發(fā)布時間：2020-11-21 14:44

　　 鐵皮石斛是我國古文獻(xiàn)中最先記載的藥用石斛蘭科植物之一,也是我國最珍稀的中藥材之一。但是長期以來,人們用此藥都是依靠采挖,野生石斛資源瀕臨滅絕,價格高漲。近年來,鐵皮石斛繁殖的技術(shù)逐步走入研究者的視野,特別是組織培養(yǎng)技術(shù),通過組培進(jìn)行快繁是一種解決鐵皮石斛資源缺乏的有效途徑。但是目前市場上很多廠家培養(yǎng)出的鐵皮石斛苗不規(guī)范,育苗質(zhì)量參差不齊,生產(chǎn)成本高,培養(yǎng)條件不優(yōu),本研究的主要目的就是在前期鐵皮石斛組培快繁基礎(chǔ)上,以種胚為原材料,對鐵皮石斛組織培養(yǎng)條件進(jìn)一步優(yōu)化,研究一次成苗技術(shù),以縮短周期,降低成本,提高芽苗增殖率和質(zhì)量,為鐵皮石斛優(yōu)良種苗工廠化生產(chǎn)提供科學(xué)依據(jù)。研究結(jié)果表明:1鐵皮石斛初代培養(yǎng)條件優(yōu)化研究。鐵皮石斛種子在組培環(huán)境下適應(yīng)性強(qiáng),對培養(yǎng)基要求不高,從萌發(fā)時間、數(shù)量、質(zhì)量看,種胚萌發(fā)較好培養(yǎng)基為MS+0.5mg·L-1NAA+15%土豆泥;鐵皮石斛種子消毒方式以75%乙醇浸泡30s+8.0%次氯酸鈉浸泡8 min效果較佳,較傳統(tǒng)升汞溶液消毒方式更具生態(tài)性和安全性。2鐵皮石斛繼代培養(yǎng)條件優(yōu)化研究。原球莖在培養(yǎng)基MS+0.2mg·L~(-1)NAA+2mg·L~(-1)6-BA上的增殖率最高,達(dá)到了98%;原球莖分化較好培養(yǎng)基為MS+0.5mg·L~(-1)NAA+10%土豆泥;原球莖增殖系數(shù)高于叢生芽增殖系數(shù),增殖速率快。原球莖在液態(tài)培育基增殖系數(shù)高于固態(tài)培育基,但是容易發(fā)生褐變。3鐵皮石斛生根壯苗培養(yǎng)條件優(yōu)化研究。生根壯苗培育基較好配比應(yīng)為MS+0.5 mg·L~(-1)NAA+0.5 mg·L~(-1)IBA+80g·L~(-1)香蕉泥;培養(yǎng)基中增添10%香蕉泥和0.5%活性炭(AC)對于幼苗壯苗生根均有促進(jìn)作用。4一次性成苗培養(yǎng)技術(shù)。一次性成苗培養(yǎng)技術(shù)集穴盤育苗和移栽馴化技術(shù)于一體,有周期短、流程簡單、成本低等特點(diǎn),穴盤液體育苗方式實(shí)現(xiàn)了傳統(tǒng)組培過程的簡化,比傳統(tǒng)培養(yǎng)周期縮短了近30d,成本降低了近10%,同時通過一次成苗技術(shù)培養(yǎng)的組培苗,移栽可以提高成活率。
【學(xué)位單位】：浙江農(nóng)林大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：S567.239
【部分圖文】：

2圖1-1鐵皮石斛喜歡在涼爽、濕度大、空氣流通的環(huán)境下生長。適合半陰半陽的環(huán)境暖和濕潤氣候，大多生長在海拔高的山地的陰濕巖石上[10]野生的鐵皮石斛基本上分布在溫度高、濕度大的熱帶、亞熱帶，如東亞、東南亞等國家和地區(qū)[12]。在我國，鐵皮石斛分布廣泛[11]，要分布于秦嶺、淮河以南的安徽西南部、浙江東部、福建西部、廣西西北部、四川、云南東南部等地區(qū)（圖1-2）海拔 1600m 的上高山峻峰、懸崖峭壁及巖石縫隙之間。近年來，浙江鐵皮石斛快速發(fā)展，資源主要分布在臨安天目山、溫州雁蕩山、金華磐安等地。而如金華東陽、永康等工業(yè)較發(fā)達(dá)縣市區(qū)鐵皮石斛研究?

鐵皮石斛種子組織培養(yǎng)條件的優(yōu)化研究5目前，鐵皮石斛組織培養(yǎng)工廠化生產(chǎn)育苗生產(chǎn)主要如圖1-3，較為繁瑣。圖1-3 組織培養(yǎng)工廠化生產(chǎn)育苗生產(chǎn)工藝流程圖Fig.1-3 Production process of tissue culture本研究主要目的就是在前人鐵皮石斛產(chǎn)業(yè)化研究的廣泛基礎(chǔ)上，進(jìn)一步通過優(yōu)化鐵皮石斛培育基、瓊脂、有機(jī)物添加物等條件，研究一次成苗技術(shù)，為減少組培程序，降低組培成本，提高鐵皮石斛組培效率，實(shí)現(xiàn)鐵皮石斛工廠化提供參考依據(jù)。1.6 研究的意義和創(chuàng)新之處植物組織培養(yǎng)技術(shù)是一項(xiàng)農(nóng)業(yè)高新技術(shù)，是發(fā)展現(xiàn)代農(nóng)業(yè)不可或缺的一部分。在地方縣級單位開展組織培養(yǎng)研究無疑對當(dāng)?shù)氐南嚓P(guān)農(nóng)業(yè)發(fā)展具有重要的意義。鐵皮石斛種子組培研究項(xiàng)目是東陽農(nóng)科所成立組培中心以來第一個項(xiàng)目，對農(nóng)科所今后組培研究具有承上啟下的作用。而鐵皮石斛種子組培條件的優(yōu)化試驗(yàn)，從小的方面來說，是對東陽農(nóng)科所前期研究又一次升華和補(bǔ)充，而對鐵皮石斛組培技術(shù)的研究領(lǐng)域上來說

處理 ① 處理 ② 處理 ③處理 ④ 處理 ⑤圖4-1 不同培養(yǎng)基下鐵皮石斛種胚萌發(fā)情況Fig.4-1 the germination of different kinds of media to the seed germination4.1.2 外植體滅菌方法篩選經(jīng)過30天培養(yǎng)，一些處理陸續(xù)出現(xiàn)污染情況，最早出現(xiàn)污染的為接種后的2天，以細(xì)菌污染為主，最晚的出現(xiàn)在接種后的10天，以真菌污染為主，而沒有污染的基本上開始膨大、變綠，萌發(fā)。還有一小部分，未出現(xiàn)污染，但也不萌發(fā)呈睡眠狀態(tài)。由表4-2見，處理2中75%乙醇浸泡30s+8.0% 次氯酸鈉浸泡8min + 無菌水沖洗5-6次的方式較佳，死亡率最低為5%，對種子質(zhì)量影響小，易萌發(fā)；處理1的操作簡單
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本文編號：2893157