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沉默ATF5對(duì)鼻咽癌細(xì)胞凋亡及周期的影響

發(fā)布時(shí)間:2020-12-11 00:05
  目的:比較轉(zhuǎn)錄激活因子5(Activating transcription factor 5,ATF5)沉默前后鼻咽癌CNE-2Z細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期進(jìn)程的變化,探討ATF5沉默對(duì)鼻咽癌細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期影響的可能機(jī)制,為提高鼻咽癌治療效果提供新思路。方法:1)以鼻咽癌CNE-2Z細(xì)胞為研究對(duì)象,運(yùn)用sh RNA-ATF5慢病毒載體感染CNE-2Z細(xì)胞(sh RNA-ATF5組),以慢病毒空載體感染CNE-2Z細(xì)胞(LV-sh RNANC)作為陰性對(duì)照組(NC組),未感染慢病毒CNE-2Z細(xì)胞作空白對(duì)照組(Control組)。2)利用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(Quantitative Real-time Polymerase Chain Reaction,q RT-PCR)及蛋白免疫印跡法(Western blot)檢測(cè)CNE-2Z細(xì)胞慢病毒干擾效率。3)采用流式細(xì)胞儀(Fluorescence Activated Cell Sorter,FACS)Annexin VAPC單染法及Tunel免疫熒光檢測(cè)ATF5沉默前后CNE-2Z細(xì)胞凋亡率的變化,運(yùn)用碘化丙啶(Propidumiodid... 

【文章來源】:遵義醫(yī)科大學(xué)貴州省

【文章頁(yè)數(shù)】:52 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

沉默ATF5對(duì)鼻咽癌細(xì)胞凋亡及周期的影響


CNE-2Z細(xì)胞感染慢病毒的熒光表達(dá)情況

慢病毒,細(xì)胞,干擾效率,醫(yī)科大


遵義醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文仲秋月17圖2慢病毒感染CNE-2Z細(xì)胞后ATF5mRNA表達(dá)水平變化Fig.2ExpressionofATF5mRNAinCNE-2Zcellswithlentivirus注:A.擴(kuò)增曲線;B.溶解曲線;C.各組ATF5mRNA的表達(dá)水平比較;Control:空白對(duì)照組;NC:空載病毒的陰性對(duì)照組;shRNA-ATF5:ATF5沉默組;shRNA-ATF5groupvsControlandNC**P<0.014.1.3shRNA-ATF5在CNE-2Z細(xì)胞ATF5蛋白水平的干擾效率Westernblot檢測(cè)結(jié)果顯示,shRNA-ATF5組較Control組和NC組,ATF5蛋白表達(dá)水平明顯降低,且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.001,P=0.002,圖3),兩對(duì)照組間無(wú)明顯差異(P>0.05,圖3)。

干擾效率,慢病毒,細(xì)胞,蛋白


遵義醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文仲秋月18圖3慢病毒感染CNE-2Z細(xì)胞后ATF5蛋白水平的干擾效率Fig.3ExpressionofATF5proteininCNE-2Zcellswithlentivirus注:Control:空白對(duì)照組;NC:空載病毒的陰性對(duì)照組;shATF5:ATF5沉默組;shATF5groupvsControlandNC**P<0.014.2ATF5沉默對(duì)CNE-2Z細(xì)胞凋亡的影響4.2.1流式細(xì)胞儀檢測(cè)CNE-2Z細(xì)胞凋亡率AnnexinV-APC單染法檢測(cè)CNE-2Z細(xì)胞凋亡水平顯示,shRNA-ATF5組較Control組、NC組CNE-2Z細(xì)胞的凋亡率均明顯增高(P=0.000,表11、圖4),差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,兩對(duì)照組間無(wú)明顯差異(P,表11、圖4)。表11ATF5沉默對(duì)CNE-2Z細(xì)胞凋亡率的影響Tab.11EffectonapoptosisofCNE-2ZcellsafterATF5silencing組別凋亡率()Control3.610.10***NC3.800.18***shATF56.260.15注:shATF5groupvsControlandNC***P<0.001

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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碩士論文
[1]沉默ATF5對(duì)卵巢癌細(xì)胞skov-3裸鼠成瘤的研究[D]. 谷雪.青島大學(xué) 2014
[2]沉默ATF5對(duì)卵巢癌細(xì)胞增殖、凋亡及化療敏感性的影響[D]. 齊亞妮.青島大學(xué) 2012



本文編號(hào):2909529

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