發(fā)布時間：2020-12-09 20:07

　　第一部分 麻醉手術引起老齡大鼠海馬SIRT1蛋白表達降低、中樞神經(jīng)炎癥反應和tau蛋白表達異常目的:探討麻醉手術對老齡大鼠海馬SIRT1蛋白表達,中樞神經(jīng)炎癥反應和tau蛋白表達的作用。方法:7日齡,14日齡,57日齡,21月齡SD大鼠,取海馬組織,蛋白印記雜交（Western Blot）檢測四組不同年齡大鼠海馬組織中SIRT1蛋白表達的變化（n=6）。21月齡SD雄性大鼠按隨機數(shù)字表法分為兩組:空白對照組（CON組）和麻醉手術組（ISO+SUR組）。麻醉手術組（ISO+SUR組）在2%異氟烷麻醉下行切脾手術,麻醉和手術總時長2 h;空白對照組（CON組）吸入對照氣體2 h。麻醉手術結束后24 h,取海馬組織,蛋白印記雜交（Western Blot）檢測SIRT1,DNMT1,ac-NF-κB,IL-6,ac-tau（k280）,ac-tau（k686）,p-tau（AT8）蛋白表達（n=6）;麻醉手術結束24小時后,灌注多聚甲醛取全腦,免疫熒光IF檢測小膠質細胞激活情況。結果:（1）Western Blot結果顯示,在四組不同年齡段SD大鼠海馬組織中,21月齡大鼠海馬SIRT1蛋白表... 

【文章來源】：華中科技大學湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：博士

【部分圖文】：

麻醉手術加劇了衰老所致的大鼠海馬SIRT1表達下調

圖 2. 麻醉手術引起老齡大鼠海馬小膠質細胞過度激活。對 CON 組和 ISO+SUR組大鼠進行 Iba1（綠色熒光）和 DAPI（藍色熒光）的免疫熒光標記。與 CON 組相比，ISO+SUR 組的 Iba1 陽性細胞顯著增多。比例尺 = 50 μm。3. 麻醉手術引起老齡大鼠海馬 DNMT1 表達減少，ac-NF-κB 和 IL-6 的表達升高DNA 甲基化是被廣泛研究的表觀遺傳過程之一。DNMT1 是常見的 DNA 甲基轉移酶之一。有研究表明 SIRT1 可以通過使 DNMT1 去乙酰化，調控 DNMT1活性，從而影響促炎細胞因子轉錄水平。因此我們進一步檢測了海馬中 DNMT1的表達變化。研究結果表明，與 CON 組老齡大鼠相比，麻醉手術組老齡大鼠海馬中 DNMT1 的表達水平顯著降低（P < 0.05）。NF-κB 是一種核轉錄因子，在細胞損傷，應激中被激活。有研究表明 NF-κB 的激活與衰老和衰老相關的慢性疾病有關。另一方面，SIRT1 可以通過使 NF-κB 去乙酰化，抑制其轉錄活性，從

圖 3. 麻醉手術引起老齡大鼠海馬炎癥反應增強。（A, B）麻醉手術引起老齡大鼠海馬 DNMT1 表達降低（*P < 0.05）。（A, C）麻醉手術引起老齡大鼠海馬 ac-NF-κB 表達升高（*P < 0.05）。（A, D）麻醉手術引起老齡大鼠海馬 IL-6 表達升高（**P < 0.001）。（n = 6）4. 麻醉手術引起老齡大鼠海馬乙酰化 tau 蛋白和磷酸化 tau 蛋白表達升高Tau 蛋白是一種微管相關蛋白，在維持軸突微管的穩(wěn)定性中有重要作用。有研究表明，乙�；� tau 蛋白出現(xiàn)早于磷酸化 tau 蛋白，且乙�；� tau 蛋白會促進磷酸化 tau 蛋白積聚，從而加重 tau 蛋白介導的中樞神經(jīng)系統(tǒng)損害。在這一部分中，我們檢測了老齡大鼠在接受麻醉手術后，海馬組織內 tau 蛋白的乙�；�和磷酸化水平。研究結果表明，麻醉手術引起了老齡大鼠海馬 ac-tau(k280)，ac-tau (k686)和 p-tau (AT8)蛋白表達上調（P < 0.001）。


本文編號：2907413