茶樹(shù)萜類(lèi)前體合成途徑中關(guān)鍵酶基因的克隆和功能分析
發(fā)布時(shí)間:2024-10-05 01:20
植物萜類(lèi)代謝譜包含初生代謝物和次生代謝物,其構(gòu)成直接影響植物生長(zhǎng)發(fā)育和抗性。植物萜類(lèi)前體合成途徑結(jié)構(gòu)酶異戊烯基焦磷酸異構(gòu)酶(IPPI)、法尼基焦磷酸合酶(FPPS)和牻牛兒基牻牛兒基焦磷酸合酶(GGPPS),以小家族的形式存在,其家族成員間的分工與合作決定了萜類(lèi)前體的合成與分布,直接影響萜類(lèi)代謝譜的構(gòu)成。本文以‘龍井43’(Camellia sinensis cv.Longjing43)為材料,通過(guò)RACE-PCR和RT-PCR法克隆目的基因序列。綜合目的基因組織表達(dá)模式分析、編碼蛋白生物信息學(xué)分析以及功能互補(bǔ)實(shí)驗(yàn)分析的結(jié)果預(yù)測(cè)目的基因編碼蛋白的催化功能。主要結(jié)果如下:1.克隆得到異戊烯基焦磷酸異構(gòu)酶和異戊烯基焦磷酸合酶這2個(gè)亞家族的9個(gè)目的基因序列,包括2個(gè)IPPI基因序列、2個(gè)FPPS基因序列、5個(gè)GGPPS基因序列,其中GGPPS9基因存在3條等位基因序列(CsGGPPS9-1,Cs GGPPS9-2和CsGGPPS9-3)。2.利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)檢測(cè)目的基因組織表達(dá)模式發(fā)現(xiàn),Cs IPPI表達(dá)量較低,僅在根和成熟葉中表達(dá)量稍高,Cs FPPS在茶樹(shù)葉片中表達(dá)...
【文章頁(yè)數(shù)】:66 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
本文編號(hào):4007372
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圖1-1植物細(xì)胞中萜類(lèi)合成的三個(gè)階段
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