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SARS冠狀病毒M蛋白基因片段的克隆表達與表達產(chǎn)物單克隆抗體的制備和鑒定

發(fā)布時間:2020-12-11 17:20
  嚴重急性呼吸道綜合征(severe acute respiratory syndrome,SARS)是一種以發(fā)熱和嚴重肺部感染為主要特征的新發(fā)急性傳染病。2003年4月16日,WHO正式宣布:SARS的病原體是一種新型冠狀病毒,并命名為SARS相關(guān)冠狀病毒(SARS-CoV)。研究表明,SARS-CoV與人類普遍易感的冠狀病毒OC43和229E株無抗體交叉反應(yīng),是一種新的從未在人類或動物中發(fā)現(xiàn)過的冠狀病毒。本研究的目的是原核表達SARS-CoV S蛋白片段、M蛋白片段,分析其抗原性、免疫原性,并制備M蛋白片段特異性單克隆抗體(mAb),為研制SARS的酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)診斷方法奠定基礎(chǔ)。 1.SARS-CoV S蛋白、M蛋白編碼基因片段的克隆、表達及其抗原性鑒定 化學(xué)合成SARS-CoV S蛋白氨基端501-base-pair(bp)、M蛋白氨基端129bp編碼基因片段,通過基因重組構(gòu)建原核表達質(zhì)粒pGEX-6p-1+SARS-S、pGEX-6p-1+SARS-M。重組質(zhì)粒經(jīng)酶切鑒定及核苷酸序列測定后,轉(zhuǎn)化感受態(tài)大腸桿菌BL21(DE

【文章來源】:南京醫(yī)科大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】:81 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

SARS冠狀病毒M蛋白基因片段的克隆表達與表達產(chǎn)物單克隆抗體的制備和鑒定


mAb亞型(類)鑒定

【參考文獻】:
期刊論文
[1]SARS冠狀病毒M蛋白的生物信息學(xué)研究[J]. 劉樹春,趙雨杰,張學(xué).  微生物學(xué)雜志. 2004(05)
[2]SARS冠狀病毒基因組、蛋白質(zhì)與侵入宿主細胞過程的研究近況[J]. 芮偉,張其鵬,石磊,盧銘.  中華醫(yī)學(xué)雜志. 2003(11)



本文編號:2910929

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