發(fā)布時(shí)間：2020-12-29 03:17

　　目前許多研究發(fā)現(xiàn)多種微生物在模擬微重力環(huán)境下的生理代謝和基因表達(dá)都發(fā)生了很大的變化。畢赤酵母因其對(duì)外源蛋白質(zhì)經(jīng)濟(jì)高效的表達(dá),是目前最引起關(guān)注的真核表達(dá)系統(tǒng)之一。本論文研究組成型重組畢赤酵母在模擬微重力(SMG)環(huán)境下單批次培養(yǎng)及長(zhǎng)期繼代培養(yǎng)過程中外源蛋白質(zhì)表達(dá)特點(diǎn);通過差異蛋白質(zhì)組學(xué)研究誘導(dǎo)型重組畢赤酵母在SMG環(huán)境下促進(jìn)外源蛋白質(zhì)表達(dá)的關(guān)鍵代謝通路;對(duì)蛋白質(zhì)組學(xué)和前期獲得的轉(zhuǎn)錄組學(xué)數(shù)據(jù)挖掘,通過共表達(dá)方法篩選可促進(jìn)外源蛋白質(zhì)表達(dá)的功能基因;研究不同類型功能基因共表達(dá)方式與底盤酵母細(xì)胞適配性。主要結(jié)果有:(1)組成型畢赤酵母在SMG環(huán)境單批次培養(yǎng)及長(zhǎng)期繼代培養(yǎng)過程中:反應(yīng)器較高轉(zhuǎn)速所創(chuàng)造的SMG環(huán)境有利于酵母細(xì)胞增殖,促進(jìn)外源蛋白質(zhì)表達(dá);SMG環(huán)境發(fā)酵液維持低pH,有利于外源蛋白質(zhì)積累;SMG環(huán)境對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生氧化脅迫,參與氧化脅迫應(yīng)答的基因過表達(dá),輔助蛋白質(zhì)正確折疊。(2)差異蛋白質(zhì)組學(xué)分析SMG環(huán)境下誘導(dǎo)型畢赤酵母外源蛋白質(zhì)表達(dá)過程中代謝機(jī)制,發(fā)現(xiàn)甲醇代謝和糖類代謝、氧化脅迫應(yīng)答、翻譯和折疊及其他代謝途徑的蛋白質(zhì)過表達(dá)可以復(fù)制蛋白質(zhì)正確折疊。其中參與氧化脅迫應(yīng)答的相關(guān)蛋白起重要作用。(... 

【文章來(lái)源】：北京理工大學(xué)北京市 211工程院校 985工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：127 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

AOX1啟動(dòng)子部分順式作用元件

北京理工大學(xué)博士學(xué)位論文P1p 調(diào)控生物素代謝[26]。設(shè)計(jì)轉(zhuǎn)錄因子及其作用元件個(gè)基因，提高外源蛋白質(zhì)產(chǎn)量。過表達(dá)轉(zhuǎn)錄因子 HAC1p畢赤酵母中的表達(dá)[36]。過表達(dá)調(diào)控基因翻譯的轉(zhuǎn)錄因子達(dá)[37]。轉(zhuǎn)錄因子 AFT1p 激活鐵轉(zhuǎn)運(yùn)途徑基因，過表達(dá)產(chǎn)量[38]。

圖 1-3 旋轉(zhuǎn)細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)（RCCS）示意圖[102]ll culture system. A, HARV system used to generate SMG cond HARV vessel. C, Orientation of HARV system to generate SM

【參考文獻(xiàn)】：
博士論文
[1]糖基化對(duì)β-D-葡萄糖醛酸苷酶催化特性及構(gòu)象的影響[D]. 鄒樹平.天津大學(xué) 2010

碩士論文
[1]β-D-葡萄糖醛酸苷酶催化多樣性及定向合成GAMG的酶基因克隆與表達(dá)[D]. 王小艷.石河子大學(xué) 2007



本文編號(hào)：2944901