發(fā)布時(shí)間：2020-12-08 19:11

　　乳腺癌在女性腫瘤中發(fā)病率較高,患者死亡的主要原因是腫瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移。研究發(fā)現(xiàn),緊密連接蛋白claudins（CLDNs）的表達(dá)異常能影響緊密連接（tight junctions,TJs）的結(jié)構(gòu)和功能,并通過某些信號通路參與細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo),進(jìn)而在腫瘤轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮作用。本課題組在前期工作中發(fā)現(xiàn),乳腺癌細(xì)胞MCF-7中CLDN6低表達(dá),過表達(dá)CLDN6能抑制MCF-7細(xì)胞的遷移和侵襲。為了探討CLDN6的作用機(jī)制,我們利用基因芯片技術(shù)篩查和分析CLDN6的靶基因及相關(guān)的信號通路,結(jié)果表明,CLDN6過表達(dá)后MCF-7細(xì)胞的JAKs/STATs信號通路中JAK2、STAT3等表達(dá)上調(diào)。JAKs/STATs信號通路是細(xì)胞因子、趨化因子和生長因子受體下游最主要的信號通路,參與細(xì)胞生長、增殖、遷移及侵襲等生物過程。因此,我們推測CLDN6可能直接或間接地激活JAK2/STAT3信號通路,從而發(fā)揮抑制MCF-7細(xì)胞遷移和侵襲的作用。但其具體作用機(jī)制目前尚不清楚。目的:探討緊密連接蛋白CLDN6通過JAK2/STAT3信號通路抑制乳腺癌細(xì)胞MCF-7遷移和侵襲的作用,為乳腺癌的治療提供新的靶點(diǎn)。方法:以前期... 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
引言
第1章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 緊密連接的功能
    1.2 CLDNs的結(jié)構(gòu)和功能
        1.2.1 CLDNs的結(jié)構(gòu)
        1.2.2 CLDNs的功能
    1.3 CLDNs的表達(dá)調(diào)控
    1.4 CLDNs與腫瘤
        1.4.1 CLDNs與卵巢癌
        1.4.2 CLDNs與前列腺癌
        1.4.3 CLDNs與乳腺癌
    1.5 CLDNs與JAKs/STATs信號通路
    1.6 展望與挑戰(zhàn)
第2章 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 細(xì)胞株
        2.1.2 主要的試劑耗材
        2.1.3 主要的儀器設(shè)備
        2.1.4 主要試劑的配制
        2.1.5 引物和抗體
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2.2 RT-PCR技術(shù)檢測CLDN6的表達(dá)
        2.2.3 Western-Blot技術(shù)檢測CLDN6的表達(dá)
        2.2.4 Western-Blot技術(shù)檢測p-JAK2、p-STAT3、JAK2和STAT3的表達(dá)
        2.2.5 iCelligence實(shí)時(shí)細(xì)胞功能分析儀檢測AG490對克隆組細(xì)胞的IC50值
        2.2.6 Western-Blot檢測AG490抑制JAK2激活的最佳作用條件
        2.2.7 細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)檢測AG490對細(xì)胞遷移的影響
        2.2.8 Transwell小室實(shí)驗(yàn)檢測AG490對細(xì)胞侵襲的影響
        2.2.9 Western-Blot技術(shù)檢測E-cadherin和Vimentin的表達(dá)
    2.3 統(tǒng)計(jì)方法
第3章 結(jié)果
    3.1 克隆組細(xì)胞CLDN6表達(dá)的鑒定
    3.2 CLDN6對MCF-7細(xì)胞EMT的影響
    3.3 CLDN6對MCF-7細(xì)胞中JAK2、STAT3表達(dá)和激活的影響
    3.4 AG490處理克隆組細(xì)胞的IC50值
    3.5 AG490抑制JAK2激活的最適濃度
    3.6 AG490抑制JAK2激活的最適時(shí)間
    3.7 AG490對細(xì)胞遷移的影響
    3.8 AG490對細(xì)胞侵襲的影響
    3.9 AG490對EMT的影響
第4章 討論
    4.1 序言
    4.2 CLDN6抑制MCF-7細(xì)胞的遷移、侵襲及EMT
    4.3 CLDN6抑制MCF-7細(xì)胞遷移和侵襲作用的機(jī)制
第5章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡介
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
碩士論文
[1]MCF-7細(xì)胞中CLDN6靶基因的篩選及CLDN6通過Tyk-2/Stats通路影響MCF-7細(xì)胞的惡性表型[D]. 張婷.吉林大學(xué) 2012



本文編號：2905546