發(fā)布時間：2020-12-26 23:13

　　目的：從基因轉(zhuǎn)錄水平了解球形幽門螺桿菌（Helicobacter pylori，Hp）基因表達(dá)的變化，選擇在球形菌中相對高表達(dá)的兩個基因克隆入真核表達(dá)載體并檢測其表達(dá)，為抗球形菌DNA疫苗的研制奠定基礎(chǔ)。 方法：1．幽門螺桿菌標(biāo)準(zhǔn)株NCTC11637和2株臨床分離株，經(jīng)抗生素—滅滴靈誘導(dǎo)球變。提取等菌量螺旋形和球形Hp的RNA，RT-PCR擴(kuò)增Hp 25種基因，這些基因包括毒力基因（kat、aphA、rdxA、frxA、cysS、sodB、ureB、glmM、cagA、vacA、fldA、iceAl、hpaA、fliD、napA、oipA、alpAB、babB、hopZ）；看家基因（scoB、atpD、glnA、recA）和功能不明的外膜蛋白基因（hopW、hopX）。擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)分子定量成像系統(tǒng)進(jìn)行掃描定量。2．選擇表達(dá)變化較小的兩個基因（即相對高表達(dá)基因）glmM、oipA，將其全長基因克隆入T載體進(jìn)行序列測定，再將其開放讀碼框架（ORF）克隆入真核表達(dá)載體pVAX1。重組質(zhì)粒glmM／pVAX1、oipA／pVAX1經(jīng)大量擴(kuò)增后，瞬時轉(zhuǎn)染胃腺癌細(xì)胞系SGC-7901，用pSE... 

【文章來源】：福建醫(yī)科大學(xué)福建省

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 球形與螺旋形幽門螺桿菌基因表達(dá)差異比較
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
第二部分 幽門螺桿菌毒力基因oipA和glmM的克隆及真核表達(dá)
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
致謝



本文編號：2940620