柑橘接穗和苗木黃龍病病原脫除方法研究
發(fā)布時間：2020-12-06 01:23
柑橘黃龍病嚴(yán)重影響柑橘產(chǎn)業(yè)的發(fā)展,目前,我國主要采用傳統(tǒng)的3種方法來對柑橘黃龍病進(jìn)行防控,如:病株的砍除、無病毒苗木的培育和應(yīng)用以及控制傳播媒介柑橘木虱。本實驗利用接穗預(yù)處理試驗,篩選了能脫除HLB病原的試劑,并利用在接穗上有一定效果的試劑再對柑橘苗木進(jìn)行脫毒試驗,結(jié)合實時熒光PCR和PCR方法,對試劑處理前后的材料進(jìn)行HLB的驗證,從而篩選出對脫除柑橘黃龍病病原有一定效果的藥劑;本試驗還對不同地方來源的材料進(jìn)行了柑橘黃龍病的分子檢測和比較分析;并對一種芽孢桿菌進(jìn)行了定殖試驗和光學(xué)顯微鏡鑒定。具體研究結(jié)果如下:1.小分子化合物處理柑橘接穗脫除柑橘黃龍病病原的試驗（1）2015年12月將29種小分子化合物對柑橘離體枝條進(jìn)行處理,對比化合物處理前和處理后黃龍病病原的q-PCR相對表達(dá)量的變化及病原脫除情況,研究發(fā)現(xiàn)化合物2,5-二溴吡啶、1,2-苯并異噻唑-3-酮、2-肼吡啶、3-（2-溴乙基）吲哚、化合物H、J、O、P、R、Z十種小分子化合物有一定的脫毒效果。（2）2016年3月再利用初步篩選出的十種小分子化合物進(jìn)行重復(fù)實驗,結(jié)果顯示:2,5-二溴吡啶、1,2-苯并異噻唑-3-酮、化合物...
【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】：65 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
接種用GJ1菌落透射電鏡觀察結(jié)果
圖 1 接種用 GJ1 菌落透射電鏡觀察結(jié)果Fig1. Observation of GJ1 by transmission electron microscopy圖 1 為接種用 GJ1 菌落經(jīng)過透射電鏡觀察的結(jié)果，它表現(xiàn)了明顯的芽特征，呈短桿狀，根據(jù)圖中比例尺的大小，粗略計算出該芽孢桿菌長 1.41寬 0.54-0.61 μm，并且呈明顯的二分裂方式。
圖 3 菌落革蘭氏染色鑒定結(jié)果A：柑橘葉片中分離出的菌落革蘭氏染色鑒定結(jié)果。B：接種用芽孢桿菌的革蘭氏染色鑒定結(jié)果。Fig3 Two kinds of colony with Gram stain method resultsA: The separation bacteria with Gram stain method.B: Known bacteria with Gram stain method.從圖 2 可以看出分離出菌落形態(tài)大小和接種用芽孢桿菌較為一致，根據(jù)圖中例尺的大小，粗略計算出該菌長 3.07 μm，寬 0.66 μm，寬度和接種用芽孢桿菌接近，但長度與接種用芽孢桿菌的兩倍長度相接近，應(yīng)該是與圖 1 相類似，兩個孢桿菌相連接。圖 2 可以看出分離出的菌落和接種用芽孢桿菌在油鏡下觀察都為色，為革蘭氏陽性菌。因此，可初步判定分離出的菌落和接種用芽孢桿菌為同一菌，即接種用芽孢桿菌已在植株中定殖。3.3 不同地區(qū)黃龍病的檢測采用常規(guī) PCR（引物 OI1/OI2c 和引物 P400+/P400-）與實時熒光 PCR 兩種方
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]球孢白僵菌與玫煙色棒束孢制劑對柑橘木虱的防治[J]. 代曉彥,李翌菡,沈祖樂,許煒明,吳建輝,任順祥,邱寶利. 華南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2017(01)
[2]世界柑橘產(chǎn)業(yè)現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢[J]. 齊樂,祁春節(jié). 農(nóng)業(yè)展望. 2016(12)
[3]柑橘黃龍病病菌FabD蛋白酶的基因克隆與表達(dá)[J]. 王俏玲,何軍,李攀,朱溫平,劉翔,李永東. 贛南師范大學(xué)學(xué)報. 2016(06)
[4]3種含氯消毒劑浸泡帶黃龍病菌蘆柑接穗的抑菌效果研究[J]. 王賢達(dá),胡菡青,林雄杰,范國成. 中國南方果樹. 2016(06)
[5]我國柑橘十二五生產(chǎn)現(xiàn)狀和十三五生產(chǎn)發(fā)展趨勢及對策[J]. 沈兆敏. 科學(xué)種養(yǎng). 2016(12)
[6]贛南臍橙柑橘黃龍病株內(nèi)生細(xì)菌群落多樣性研究[J]. 金丹鳳,熊大維,黃國昌,顧斌濤,黃筱萍,劉蘭. 江西科學(xué). 2016(04)
[7]草莓莖尖組織培養(yǎng)和快繁體系的建立[J]. 李曉亮,張軍云,張鐘,張翠萍,楊世先,王文智,張建康,段永華. 作物雜志. 2016(04)
[8]柑桔黃龍病研究進(jìn)展與防控對策[J]. 邱卓榮. 韶關(guān)學(xué)院學(xué)報. 2016(06)
[9]車前草內(nèi)生真菌的分離及抑菌活性測定[J]. 柴明艷. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué). 2016(01)
[10]產(chǎn)L-酪氨酸花椒內(nèi)生菌的分離鑒定[J]. 陳沖,李霄潔,趙志峰,何強(qiáng),鐘凱,呂遠(yuǎn)平,高鴻. 現(xiàn)代食品科技. 2016(02)
碩士論文
[1]柑橘黃龍病高光譜快速無損診斷方法[D]. 鄧清.華東交通大學(xué) 2016
[2]柑橘成年態(tài)組織培養(yǎng)及脫毒方法的研究[D]. 隆雨薇.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[3]柑橘黃龍病PCR檢測引物比較及其外膜蛋白抗體的研制[D]. 高玉霞.贛南師范學(xué)院 2015
[4]柑橘黃龍病防控藥劑篩選及防控技術(shù)研究[D]. 陳仕欽.重慶大學(xué) 2013
[5]兩株植物內(nèi)生菌對油菜菌核病的防治研究[D]. 陳亞菲.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2013
[6]柑橘黃龍病寄主植物內(nèi)生細(xì)菌多樣性分析及相關(guān)性研究[D]. 李佳.重慶大學(xué) 2012
[7]香蕉內(nèi)生菌的分離、純化及其防控香蕉枯萎病的初步研究[D]. 汪騰.海南大學(xué) 2011
[8]云南煙草內(nèi)生真菌生物多樣性初步研究[D]. 韓偉.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2004
本文編號：2900451
【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校
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【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
接種用GJ1菌落透射電鏡觀察結(jié)果
圖 1 接種用 GJ1 菌落透射電鏡觀察結(jié)果Fig1. Observation of GJ1 by transmission electron microscopy圖 1 為接種用 GJ1 菌落經(jīng)過透射電鏡觀察的結(jié)果，它表現(xiàn)了明顯的芽特征，呈短桿狀，根據(jù)圖中比例尺的大小，粗略計算出該芽孢桿菌長 1.41寬 0.54-0.61 μm，并且呈明顯的二分裂方式。
圖 3 菌落革蘭氏染色鑒定結(jié)果A：柑橘葉片中分離出的菌落革蘭氏染色鑒定結(jié)果。B：接種用芽孢桿菌的革蘭氏染色鑒定結(jié)果。Fig3 Two kinds of colony with Gram stain method resultsA: The separation bacteria with Gram stain method.B: Known bacteria with Gram stain method.從圖 2 可以看出分離出菌落形態(tài)大小和接種用芽孢桿菌較為一致，根據(jù)圖中例尺的大小，粗略計算出該菌長 3.07 μm，寬 0.66 μm，寬度和接種用芽孢桿菌接近，但長度與接種用芽孢桿菌的兩倍長度相接近，應(yīng)該是與圖 1 相類似，兩個孢桿菌相連接。圖 2 可以看出分離出的菌落和接種用芽孢桿菌在油鏡下觀察都為色，為革蘭氏陽性菌。因此，可初步判定分離出的菌落和接種用芽孢桿菌為同一菌，即接種用芽孢桿菌已在植株中定殖。3.3 不同地區(qū)黃龍病的檢測采用常規(guī) PCR（引物 OI1/OI2c 和引物 P400+/P400-）與實時熒光 PCR 兩種方
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]球孢白僵菌與玫煙色棒束孢制劑對柑橘木虱的防治[J]. 代曉彥,李翌菡,沈祖樂,許煒明,吳建輝,任順祥,邱寶利. 華南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2017(01)
[2]世界柑橘產(chǎn)業(yè)現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢[J]. 齊樂,祁春節(jié). 農(nóng)業(yè)展望. 2016(12)
[3]柑橘黃龍病病菌FabD蛋白酶的基因克隆與表達(dá)[J]. 王俏玲,何軍,李攀,朱溫平,劉翔,李永東. 贛南師范大學(xué)學(xué)報. 2016(06)
[4]3種含氯消毒劑浸泡帶黃龍病菌蘆柑接穗的抑菌效果研究[J]. 王賢達(dá),胡菡青,林雄杰,范國成. 中國南方果樹. 2016(06)
[5]我國柑橘十二五生產(chǎn)現(xiàn)狀和十三五生產(chǎn)發(fā)展趨勢及對策[J]. 沈兆敏. 科學(xué)種養(yǎng). 2016(12)
[6]贛南臍橙柑橘黃龍病株內(nèi)生細(xì)菌群落多樣性研究[J]. 金丹鳳,熊大維,黃國昌,顧斌濤,黃筱萍,劉蘭. 江西科學(xué). 2016(04)
[7]草莓莖尖組織培養(yǎng)和快繁體系的建立[J]. 李曉亮,張軍云,張鐘,張翠萍,楊世先,王文智,張建康,段永華. 作物雜志. 2016(04)
[8]柑桔黃龍病研究進(jìn)展與防控對策[J]. 邱卓榮. 韶關(guān)學(xué)院學(xué)報. 2016(06)
[9]車前草內(nèi)生真菌的分離及抑菌活性測定[J]. 柴明艷. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué). 2016(01)
[10]產(chǎn)L-酪氨酸花椒內(nèi)生菌的分離鑒定[J]. 陳沖,李霄潔,趙志峰,何強(qiáng),鐘凱,呂遠(yuǎn)平,高鴻. 現(xiàn)代食品科技. 2016(02)
碩士論文
[1]柑橘黃龍病高光譜快速無損診斷方法[D]. 鄧清.華東交通大學(xué) 2016
[2]柑橘成年態(tài)組織培養(yǎng)及脫毒方法的研究[D]. 隆雨薇.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[3]柑橘黃龍病PCR檢測引物比較及其外膜蛋白抗體的研制[D]. 高玉霞.贛南師范學(xué)院 2015
[4]柑橘黃龍病防控藥劑篩選及防控技術(shù)研究[D]. 陳仕欽.重慶大學(xué) 2013
[5]兩株植物內(nèi)生菌對油菜菌核病的防治研究[D]. 陳亞菲.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2013
[6]柑橘黃龍病寄主植物內(nèi)生細(xì)菌多樣性分析及相關(guān)性研究[D]. 李佳.重慶大學(xué) 2012
[7]香蕉內(nèi)生菌的分離、純化及其防控香蕉枯萎病的初步研究[D]. 汪騰.海南大學(xué) 2011
[8]云南煙草內(nèi)生真菌生物多樣性初步研究[D]. 韓偉.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2004
本文編號：2900451
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