發(fā)布時間：2020-11-20 05:46

　　 目的 本研究應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色方法,觀察對照組腸壁、先天性巨結(jié)腸癥(Hirschsprung's disease,HD)患者有神經(jīng)節(jié)細胞段和無神經(jīng)節(jié)細胞段腸壁神經(jīng)組織中鈣視網(wǎng)膜蛋白(Calretinin,CR)的表達結(jié)果,并同時對比觀察神經(jīng)元特異性烯醇化酶(neurone specific enolase,NSE)、S-100蛋白(S-100 protein,S-100)、組織蛋白酶D(cathpsin D,CAD)的三種腸道神經(jīng)標志物在對照組及巨結(jié)腸腸壁表達情況,目的在于了解HD的病理生理改變以及尋找診斷先天性巨結(jié)腸的簡便有效的方法。 方法 1、收集蘇州大學(xué)附屬兒童醫(yī)院小兒外科2005—2008年手術(shù)切除HD標本54例,包括HD擴張段與痙攣段。以15例年齡與之相符的無HD患兒的手術(shù)切除結(jié)腸標本作為對照組。 2、分別對HD痙攣段、擴張段、對照組腸壁組織切片進行CR、NSE、S-100、CAD的免疫組織化學(xué)染色和HE染色,計算機成像系統(tǒng)照相存盤,用圖像分析軟件(Image-Pro-Plus)分別判定各指標在HD擴張段與痙攣段神經(jīng)叢中陽性染色面積百分比。所得數(shù)據(jù)用SPSS12.0統(tǒng)計軟件包進行處理分析。 結(jié)果 1、無論是HE或免疫組化染色HD的擴張段神經(jīng)節(jié)細胞皆存在,肌層神經(jīng)纖維有不同程度的排列改變,神經(jīng)節(jié)細胞大小不等;痙攣段均未見神經(jīng)節(jié)細胞。 2、在正常結(jié)腸及HD擴張段腸壁免疫組化染色可見鈣視網(wǎng)膜蛋白在肌間及黏膜下神經(jīng)叢中對神經(jīng)節(jié)細胞呈強陽性表達,神經(jīng)纖維也呈陽性反應(yīng);而HD痙攣段腸壁的免疫組化染色則可見鈣視網(wǎng)膜蛋白在肌間神經(jīng)叢及黏膜下神經(jīng)叢大多表達陰性(90.7%),僅少量呈弱陽性表達(9.3%)。NSE在正常腸壁及HD擴張段腸壁肌間、粘膜下神經(jīng)叢中神經(jīng)節(jié)細胞及神經(jīng)纖維中均有表達;在HD痙攣段腸壁可見NSE陽性表達的神經(jīng)纖維;S-100不表達于神經(jīng)節(jié)細胞,組織蛋白酶D表達于神經(jīng)節(jié)細胞。 3、定量分析:CR、NSE、S-100、CAD分別在HD痙攣段之間神經(jīng)叢中陽性染色面積百分率與其在HD擴張段神經(jīng)叢中陽性染色面積百分率存在差異,有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。 結(jié)論 1、鈣視網(wǎng)膜蛋白免疫組化染色可很好的顯示正常結(jié)腸及HD擴張段腸壁的神經(jīng)節(jié)細胞及神經(jīng)纖維,而在HD痙攣段該指標免疫組化染色結(jié)果呈陰性或弱陽性表達�？勺鳛樵\斷HD很好的神經(jīng)標志物。 2、鈣視網(wǎng)膜蛋白在HD的痙攣段腸管內(nèi)的肌間神經(jīng)叢及黏膜下神經(jīng)叢大多表達陰性,僅少量呈弱陽性。對小塊組織或直腸黏膜活檢診斷HD有幫助,可作為診斷HD的一種敏感有效的方法。 3、鈣視網(wǎng)膜蛋白在HD痙攣段腸壁表達缺失或減少,可能參與HD的發(fā)病機制。
【學(xué)位單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2009
【中圖分類】：R726.5
【部分圖文】：

鈣視網(wǎng)膜蛋白在先天性巨結(jié)腸癥腸壁的表達及意義結(jié)果根據(jù)以上數(shù)據(jù)繪制CR、NSE、S一100、CAD免疫組化染色在本次54例巨結(jié)腸標本擴張段和痙攣段中平均陽性面積百分率比較的直條圖見圖31:圈HD擴張段.HD痙攣段田翁形舊以到斗匕口 CRNSES一 100CAD圖31:各標志物在HD擴張段和痙孿段染色陽性面積比較

正常腸段肌間神經(jīng)叢(HEx400,典型的成熟神經(jīng)節(jié)細胞易辮認

新生兒腸壁肌間神經(jīng)叢(HEx200),不典型神經(jīng)節(jié)細胞難以識別.
【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 朱進;金先慶;;先天性巨結(jié)腸病變組織相關(guān)標記物檢測現(xiàn)狀[J];國際兒科學(xué)雜志;2007年04期

2 周峻,魏明發(fā),馮杰雄,張艷,殷光甫,史慧芬;先天性巨結(jié)腸的一種術(shù)中快速診斷方法[J];臨床小兒外科雜志;2004年01期

3 杜勇;施誠仁;潘駿;張文竹;;先天性巨結(jié)腸HuD蛋白表達的實驗研究[J];臨床小兒外科雜志;2005年05期

4 吳琍,陳雨歷;突觸素單克隆抗體免疫組化實驗診斷腸神經(jīng)發(fā)育不良癥的價值[J];山東醫(yī)藥;2002年23期

5 張華;陳聰?shù)?李仲榮;朱利斌;謝小志;謝麗微;;S-100蛋白和NSE在先天性巨結(jié)腸診斷中的協(xié)同作用[J];溫州醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2006年03期

6 徐建華;神經(jīng)標記物在先天性巨結(jié)腸病理診斷中的應(yīng)用[J];中國婦幼保健;2005年22期

7 段降龍;先天性巨結(jié)腸癥的分子遺傳學(xué)研究進展[J];中華小兒外科雜志;2002年04期

8 童強松,鄭麗端,阮慶蘭,郭筱蘭,劉春萍,湯紹濤;凋亡抑制基因Bcl-2在先天性巨結(jié)腸節(jié)細胞中的表達[J];中華小兒外科雜志;2004年06期

9 關(guān)鳳玲;孫曉毅;周晟;魏明發(fā);;先天性巨結(jié)腸癥及其同源病神經(jīng)標志物的表達以及圖形測量定量研究[J];中華小兒外科雜志;2007年07期

10 劉貴麟，王德文，李力軍，張喜恩，彭少林;人胚胎消化道神經(jīng)節(jié)細胞發(fā)育的研究[J];中華小兒外科雜志;1996年01期

本文編號：2891038