甲基蓮心堿對小鼠慢性潰瘍性結(jié)腸炎的保護作用與機制研究
發(fā)布時間：2020-12-10 02:08
目的:甲基蓮心堿（Neferine,Nef）是蓮心中含量最高的生物堿,研究發(fā)現(xiàn)其具有保護心血管、抗血栓、抗氧化、抗腫瘤和抗炎等作用。我們前期研究顯示,甲基蓮心堿可顯著改善急性潰瘍性結(jié)腸炎小鼠的臨床癥狀和炎癥指標(biāo)。本研究通過葡聚糖硫酸鈉（Dextran sulfate sodium,DSS）誘導(dǎo)的慢性潰瘍性結(jié)腸炎小鼠模型評價甲基蓮心堿的保護作用并探討其可能的分子機制。方法:C57BL/6J雄性小鼠隨機分為空白組（n=8）、DSS模型組（n=12）、Nef低劑量組（10 mg/kg,n=10）和Nef高劑量組（20 mg/kg,n=10）。按照Stefan Wirtz等建模方法進行慢性潰瘍性結(jié)腸炎的建模。給藥組灌胃給予甲基蓮心堿,對照組和模型組給予1%吐溫80。每日記錄小鼠的一般情況、腹瀉和血便等情況,測量小鼠體重、計算疾病活動指數(shù)評分（Disease activity index,DAI）。于第7周給予DSS結(jié)束后處死小鼠,收集血漿,利用ELISA法檢測血漿中白細(xì)胞介素1β（Interleukin-1beta,IL-1β）、白細(xì)胞介素6（Interleukin-6,IL-6）、腫瘤壞死因...
【文章來源】：遵義醫(yī)科大學(xué)貴州省
【文章頁數(shù)】：63 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
中藥蓮芯（A）和Nef的化學(xué)結(jié)構(gòu)（B）
遵義醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文閔祥靜15(2)模型組：n=12；(3)Nef低劑量組（DSS+Nef（10mg/kg））：n=10；(4)Nef高劑量組（DSS+Nef（20mg/kg））：n=10。1.2.2藥物配制及動物給藥藥物配制：計算并精密稱量三天所需甲基蓮心堿總量→1%的吐溫80助溶→加入相應(yīng)體積ddH2O→分裝，避光保存于4℃冰箱。動物給藥：根據(jù)StefanWirtz所述[24]進行慢性潰瘍性結(jié)腸炎的模型構(gòu)建，其中，空白組在第1~7周自由飲用ddH2O；模型組以及給藥組在第1、4、7周自由飲用2%DSS，第2、3、5、6周自由飲用ddH2O，其中，給藥組根據(jù)當(dāng)日體重灌胃給與相應(yīng)體積藥物（0.1ml/10g），空白組和模型組每周灌胃給與1%吐溫80作為對照。具體操作如圖2所示圖2.DSS誘導(dǎo)的小鼠慢性潰瘍性結(jié)腸炎造模示意圖Fig.2DSS-inducedchroniculcerativecolitismodelinmice1.2.3疾病活動指數(shù)（DAI）評分計算實驗開始后，每日稱量小鼠的體重，觀察小鼠的大便狀態(tài)以及便血情況并進行評分；將評分進行統(tǒng)計學(xué)分析，評分標(biāo)準(zhǔn)參考DAI評分表[24]。評分標(biāo)準(zhǔn)（表4）及計算公式如下所示。此外，計算小鼠體重相較給藥第一天的體重變化百分率，繪制小鼠體重變化百分率圖[24-27]。表4.DAI評分標(biāo)準(zhǔn)
遵義醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文閔祥靜222.結(jié)果2.1甲基蓮心堿改善慢性UC小鼠的一般狀態(tài)2.1.1甲基蓮心堿降低慢性UC小鼠體重改變的百分率通過每日稱量小鼠體重，計算小鼠體重下降百分率。結(jié)果如圖3所示，小鼠第5周和第6周飲用ddH2O以及第7周飲用2%DSS造模后，與空白組小鼠相比，模型組小鼠體重下降的百分率較高，Nef給藥組下降的百分率較低。此外，在模擬潰瘍性結(jié)腸炎患者恢復(fù)期階段的第5周和第6周，模型組小鼠和Nef給藥組小鼠的體重均回升，但Nef給藥組小鼠的體重回升幅度較模型組大。由此可見，隨著給藥時間的延長，甲基蓮心堿可一定程度上抑制DSS誘導(dǎo)的慢性UC小鼠體重降低。圖3.甲基蓮心堿降低慢性UC小鼠體重變化百分率(±SD,n=6)。*P＜0.05vsControl.Fig.3NefreducedpercentagechangeinbodyweightofUCmice(±SD,n=6).*P＜0.05vsControl.2.1.2甲基蓮心堿降低慢性UC小鼠DAI評分小鼠第1周飲用2%DSS造模后，模型組小鼠DAI評分顯著上升，給藥組DAI評分也上升，但其DAI評分明顯低于模型組DAI評分；Nef給藥組在第2周自由飲水三天后，DAI評分恢復(fù)至空白組水平，模型組在第2周自由飲水的四天后，DAI評分才恢復(fù)至空白組水平，恢復(fù)時間較Nef給藥組時間長；第4周飲用2%DSS造模后，模型組小鼠從第一天開始，就出現(xiàn)腹瀉等癥狀，DAI評分顯著升高，Nef給藥組小鼠在第二天才xx
本文編號：2907890
【文章來源】：遵義醫(yī)科大學(xué)貴州省
【文章頁數(shù)】：63 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
中藥蓮芯（A）和Nef的化學(xué)結(jié)構(gòu)（B）
遵義醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文閔祥靜15(2)模型組：n=12；(3)Nef低劑量組（DSS+Nef（10mg/kg））：n=10；(4)Nef高劑量組（DSS+Nef（20mg/kg））：n=10。1.2.2藥物配制及動物給藥藥物配制：計算并精密稱量三天所需甲基蓮心堿總量→1%的吐溫80助溶→加入相應(yīng)體積ddH2O→分裝，避光保存于4℃冰箱。動物給藥：根據(jù)StefanWirtz所述[24]進行慢性潰瘍性結(jié)腸炎的模型構(gòu)建，其中，空白組在第1~7周自由飲用ddH2O；模型組以及給藥組在第1、4、7周自由飲用2%DSS，第2、3、5、6周自由飲用ddH2O，其中，給藥組根據(jù)當(dāng)日體重灌胃給與相應(yīng)體積藥物（0.1ml/10g），空白組和模型組每周灌胃給與1%吐溫80作為對照。具體操作如圖2所示圖2.DSS誘導(dǎo)的小鼠慢性潰瘍性結(jié)腸炎造模示意圖Fig.2DSS-inducedchroniculcerativecolitismodelinmice1.2.3疾病活動指數(shù)（DAI）評分計算實驗開始后，每日稱量小鼠的體重，觀察小鼠的大便狀態(tài)以及便血情況并進行評分；將評分進行統(tǒng)計學(xué)分析，評分標(biāo)準(zhǔn)參考DAI評分表[24]。評分標(biāo)準(zhǔn)（表4）及計算公式如下所示。此外，計算小鼠體重相較給藥第一天的體重變化百分率，繪制小鼠體重變化百分率圖[24-27]。表4.DAI評分標(biāo)準(zhǔn)
遵義醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文閔祥靜222.結(jié)果2.1甲基蓮心堿改善慢性UC小鼠的一般狀態(tài)2.1.1甲基蓮心堿降低慢性UC小鼠體重改變的百分率通過每日稱量小鼠體重，計算小鼠體重下降百分率。結(jié)果如圖3所示，小鼠第5周和第6周飲用ddH2O以及第7周飲用2%DSS造模后，與空白組小鼠相比，模型組小鼠體重下降的百分率較高，Nef給藥組下降的百分率較低。此外，在模擬潰瘍性結(jié)腸炎患者恢復(fù)期階段的第5周和第6周，模型組小鼠和Nef給藥組小鼠的體重均回升，但Nef給藥組小鼠的體重回升幅度較模型組大。由此可見，隨著給藥時間的延長，甲基蓮心堿可一定程度上抑制DSS誘導(dǎo)的慢性UC小鼠體重降低。圖3.甲基蓮心堿降低慢性UC小鼠體重變化百分率(±SD,n=6)。*P＜0.05vsControl.Fig.3NefreducedpercentagechangeinbodyweightofUCmice(±SD,n=6).*P＜0.05vsControl.2.1.2甲基蓮心堿降低慢性UC小鼠DAI評分小鼠第1周飲用2%DSS造模后，模型組小鼠DAI評分顯著上升，給藥組DAI評分也上升，但其DAI評分明顯低于模型組DAI評分；Nef給藥組在第2周自由飲水三天后，DAI評分恢復(fù)至空白組水平，模型組在第2周自由飲水的四天后，DAI評分才恢復(fù)至空白組水平，恢復(fù)時間較Nef給藥組時間長；第4周飲用2%DSS造模后，模型組小鼠從第一天開始，就出現(xiàn)腹瀉等癥狀，DAI評分顯著升高，Nef給藥組小鼠在第二天才xx
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