轉(zhuǎn)錄因子CsMYB21與CsMYB77在柑橘果實成熟過程中的功能解析
發(fā)布時間：2020-12-15 20:57
我國生產(chǎn)供應的鮮食柑橘種類主要為中熟,其熟期布局嚴重不均衡。分散品種熟期布局,擴大果品供給期,是柑橘產(chǎn)業(yè)發(fā)展的關鍵。此前,關于影響柑橘熟期的糖酸合成分解途徑、類胡蘿卜合成分解途徑等已有較深入的研究,但關于影響其成熟的基因的功能探討仍較少。探究影響柑橘果實成熟的基因的表達與調(diào)控,有利于進一步挖掘其成熟過程在分子水平的機理,對調(diào)整柑橘果實熟期有重大的作用。本實驗以2個柑橘果實熟期相關基因Cs MYB21與Cs MYB77為對象,以‘奉節(jié)72-1’（WT）臍橙與其晚熟芽變‘奉節(jié)晚橙’（MT）為試材,通過轉(zhuǎn)化Mic-Tom番茄,初步確定了基因Cs MYB21與Cs MYB77的功能。主要研究結(jié)果如下:1、基因克隆與生物信息學分析:分別克隆2個轉(zhuǎn)錄因子在WT和MT中的基因全長與啟動子片段,且分析了其啟動子區(qū)順式作用結(jié)合元件。利用Clustalx 1.81和Mega 5.1軟件對2個基因氨基酸序列和擬南芥、番茄中MYB（v-myb avian myeloblastosis viral oncogene homolog）家族進行進化樹分析,發(fā)現(xiàn)Cs2g27940與番茄Solyc02g067760.2...
【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學湖北省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】：65 頁
【學位級別】：碩士
【圖文】：
技術路線圖
42℃ 1 h，95℃ 5 min。反應結(jié)束后放在冰上待用，或-80表 2-4 反轉(zhuǎn)錄Table 2-4 Reverse Transcription組分 component 用量 volume（μl）5×Prime Script II 4RNase Inhibitor 0.5Prime Script II RTase 1RNAse Free H2O up to 20子克隆據(jù)庫中下載 2 個轉(zhuǎn)錄因子 CsMYB21、CsMYB77 的序列信息計引物，并依據(jù) L101YFP 載體的多克隆位點在正反方向引物酶切位點，擴增該基因全長 ORF （open reading frame，開放閱及引物序列如下：
（例：150 μl 懸浮液+2850 μl 清洗液），添加至 8 ml，并添加 8 μl 乙酰丁香酮（長勢一致且無病害煙草進行注射，每株進行熒光觀測。體構(gòu)建異性引物，并依據(jù) pGBKT7 載體序列HI 的酶切位點，擴增基因全長 CDS 區(qū)域體構(gòu)建方法參照 2.2.2 部分）。載體圖
【參考文獻】：
期刊論文
[1]論我國“十三五”柑橘產(chǎn)業(yè)的發(fā)展[J]. 沈兆敏. 果農(nóng)之友. 2016(11)
[2]Molecular cloning,identification,and chromosomal localization of two MADS box genes in peach (Prunus persica)[J]. Lin Zhang a,b,Yong Xu b,Rongcai Ma a,b,a College of Life Science,Capital Normal University,Beijing 100037,China b Beijing Agro-Biotechnology Research Center,Beijing Academy of Agriculture and Forestry Sciences,Beijing 100097,China. 遺傳學報. 2008(06)
[3]世界柑橘品種改良的進展[J]. 鄧秀新. 園藝學報. 2005(06)
[4]柑桔品種改良進展及對我國柑桔品種結(jié)構(gòu)調(diào)整的建議[J]. 陳竹生. 中國南方果樹. 2005(02)
[5]農(nóng)桿菌介導的番茄遺傳轉(zhuǎn)化研究進展[J]. 梁美霞,劉守偉,李景富. 東北農(nóng)業(yè)大學學報. 2004(02)
[6]柑桔種子貯藏蛋白基因部分序列的克隆[J]. 霍靜,林忠平,胡鳶蕾,高峰. 西南師范大學學報(自然科學版). 2003(06)
[7]柑橘果實發(fā)育過程中有機酸含量及相關代謝酶活性的變化[J]. 羅安才,楊曉紅,鄧英毅,李純凡,向可術,李道高. 中國農(nóng)業(yè)科學. 2003(08)
[8]紅肉臍橙果肉中主要色素的定性及色素含量的變化[J]. 徐娟,鄧秀新. 園藝學報. 2002(03)
[9]中國柑橘及其產(chǎn)品進出口現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢[J]. 鄧秀新. 世界農(nóng)業(yè). 2001(10)
[10]臍橙果實發(fā)育中有機酸合成代謝酶活性變化的研究[J]. 文濤,熊慶娥,曾偉光,劉遠鵬. 四川農(nóng)業(yè)大學學報. 2001(01)
博士論文
[1]基于組學的奉節(jié)晚橙晚熟變異分子機理研究[D]. 吳巨勛.華中農(nóng)業(yè)大學 2015
[2]番茄果實成熟相關轉(zhuǎn)錄因子RIN功能及其對MicroRNA表達調(diào)控研究[D]. 高超.中國農(nóng)業(yè)大學 2014
[3]番茄果實特異啟動子在柑橘中的活性分析及柑橘果實差異表達基因的分離[D]. 張嵐嵐.浙江大學 2007
[4]臍橙（Citrus sinensis Osbeck）晚熟芽變性狀形成機理研究[D]. 劉永忠.華中農(nóng)業(yè)大學 2006
碩士論文
[1]奉節(jié)72-1及其晚熟芽變果實檸檬酸代謝相關基因表達分析及轉(zhuǎn)錄因子CsDREB26、CsESE3和CsbZIP9功能驗證[D]. 付莉莉.華中農(nóng)業(yè)大學 2016
[2]不同產(chǎn)區(qū)琯溪蜜柚的品質(zhì)分析及克里曼丁橘有性雜交后代的雜種鑒定[D]. 張琳.華中農(nóng)業(yè)大學 2015
本文編號：2918894
【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學湖北省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】：65 頁
【學位級別】：碩士
【圖文】：
技術路線圖
42℃ 1 h，95℃ 5 min。反應結(jié)束后放在冰上待用，或-80表 2-4 反轉(zhuǎn)錄Table 2-4 Reverse Transcription組分 component 用量 volume（μl）5×Prime Script II 4RNase Inhibitor 0.5Prime Script II RTase 1RNAse Free H2O up to 20子克隆據(jù)庫中下載 2 個轉(zhuǎn)錄因子 CsMYB21、CsMYB77 的序列信息計引物，并依據(jù) L101YFP 載體的多克隆位點在正反方向引物酶切位點，擴增該基因全長 ORF （open reading frame，開放閱及引物序列如下：
（例：150 μl 懸浮液+2850 μl 清洗液），添加至 8 ml，并添加 8 μl 乙酰丁香酮（長勢一致且無病害煙草進行注射，每株進行熒光觀測。體構(gòu)建異性引物，并依據(jù) pGBKT7 載體序列HI 的酶切位點，擴增基因全長 CDS 區(qū)域體構(gòu)建方法參照 2.2.2 部分）。載體圖
【參考文獻】：
期刊論文
[1]論我國“十三五”柑橘產(chǎn)業(yè)的發(fā)展[J]. 沈兆敏. 果農(nóng)之友. 2016(11)
[2]Molecular cloning,identification,and chromosomal localization of two MADS box genes in peach (Prunus persica)[J]. Lin Zhang a,b,Yong Xu b,Rongcai Ma a,b,a College of Life Science,Capital Normal University,Beijing 100037,China b Beijing Agro-Biotechnology Research Center,Beijing Academy of Agriculture and Forestry Sciences,Beijing 100097,China. 遺傳學報. 2008(06)
[3]世界柑橘品種改良的進展[J]. 鄧秀新. 園藝學報. 2005(06)
[4]柑桔品種改良進展及對我國柑桔品種結(jié)構(gòu)調(diào)整的建議[J]. 陳竹生. 中國南方果樹. 2005(02)
[5]農(nóng)桿菌介導的番茄遺傳轉(zhuǎn)化研究進展[J]. 梁美霞,劉守偉,李景富. 東北農(nóng)業(yè)大學學報. 2004(02)
[6]柑桔種子貯藏蛋白基因部分序列的克隆[J]. 霍靜,林忠平,胡鳶蕾,高峰. 西南師范大學學報(自然科學版). 2003(06)
[7]柑橘果實發(fā)育過程中有機酸含量及相關代謝酶活性的變化[J]. 羅安才,楊曉紅,鄧英毅,李純凡,向可術,李道高. 中國農(nóng)業(yè)科學. 2003(08)
[8]紅肉臍橙果肉中主要色素的定性及色素含量的變化[J]. 徐娟,鄧秀新. 園藝學報. 2002(03)
[9]中國柑橘及其產(chǎn)品進出口現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢[J]. 鄧秀新. 世界農(nóng)業(yè). 2001(10)
[10]臍橙果實發(fā)育中有機酸合成代謝酶活性變化的研究[J]. 文濤,熊慶娥,曾偉光,劉遠鵬. 四川農(nóng)業(yè)大學學報. 2001(01)
博士論文
[1]基于組學的奉節(jié)晚橙晚熟變異分子機理研究[D]. 吳巨勛.華中農(nóng)業(yè)大學 2015
[2]番茄果實成熟相關轉(zhuǎn)錄因子RIN功能及其對MicroRNA表達調(diào)控研究[D]. 高超.中國農(nóng)業(yè)大學 2014
[3]番茄果實特異啟動子在柑橘中的活性分析及柑橘果實差異表達基因的分離[D]. 張嵐嵐.浙江大學 2007
[4]臍橙（Citrus sinensis Osbeck）晚熟芽變性狀形成機理研究[D]. 劉永忠.華中農(nóng)業(yè)大學 2006
碩士論文
[1]奉節(jié)72-1及其晚熟芽變果實檸檬酸代謝相關基因表達分析及轉(zhuǎn)錄因子CsDREB26、CsESE3和CsbZIP9功能驗證[D]. 付莉莉.華中農(nóng)業(yè)大學 2016
[2]不同產(chǎn)區(qū)琯溪蜜柚的品質(zhì)分析及克里曼丁橘有性雜交后代的雜種鑒定[D]. 張琳.華中農(nóng)業(yè)大學 2015
本文編號：2918894
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