微流控技術(shù)冷凍人微量精子的初步研究
發(fā)布時間:2018-01-20 23:13
本文關(guān)鍵詞: 微流控 海藻酸鈉 微量精子 冷凍 出處:《安徽醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文
【摘要】:目的:研究微流控技術(shù)封裝海藻酸鈉水凝膠的方法及影響水凝膠大小的因素。探索使用海藻酸鈉水凝膠為載體冷凍保存人類微量精子的可行性。方法:將兩個注射器分別裝入海藻酸鈉溶液和礦物油,連接裝置,通過分別使用不同管徑微滴生成裝置,調(diào)節(jié)微注射泵流速,觀察液滴大小并收集。收集精液標(biāo)本并處理。將標(biāo)本平均分為4組,分別為A組:使用海藻酸微囊包裹的添加保護(hù)劑玻璃化冷凍組;B組:使用海藻酸微囊包裹的無保護(hù)劑玻璃化冷凍組,C組:使用海藻酸微囊包裹的慢速冷凍組;D組:傳統(tǒng)慢速冷凍方法。通過微流控生成水凝膠后分別冷凍保存,24h后復(fù)溫,比較組間精子活率、向前運動及活動力百分比。結(jié)果:1:調(diào)整流速發(fā)現(xiàn)增加水相及油相流速均可減小微球大小。使用240/450尺寸裝置,調(diào)節(jié)微流速分別為水相20μL/min,油相600μL/min可制作直徑200μm左右水凝膠。2:冷凍后四組活動率、前向運動精子百分率相比冷凍前組活動率(63.4±2.7)%,前向運動精子百分率(53.6±3.8)%有顯著差異(p0.05),其中,A組和B組活動率分別為(17.5±2.4)%和(18.9±6.7)%,前向運動精子百分率分別為(12.1±5.3)%和(11.3±5.2)%均低于C組和D組,(p0.05),其中C組的活動率和前向運動精子百分率和D組有統(tǒng)計學(xué)差異(p0.05)。冷凍后四組活率,相比冷凍前組(69.7±3.1)%有顯著差異(p0.05),其中,A組和B組活率分別為(32.4±5.9)%和(34.3±8.0)%,均低于C組(43.1±10.5)%和D(42.5±9.4)%組,(p0.05),C組于D組間無顯著差異(p0.05)。結(jié)論:1:通過微流控的方法,可成功封裝海藻酸鈉水凝膠。增加水相及油相流速均可減小微球大小。2:海藻酸鈉水凝膠包裹精子慢速冷凍對精子活率與普通慢速冷凍無顯著差異,且回收率高,可考慮凍融微量精子;水凝膠玻璃化冷凍效果稍差,可進(jìn)一步探索適合的冷凍保護(hù)劑等。
[Abstract]:Objective : To study the method of micro flow control technology to encapsulate the sodium alginate hydrogel and the factors affecting the size of hydrogel . The method comprises the following steps : loading two syringes into sodium alginate solution and mineral oil respectively ; freezing and thawing micro - sperm can be considered ; the vitrification freezing effect of the hydrogel is slightly poor , and the suitable cryoprotective agent and the like can be further explored .
【學(xué)位授予單位】:安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號】:R714.8
【參考文獻(xiàn)】
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1 李國明;劉聰;林躍;高回春;駱小偉;汪朝陽;;鹽酸阿米替林/海藻酸鈉/殼聚糖微球的制備及釋放性能[J];應(yīng)用化學(xué);2008年11期
2 谷繼偉;王曦;張大偉;國玉芝;程巖;;奧沙普秦殼聚糖-海藻酸鈉緩釋微球的制備[J];中國藥師;2008年10期
,本文編號:1449716
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