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OCT2和前列腺癌的發(fā)生發(fā)展相關性研究

發(fā)布時間:2020-12-02 06:08
  前列腺癌(prostate cancer,PC)是老年男性最常見的惡性腫瘤之一,可分為家族性和散發(fā)性兩種,兩者均是遺傳因素和環(huán)境因素相互作用的結果。在世界范圍內,前列腺癌的發(fā)病率在男性所有惡性腫瘤中位居第二位,死亡率居第六,且前列腺癌增長率高居榜首。尤其是在美國,前列腺癌的發(fā)病率已經超過男性惡性腫瘤的第一殺手——肺癌,成為第一位危害男性健康的腫瘤。而在亞洲,前列腺癌發(fā)病率遠低于歐美國家,這可能和不同人種的基因易感性相關。但隨著近年來PSA檢測的普及,中國前列腺癌的發(fā)病率持續(xù)上升,且增長速度比歐美發(fā)達國家更加迅猛。有研究顯示,1998年中國男性前列腺癌粗發(fā)病率為3.52/10萬,至2008年發(fā)病率增加了 212.5%,達到了 11.00/10萬,10年間的年均增長率為12.07%。所以深入研究前列腺癌的發(fā)生、發(fā)展以及疾病歸轉的規(guī)律以及相應的癌基因或者抑癌基因對前列腺癌的作用,對前列腺癌的治療及預后有著重大的意義。根據近期的相關文獻和data分析,前列腺癌的發(fā)生發(fā)展和有機陽離子轉運體 OCT2(organic cation transporter,member 2,SLC22A2)可能存在... 

【文章來源】:浙江大學浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數】:51 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

OCT2和前列腺癌的發(fā)生發(fā)展相關性研究


圖2.1?0CT2在前列腺組織和癌旁組織DNA水平的表達情況

位置預測,前列腺癌,甲基化,啟動子區(qū)


3.?3.?2人體前列腺癌組織和癌旁組織BSP結果??通過對68例人體前列腺癌姐織標本提。模危敛⑥D化,經亞硫酸氫鹽處理后再進行PCR??擴增,和AT連接,測定(如圖3.?2A所示)以及BSP測序,得出臨床前列腺癌組織標本??中0CT2啟動子區(qū)域的甲基化率均值為21.2°/。,癌旁組織標本中0CT2啟動子區(qū)域的甲基??化率均值為2.34%,?P值<0.05?(如圖3.?2B所示)。這表明在臨床樣本中,前列腺癌的??mRNA水平甲基化率高于正常組織,而0CT2的轉錄與否的確受DNA甲基化影響,結合第二??章的實驗內容,有可能0CT2啟動子區(qū)域DNA甲基化導致了?0CT2轉錄被抑制,而0CT2的??低水平表達導致了前列腺癌的發(fā)生發(fā)展。??祕?P<0.05??Hb?1????2〇〇〇bp?3〇-??1000bp??:??19??

啟動子區(qū),甲基化


?DNA甲基化能抑制0CT2基因的轉錄??圖3.?2前列腺癌組織和癌旁組織在mRNA水平上的甲基化率。圖A為BSP測序前陽性片段??的驗證;圖B為前列癌癌組織和癌旁組織在mRNA水平上的甲基化率。??3.?3.?3?DNA曱基化在PC3和DU145細胞系中對于0CT2的影響??根據3.?3.?1的實驗結果,人0CT2啟動子CpG島的活性位點位于-358bp到-26bp之間,??且在CpG島的活性和甲基化密切相關,故將0CT2的啟動子分為兩個片段,分別為-1932bp??到+61bp和-358bp到+61bp,設計引物,其中一個引物為甲基化引物,一個引物為正常引??物,PCR,然后將PCR產物分別連接到熒光素酶報告基因質粒(pGL3-basic)中,并轉染??前列腺上皮RWPE-1細胞,提取蛋白,并做熒光素酶活性檢測,計算相關熒光強度并與空??載對比。如圖3.?3A所示,MOCK為空白對照,ME為加入了加入了甲基化轉移酶M.SssI實??驗組。這表明0CT2的轉錄啟動子區(qū)域活性位點的確與CpG島相關,且CpG島的活性位點??位于-358bp到-26bp之間活性位點位于-與報告基因所預測的一致

【參考文獻】:
期刊論文
[1]中國前列腺癌發(fā)病現(xiàn)狀和流行趨勢分析[J]. 韓蘇軍,張思維,陳萬青,李長嶺.  臨床腫瘤學雜志. 2013(04)
[2]ELAC2基因變異與前列腺癌易感性[J]. 崔泳,蘇懷慶,曹文舟.  江蘇醫(yī)藥. 2011(17)
[3]中國漢族男性CYP17基因多態(tài)性與前列腺癌發(fā)生危險性的關系[J]. 王軍起,古力米熱,李鴻偉,劉建河,佟明,艾軍魁,袁亦銘,辛殿祺,李鳴,那彥群.  中華泌尿外科雜志. 2004(08)



本文編號:2895114

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