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菰黑粉菌MAPK基因UeKpp2和UeKpp6的功能研究

發(fā)布時間:2024-06-30 13:12
  菰黑粉菌(Ustilago esculenta)是一種獨特的病原真菌,其侵染茭白植株(Zizania latifolia)后可抑制植株抽穗開花并刺激莖基部膨大形成茭白。在東亞及東南亞地區(qū)尤其是中國,茭白是一種營養(yǎng)很高的水生蔬菜,也是一種重要的藥材。前期研究發(fā)現(xiàn),菰黑粉菌是一種典型的二型態(tài)真菌,且與其他二型態(tài)真菌類似存在酵母型和菌絲型兩種型態(tài),而由酵母型向菌絲型轉(zhuǎn)換是此類真菌致病性的關(guān)鍵。另外,促分裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK)信號途徑在病原真菌中廣泛存在,其在菌株的二型態(tài)轉(zhuǎn)換及致病性過程中起重要作用,目前該途徑中對MAPK基因的研究相對較多。本研究利用菰黑粉菌基因組測序結(jié)果,結(jié)合玉米黑粉菌(Ustilago maydis)Kpp2和Kpp6的氨基酸序列,成功從菰黑粉菌中克隆并鑒定得到兩個MAPK基因UeKpp2和UeKpp6。通過熒光定量PCR、基因修飾、融合及接種實驗對UeKpp2和UeKpp6基因的表達模式和生物學(xué)功能進行了研究,并通過酵母雙雜交實驗對UeKpp2和UeKpp6可能參與的調(diào)控途徑進行了探究?寺〉玫捷院...

【文章頁數(shù)】:85 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

圖1.1玉米黑粉菌生活史[9]

圖1.1玉米黑粉菌生活史[9]

米黑粉菌同屬黑粉菌屬,推測其生活史與玉米黑粉菌相似[9](圖1.1),近期,胡鵬[10]通過單孢分離法從正常茭和灰茭中分離得到兩對性親和的菰黑粉菌單倍體菌株(UeMT10和UeMT46,UeT14和UeT55),進一步構(gòu)建了攜帶GFP的單倍體菌株,初步完善了菰黑粉菌的生活史。光學(xué)....


圖1.3部分病原真菌Fus3/Kss1信號途徑MAPK模塊

圖1.3部分病原真菌Fus3/Kss1信號途徑MAPK模塊

稻瘟菌該途徑的MAPK模塊包括Mst11(MAPKKK)、Mst7(MAPKK)、Pmk1(MAPK)(圖1.3),研究發(fā)現(xiàn)mst11、mst7突變菌株不能形成附著胞,且致病性喪失[77]。該模塊上游的一些基因也被克隆,如mst50、ras1、ras2,其中mst50....


圖2.1融合片段構(gòu)建及缺失菌株篩選的原理

圖2.1融合片段構(gòu)建及缺失菌株篩選的原理

中國計量大學(xué)碩士學(xué)位論文2μL,內(nèi)切酶22μL,質(zhì)粒約10μg,加ddH2O至50μL。37產(chǎn)物進行1.0%的瓊脂糖凝膠電泳檢測,選擇目的條帶割膠除載體的構(gòu)建菰黑粉菌基因組序列結(jié)合融合PCR的原理分別在UeKpp2閱讀框上下游各1000bp左右處....


圖2.2玉米發(fā)病程度的等級標(biāo)準(zhǔn)注:A-G分別代表Deadplants、Heavytumors、Normaltumors、Smalltumors、Ligulaswelling、Chlorosis、

圖2.2玉米發(fā)病程度的等級標(biāo)準(zhǔn)注:A-G分別代表Deadplants、Heavytumors、Normaltumors、Smalltumors、Ligulaswelling、Chlorosis、

中國計量大學(xué)碩士學(xué)位論文00大于1.0,然后分別取500μL上述的菌液至50mLYEPS液體培養(yǎng)180r/min培養(yǎng)至OD600為0.6-0.8,離心收集菌體,用水稀釋至OD600為mL的一次性注射器吸適量稀釋好的菌液分別接種30株種植7d的....



本文編號:3998782

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