柑橘接穗和苗木黃龍病病原脫除方法研究
發(fā)布時間：2020-12-06 01:23
柑橘黃龍病嚴重影響柑橘產(chǎn)業(yè)的發(fā)展,目前,我國主要采用傳統(tǒng)的3種方法來對柑橘黃龍病進行防控,如:病株的砍除、無病毒苗木的培育和應(yīng)用以及控制傳播媒介柑橘木虱。本實驗利用接穗預(yù)處理試驗,篩選了能脫除HLB病原的試劑,并利用在接穗上有一定效果的試劑再對柑橘苗木進行脫毒試驗,結(jié)合實時熒光PCR和PCR方法,對試劑處理前后的材料進行HLB的驗證,從而篩選出對脫除柑橘黃龍病病原有一定效果的藥劑;本試驗還對不同地方來源的材料進行了柑橘黃龍病的分子檢測和比較分析;并對一種芽孢桿菌進行了定殖試驗和光學顯微鏡鑒定。具體研究結(jié)果如下:1.小分子化合物處理柑橘接穗脫除柑橘黃龍病病原的試驗（1）2015年12月將29種小分子化合物對柑橘離體枝條進行處理,對比化合物處理前和處理后黃龍病病原的q-PCR相對表達量的變化及病原脫除情況,研究發(fā)現(xiàn)化合物2,5-二溴吡啶、1,2-苯并異噻唑-3-酮、2-肼吡啶、3-（2-溴乙基）吲哚、化合物H、J、O、P、R、Z十種小分子化合物有一定的脫毒效果。（2）2016年3月再利用初步篩選出的十種小分子化合物進行重復(fù)實驗,結(jié)果顯示:2,5-二溴吡啶、1,2-苯并異噻唑-3-酮、化合物...
【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學湖北省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】：65 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
接種用GJ1菌落透射電鏡觀察結(jié)果
圖 1 接種用 GJ1 菌落透射電鏡觀察結(jié)果Fig1. Observation of GJ1 by transmission electron microscopy圖 1 為接種用 GJ1 菌落經(jīng)過透射電鏡觀察的結(jié)果，它表現(xiàn)了明顯的芽特征，呈短桿狀，根據(jù)圖中比例尺的大小，粗略計算出該芽孢桿菌長 1.41寬 0.54-0.61 μm，并且呈明顯的二分裂方式。
圖 3 菌落革蘭氏染色鑒定結(jié)果A：柑橘葉片中分離出的菌落革蘭氏染色鑒定結(jié)果。B：接種用芽孢桿菌的革蘭氏染色鑒定結(jié)果。Fig3 Two kinds of colony with Gram stain method resultsA: The separation bacteria with Gram stain method.B: Known bacteria with Gram stain method.從圖 2 可以看出分離出菌落形態(tài)大小和接種用芽孢桿菌較為一致，根據(jù)圖中例尺的大小，粗略計算出該菌長 3.07 μm，寬 0.66 μm，寬度和接種用芽孢桿菌接近，但長度與接種用芽孢桿菌的兩倍長度相接近，應(yīng)該是與圖 1 相類似，兩個孢桿菌相連接。圖 2 可以看出分離出的菌落和接種用芽孢桿菌在油鏡下觀察都為色，為革蘭氏陽性菌。因此，可初步判定分離出的菌落和接種用芽孢桿菌為同一菌，即接種用芽孢桿菌已在植株中定殖。3.3 不同地區(qū)黃龍病的檢測采用常規(guī) PCR（引物 OI1/OI2c 和引物 P400+/P400-）與實時熒光 PCR 兩種方
【參考文獻】：
期刊論文
[1]球孢白僵菌與玫煙色棒束孢制劑對柑橘木虱的防治[J]. 代曉彥,李翌菡,沈祖樂,許煒明,吳建輝,任順祥,邱寶利. 華南農(nóng)業(yè)大學學報. 2017(01)
[2]世界柑橘產(chǎn)業(yè)現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢[J]. 齊樂,祁春節(jié). 農(nóng)業(yè)展望. 2016(12)
[3]柑橘黃龍病病菌FabD蛋白酶的基因克隆與表達[J]. 王俏玲,何軍,李攀,朱溫平,劉翔,李永東. 贛南師范大學學報. 2016(06)
[4]3種含氯消毒劑浸泡帶黃龍病菌蘆柑接穗的抑菌效果研究[J]. 王賢達,胡菡青,林雄杰,范國成. 中國南方果樹. 2016(06)
[5]我國柑橘十二五生產(chǎn)現(xiàn)狀和十三五生產(chǎn)發(fā)展趨勢及對策[J]. 沈兆敏. 科學種養(yǎng). 2016(12)
[6]贛南臍橙柑橘黃龍病株內(nèi)生細菌群落多樣性研究[J]. 金丹鳳,熊大維,黃國昌,顧斌濤,黃筱萍,劉蘭. 江西科學. 2016(04)
[7]草莓莖尖組織培養(yǎng)和快繁體系的建立[J]. 李曉亮,張軍云,張鐘,張翠萍,楊世先,王文智,張建康,段永華. 作物雜志. 2016(04)
[8]柑桔黃龍病研究進展與防控對策[J]. 邱卓榮. 韶關(guān)學院學報. 2016(06)
[9]車前草內(nèi)生真菌的分離及抑菌活性測定[J]. 柴明艷. 江蘇農(nóng)業(yè)科學. 2016(01)
[10]產(chǎn)L-酪氨酸花椒內(nèi)生菌的分離鑒定[J]. 陳沖,李霄潔,趙志峰,何強,鐘凱,呂遠平,高鴻. 現(xiàn)代食品科技. 2016(02)
碩士論文
[1]柑橘黃龍病高光譜快速無損診斷方法[D]. 鄧清.華東交通大學 2016
[2]柑橘成年態(tài)組織培養(yǎng)及脫毒方法的研究[D]. 隆雨薇.華中農(nóng)業(yè)大學 2015
[3]柑橘黃龍病PCR檢測引物比較及其外膜蛋白抗體的研制[D]. 高玉霞.贛南師范學院 2015
[4]柑橘黃龍病防控藥劑篩選及防控技術(shù)研究[D]. 陳仕欽.重慶大學 2013
[5]兩株植物內(nèi)生菌對油菜菌核病的防治研究[D]. 陳亞菲.西北農(nóng)林科技大學 2013
[6]柑橘黃龍病寄主植物內(nèi)生細菌多樣性分析及相關(guān)性研究[D]. 李佳.重慶大學 2012
[7]香蕉內(nèi)生菌的分離、純化及其防控香蕉枯萎病的初步研究[D]. 汪騰.海南大學 2011
[8]云南煙草內(nèi)生真菌生物多樣性初步研究[D]. 韓偉.山東農(nóng)業(yè)大學 2004
本文編號：2900451
【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學湖北省 211工程院校 教育部直屬院校
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【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
接種用GJ1菌落透射電鏡觀察結(jié)果
圖 1 接種用 GJ1 菌落透射電鏡觀察結(jié)果Fig1. Observation of GJ1 by transmission electron microscopy圖 1 為接種用 GJ1 菌落經(jīng)過透射電鏡觀察的結(jié)果，它表現(xiàn)了明顯的芽特征，呈短桿狀，根據(jù)圖中比例尺的大小，粗略計算出該芽孢桿菌長 1.41寬 0.54-0.61 μm，并且呈明顯的二分裂方式。
圖 3 菌落革蘭氏染色鑒定結(jié)果A：柑橘葉片中分離出的菌落革蘭氏染色鑒定結(jié)果。B：接種用芽孢桿菌的革蘭氏染色鑒定結(jié)果。Fig3 Two kinds of colony with Gram stain method resultsA: The separation bacteria with Gram stain method.B: Known bacteria with Gram stain method.從圖 2 可以看出分離出菌落形態(tài)大小和接種用芽孢桿菌較為一致，根據(jù)圖中例尺的大小，粗略計算出該菌長 3.07 μm，寬 0.66 μm，寬度和接種用芽孢桿菌接近，但長度與接種用芽孢桿菌的兩倍長度相接近，應(yīng)該是與圖 1 相類似，兩個孢桿菌相連接。圖 2 可以看出分離出的菌落和接種用芽孢桿菌在油鏡下觀察都為色，為革蘭氏陽性菌。因此，可初步判定分離出的菌落和接種用芽孢桿菌為同一菌，即接種用芽孢桿菌已在植株中定殖。3.3 不同地區(qū)黃龍病的檢測采用常規(guī) PCR（引物 OI1/OI2c 和引物 P400+/P400-）與實時熒光 PCR 兩種方
【參考文獻】：
期刊論文
[1]球孢白僵菌與玫煙色棒束孢制劑對柑橘木虱的防治[J]. 代曉彥,李翌菡,沈祖樂,許煒明,吳建輝,任順祥,邱寶利. 華南農(nóng)業(yè)大學學報. 2017(01)
[2]世界柑橘產(chǎn)業(yè)現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢[J]. 齊樂,祁春節(jié). 農(nóng)業(yè)展望. 2016(12)
[3]柑橘黃龍病病菌FabD蛋白酶的基因克隆與表達[J]. 王俏玲,何軍,李攀,朱溫平,劉翔,李永東. 贛南師范大學學報. 2016(06)
[4]3種含氯消毒劑浸泡帶黃龍病菌蘆柑接穗的抑菌效果研究[J]. 王賢達,胡菡青,林雄杰,范國成. 中國南方果樹. 2016(06)
[5]我國柑橘十二五生產(chǎn)現(xiàn)狀和十三五生產(chǎn)發(fā)展趨勢及對策[J]. 沈兆敏. 科學種養(yǎng). 2016(12)
[6]贛南臍橙柑橘黃龍病株內(nèi)生細菌群落多樣性研究[J]. 金丹鳳,熊大維,黃國昌,顧斌濤,黃筱萍,劉蘭. 江西科學. 2016(04)
[7]草莓莖尖組織培養(yǎng)和快繁體系的建立[J]. 李曉亮,張軍云,張鐘,張翠萍,楊世先,王文智,張建康,段永華. 作物雜志. 2016(04)
[8]柑桔黃龍病研究進展與防控對策[J]. 邱卓榮. 韶關(guān)學院學報. 2016(06)
[9]車前草內(nèi)生真菌的分離及抑菌活性測定[J]. 柴明艷. 江蘇農(nóng)業(yè)科學. 2016(01)
[10]產(chǎn)L-酪氨酸花椒內(nèi)生菌的分離鑒定[J]. 陳沖,李霄潔,趙志峰,何強,鐘凱,呂遠平,高鴻. 現(xiàn)代食品科技. 2016(02)
碩士論文
[1]柑橘黃龍病高光譜快速無損診斷方法[D]. 鄧清.華東交通大學 2016
[2]柑橘成年態(tài)組織培養(yǎng)及脫毒方法的研究[D]. 隆雨薇.華中農(nóng)業(yè)大學 2015
[3]柑橘黃龍病PCR檢測引物比較及其外膜蛋白抗體的研制[D]. 高玉霞.贛南師范學院 2015
[4]柑橘黃龍病防控藥劑篩選及防控技術(shù)研究[D]. 陳仕欽.重慶大學 2013
[5]兩株植物內(nèi)生菌對油菜菌核病的防治研究[D]. 陳亞菲.西北農(nóng)林科技大學 2013
[6]柑橘黃龍病寄主植物內(nèi)生細菌多樣性分析及相關(guān)性研究[D]. 李佳.重慶大學 2012
[7]香蕉內(nèi)生菌的分離、純化及其防控香蕉枯萎病的初步研究[D]. 汪騰.海南大學 2011
[8]云南煙草內(nèi)生真菌生物多樣性初步研究[D]. 韓偉.山東農(nóng)業(yè)大學 2004
本文編號：2900451
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