水蛭促進(jìn)大鼠坐骨神經(jīng)損傷修復(fù)的分子機制的實驗研究
本文關(guān)鍵詞: 水蛭 坐骨神經(jīng) 修復(fù) 分子機制 出處:《南京中醫(yī)藥大學(xué)》2017年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文
【摘要】:周圍神經(jīng)損傷是臨床常見的創(chuàng)傷性疾病,盡管由于顯微外科的飛速發(fā)展,神經(jīng)修復(fù)后功能恢復(fù)有所改善,但實際療效仍難以達(dá)到理想水平。為了更好、更快的促進(jìn)神經(jīng)的恢復(fù)與再生,廣大學(xué)者對此開展了大量的基礎(chǔ)研究和臨床應(yīng)用研究。目前臨床使用較多的以西藥為主,這些常用藥物的療效有限,并且價格昂貴,經(jīng)濟負(fù)擔(dān)沉重。因此,發(fā)揮中醫(yī)中藥的優(yōu)勢,運用中西醫(yī)結(jié)合手段,探求高效低毒的修復(fù)神經(jīng)損傷的藥物,并闡明其分子機理,對于臨床治療有積極的意義。本實驗主要研究水蛭作用于受損周圍神經(jīng)修復(fù)的分子機制,尤其是對神經(jīng)生長因子、腦源性神經(jīng)影響因子、神經(jīng)生長相關(guān)蛋白等相關(guān)基因表達(dá)的定性、定量研究。目的模擬大鼠坐骨神經(jīng)損傷模型,通過水蛭制劑灌胃治療后,觀察大鼠神經(jīng)恢復(fù)的情況,同時測定細(xì)胞凋亡及神經(jīng)生長因子、腦源性神經(jīng)影響因子、神經(jīng)生長相關(guān)蛋白等相關(guān)基因的表達(dá)情況。方法選取雄性SD大鼠100只,制備大鼠左側(cè)坐骨神經(jīng)損傷模型,隨機分為4組,即水蛭組、彌可保組、生理鹽水陰性對照組和空白對照組。水蛭組、彌可保組、生理鹽水組術(shù)后預(yù)防感染3天,第4天起分別予以水蛭水煎液、彌可保片水溶解液和生理鹽水灌胃。術(shù)后第4、8周,在電鏡下觀察神經(jīng)組織損傷部位的恢復(fù)情況,并采取TUNEL法檢測L5背根神經(jīng)節(jié)的細(xì)胞凋亡情況,同時應(yīng)用免疫組化法檢測NGF、BDNF、GAP-43的相關(guān)蛋白的表達(dá)。結(jié)果水蛭組坐骨神經(jīng)組織恢復(fù)情況較好,并且其NGF、BDNF、GAP-43的表達(dá)分別優(yōu)于對照組,而凋亡細(xì)胞的數(shù)量少于對照組,有統(tǒng)計學(xué)意義差異。結(jié)論水蛭可能通過促進(jìn)NGF、BDNF、GAP-43等神經(jīng)生長修復(fù)相關(guān)經(jīng)生長修復(fù)相關(guān)因子的表達(dá),抑制細(xì)胞凋亡,從而對大鼠坐骨神經(jīng)損傷發(fā)揮保護(hù)作用。
[Abstract]:Peripheral nerve injury is a common traumatic disease in clinic. Although the functional recovery after nerve repair has been improved due to the rapid development of microsurgery, the actual curative effect is still difficult to reach the ideal level. More rapid promotion of nerve recovery and regeneration, the majority of scholars have carried out a large number of basic research and clinical application research. At present, most of the clinical use of Western medicine, these commonly used drugs have limited efficacy. And expensive, heavy economic burden. Therefore, give play to the advantages of traditional Chinese medicine, the use of integrated traditional Chinese and Western medicine, explore the high efficiency and low toxicity of nerve repair drugs, and clarify its molecular mechanism. This experiment mainly studies the molecular mechanism of leech acting on the repair of injured peripheral nerve, especially on nerve growth factor and brain-derived neurogenic factor. Objective to simulate the rat model of sciatic nerve injury and observe the recovery of nerve after oral administration of leech preparation. Apoptosis and nerve growth factor (NGF), brain-derived neurotrophic factor (BDNF), nerve growth associated protein (NGP) and other related genes were determined. Methods 100 male SD rats were selected. The model of left sciatic nerve injury in rats was established and randomly divided into 4 groups: leech group, mycopol group, normal saline negative control group and blank control group. The rats in the saline group were treated with leech decoction, water soluble solution and normal saline solution respectively from the 4th day after operation, and the rats in the saline group were given intragastric administration for 4 weeks after operation. The recovery of injured nerve tissue was observed under electron microscope, the apoptosis of L5 dorsal root ganglion was detected by TUNEL method, and the expression of BDNF in L5 dorsal root ganglion was detected by immunohistochemical method. Results the recovery of sciatic nerve tissue in Hirudo group was better than that in control group, and the expression of BDNF / GAP-43 in Hirudo group was higher than that in control group. The number of apoptotic cells was less than that of the control group, there was significant difference. Conclusion Leech may promote the expression of NGF, BDNF, GAP-43 and other nerve growth repair related factors. Inhibition of apoptosis, so as to play a protective role against sciatic nerve injury in rats.
【學(xué)位授予單位】:南京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號】:R285.5
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本文編號:1444561
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