小鼠抗豬生長抑素單克隆抗體的制備與鑒定
發(fā)布時間：2020-12-15 10:07
目的制備生長抑素(SS)單克隆抗體(mAb),并對其生物學特性進行鑒定。方法用偶聯(lián)方法制備SS免疫原復合物,用免疫原復合物免疫BALB/c小鼠,采用雜交瘤技術制備SS mAb。用間接ELISA檢測mAb的亞型及效價,用定量ELISA檢測mAb 2E7的含量,用間接ELISA檢測mAb的特異性和mAb在體外、體內對SS的中和作用。結果獲得兩株能穩(wěn)定分泌SS mAb的雜交瘤細胞株2A5、 2E7,兩株抗體的亞型均為IgG1,2A5效價為1∶100 000,2E7效價為1∶1 000 000, 2E7含量為5.4 mg/mL。SS mAb只特異性地和SS純品及SS免疫原復合物發(fā)生免疫反應,不和單純載體蛋白(牛血清白蛋白)發(fā)生免疫反應,也不和其他肽類物質如生長激素、胰島素、胃泌素發(fā)生交叉反應。SS mAb在體外能抑制SS和兔抗SS抗體的免疫反應,注射到體內能中和機體內的SS,從而促進生長激素的分泌。使循環(huán)血中生長激素的含量顯著增加。結論成功制備了SS mAb,該mAb濃度大、效價高、特異性強,對SS功能具有較強的免疫中和作用。
【文章來源】：細胞與分子免疫學雜志. 2019年04期 北大核心
【文章頁數(shù)】：5 頁
【文章目錄】：
1 材料和方法
1.1 材料
1.2 方法
1.2.1 SS免疫原復合物的制備
1.2.2 BALB/c小鼠的免疫
1.2.3 細胞融合及陽性克隆的篩選
1.2.4 SS mAb的大量制備
1.2.5 SS mAb效價檢測
1.2.6 SS mAb含量的檢測
1.2.7 SS mAb IgG亞型檢測
1.2.8 SS mAb的特異性檢測
1.2.9 體內檢測SS mAb2E7對SS免疫中和性
1.2.10 體外檢測抗SS mAb對SS免疫中和性
2 結果
2.1 獲得抗SS mAb雜交瘤細胞株
2.2 SS mAb 2E7含量測定
2.3 mAb特異性較好
2.4 SS mAb體外中和實驗
2.5 小鼠靜脈注射抗SS mAb增加小鼠血清生長激素水平
3 討論
【參考文獻】：
期刊論文
[1]鼠抗人CD86單克隆抗體的制備及對腫瘤細胞生長與遷移的影響[J]. 王玉玉,顏天銘,孔永,沈立軍,王婧,周慧君,邱玉華. 中國免疫學雜志. 2019(04)
[2]小鼠抗人親環(huán)蛋白A(CypA)單克隆抗體的制備和應用[J]. 喬璐,洪欣,李時孟,何成彥,高申,王海. 細胞與分子免疫學雜志. 2018(08)
[3]抗乙型肝炎病毒S抗原全人單克隆抗體的制備和表位探究[J]. 佀傳亞,潘少坤,凌志洋,伊春艷,鄧志瑞,謝幼華,孫兵. 中國免疫學雜志. 2018(07)
[4]小鼠抗EV71衣殼蛋白VP1單克隆抗體的制備[J]. 周湧超,徐志剛,楊瀾,陳新宇,段志良,文金生. 細胞與分子免疫學雜志. 2018(05)
[5]抗銅綠假單胞菌PcrV蛋白單克隆抗體的篩選和功能驗證[J]. 管章春,劉方杰,劉成華,高亞萍,沈倍奮,楊光. 中國免疫學雜志. 2018(02)
[6]抗RecQ解旋酶單克隆抗體的制備、鑒定及應用[J]. 張榮紅,賈鐵文,廉芳,劉杰麟,周孟. 細胞與分子免疫學雜志. 2018(02)
[7]Medical treatment for gastro-entero-pancreatic neuroendocrine tumours[J]. Rossana Berardi,Francesca Morgese,Mariangela Torniai,Agnese Savini,Stefano Partelli,Silvia Rinaldi,Miriam Caramanti,Consuelo Ferrini,Massimo Falconi,Stefano Cascinu. World Journal of Gastrointestinal Oncology. 2016(04)
[8]抗人LOC51255單克隆抗體的制備及亞細胞定位[J]. 黃湘,譚家余,邱玉林,梁文軍,李曉棟,肖光文,李明. 中國免疫學雜志. 2009(06)
[9]生長抑素卵黃抗體（SS-IgY）對北京油雞生長的影響[J]. 王金洛,楊兵,宋維平,秦澤榮,賴平安,徐福洲. 華北農學報. 2001(02)
[10]消化性潰瘍并出血生長抑素治療研究[J]. 聶玉強,李瑜元,沙衛(wèi)紅,戴壽軍,吳惠生. 胃腸病學和肝病學雜志. 1999(04)
本文編號：2918097
【文章來源】：細胞與分子免疫學雜志. 2019年04期 北大核心
【文章頁數(shù)】：5 頁
【文章目錄】：
1 材料和方法
1.1 材料
1.2 方法
1.2.1 SS免疫原復合物的制備
1.2.2 BALB/c小鼠的免疫
1.2.3 細胞融合及陽性克隆的篩選
1.2.4 SS mAb的大量制備
1.2.5 SS mAb效價檢測
1.2.6 SS mAb含量的檢測
1.2.7 SS mAb IgG亞型檢測
1.2.8 SS mAb的特異性檢測
1.2.9 體內檢測SS mAb2E7對SS免疫中和性
1.2.10 體外檢測抗SS mAb對SS免疫中和性
2 結果
2.1 獲得抗SS mAb雜交瘤細胞株
2.2 SS mAb 2E7含量測定
2.3 mAb特異性較好
2.4 SS mAb體外中和實驗
2.5 小鼠靜脈注射抗SS mAb增加小鼠血清生長激素水平
3 討論
【參考文獻】：
期刊論文
[1]鼠抗人CD86單克隆抗體的制備及對腫瘤細胞生長與遷移的影響[J]. 王玉玉,顏天銘,孔永,沈立軍,王婧,周慧君,邱玉華. 中國免疫學雜志. 2019(04)
[2]小鼠抗人親環(huán)蛋白A(CypA)單克隆抗體的制備和應用[J]. 喬璐,洪欣,李時孟,何成彥,高申,王海. 細胞與分子免疫學雜志. 2018(08)
[3]抗乙型肝炎病毒S抗原全人單克隆抗體的制備和表位探究[J]. 佀傳亞,潘少坤,凌志洋,伊春艷,鄧志瑞,謝幼華,孫兵. 中國免疫學雜志. 2018(07)
[4]小鼠抗EV71衣殼蛋白VP1單克隆抗體的制備[J]. 周湧超,徐志剛,楊瀾,陳新宇,段志良,文金生. 細胞與分子免疫學雜志. 2018(05)
[5]抗銅綠假單胞菌PcrV蛋白單克隆抗體的篩選和功能驗證[J]. 管章春,劉方杰,劉成華,高亞萍,沈倍奮,楊光. 中國免疫學雜志. 2018(02)
[6]抗RecQ解旋酶單克隆抗體的制備、鑒定及應用[J]. 張榮紅,賈鐵文,廉芳,劉杰麟,周孟. 細胞與分子免疫學雜志. 2018(02)
[7]Medical treatment for gastro-entero-pancreatic neuroendocrine tumours[J]. Rossana Berardi,Francesca Morgese,Mariangela Torniai,Agnese Savini,Stefano Partelli,Silvia Rinaldi,Miriam Caramanti,Consuelo Ferrini,Massimo Falconi,Stefano Cascinu. World Journal of Gastrointestinal Oncology. 2016(04)
[8]抗人LOC51255單克隆抗體的制備及亞細胞定位[J]. 黃湘,譚家余,邱玉林,梁文軍,李曉棟,肖光文,李明. 中國免疫學雜志. 2009(06)
[9]生長抑素卵黃抗體（SS-IgY）對北京油雞生長的影響[J]. 王金洛,楊兵,宋維平,秦澤榮,賴平安,徐福洲. 華北農學報. 2001(02)
[10]消化性潰瘍并出血生長抑素治療研究[J]. 聶玉強,李瑜元,沙衛(wèi)紅,戴壽軍,吳惠生. 胃腸病學和肝病學雜志. 1999(04)
本文編號：2918097
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