;S433
【部分圖文】:
CR 擴(kuò)增 RT PCR amplification of E. formosa RT-PCR 擴(kuò)增麗蚜小蜂的糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白ene in E. formosa by RT-PCR using de片段序列進(jìn)行拼接,隨后利用非翻譯區(qū)長(zhǎng) 117bp,已克隆獲得1 bp,起始密碼子 ATG 后的第進(jìn)化分析序結(jié)果進(jìn)行blast同源性比較,發(fā) 上其他糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因具有高膜翅目昆蟲(chóng)糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因的保蛋白基因的表達(dá)序列,命名為 糖轉(zhuǎn)運(yùn)基因在進(jìn)化上保守性強(qiáng),

麗蚜小蜂EfST1序列在系統(tǒng)進(jìn)化上與同屬于膜翅目的短管赤眼蜂的遺傳距離更近,且同源性高達(dá)84%(圖4-4)。C. cinctus (XP_015604651) FFVTPILGSVSDRCRLKQGRRRPFILLLAVGVLIGLILVPNGEGMGYAFGDVPSVTNVTVC. solmsi marchali (XP_011495920.1) FFVTPILGSVSDRCRLKQGRRRPFILLLAIGVLVGLILVPNGESIGYAFGDTS--SNFTMN. vitripennis (XP_008203106.1) FFVTPILGSVSDRCRLKQGRRRPFILLLAIGVLMGLLLVPNGESMGYAFGDTR--MNFTAT. pretiosum (XP_014233934.1) FFVTPLLGSLSDRCRLKQGRRRPFIALLAIGVLMGLILVPNGEGMGYAFGDIQG— NYTA
【參考文獻(xiàn)】
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