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茶樹萜類前體合成途徑中關(guān)鍵酶基因的克隆和功能分析

發(fā)布時間:2024-10-05 01:20
  植物萜類代謝譜包含初生代謝物和次生代謝物,其構(gòu)成直接影響植物生長發(fā)育和抗性。植物萜類前體合成途徑結(jié)構(gòu)酶異戊烯基焦磷酸異構(gòu)酶(IPPI)、法尼基焦磷酸合酶(FPPS)和牻牛兒基牻牛兒基焦磷酸合酶(GGPPS),以小家族的形式存在,其家族成員間的分工與合作決定了萜類前體的合成與分布,直接影響萜類代謝譜的構(gòu)成。本文以‘龍井43’(Camellia sinensis cv.Longjing43)為材料,通過RACE-PCR和RT-PCR法克隆目的基因序列。綜合目的基因組織表達(dá)模式分析、編碼蛋白生物信息學(xué)分析以及功能互補(bǔ)實(shí)驗(yàn)分析的結(jié)果預(yù)測目的基因編碼蛋白的催化功能。主要結(jié)果如下:1.克隆得到異戊烯基焦磷酸異構(gòu)酶和異戊烯基焦磷酸合酶這2個亞家族的9個目的基因序列,包括2個IPPI基因序列、2個FPPS基因序列、5個GGPPS基因序列,其中GGPPS9基因存在3條等位基因序列(CsGGPPS9-1,Cs GGPPS9-2和CsGGPPS9-3)。2.利用實(shí)時熒光定量PCR(qRT-PCR)檢測目的基因組織表達(dá)模式發(fā)現(xiàn),Cs IPPI表達(dá)量較低,僅在根和成熟葉中表達(dá)量稍高,Cs FPPS在茶樹葉片中表達(dá)...

【文章頁數(shù)】:66 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

圖1-1植物細(xì)胞中萜類合成的三個階段

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圖1-2研究技術(shù)路線

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圖2-1目的基因的組織表達(dá)模式(以CsGGPPS1在芽中的表達(dá)量為1計算相對表達(dá)量)

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圖3-1茶樹中目的基因編碼蛋白與其它植物中同源序列的系統(tǒng)發(fā)育學(xué)分析

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圖3-1茶樹中目的基因編碼蛋白與其它植物中同源序列的系統(tǒng)發(fā)育學(xué)分析Fig.3-1Phylogeneticassayoftargetgenescordedproteinandtheirhomologyinotherplants



本文編號:4007372

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