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短期持續(xù)機(jī)械牽拉對(duì)人膀胱平滑肌細(xì)胞收縮表型蛋白的影響及其與ERK/MAPK信號(hào)通路的關(guān)系

發(fā)布時(shí)間:2024-06-11 23:51
  目的:研究人膀胱平滑肌細(xì)胞在短時(shí)間內(nèi)持續(xù)牽拉各收縮表型蛋白的改變及與Erk/MAPK信號(hào)通路的關(guān)系。方法:本實(shí)驗(yàn)采用Real-time PCR、Western blot檢測mRNA水平和蛋白水平各收縮表型蛋白的改變,免疫細(xì)胞化學(xué)和免疫細(xì)胞熒光觀察α-SMA在MAPK阻斷劑影響下后的改變,分析短時(shí)間持續(xù)牽拉人膀胱平滑肌細(xì)胞后各表型蛋白的改變以及與MAPK信號(hào)通路的關(guān)系。結(jié)果:持續(xù)牽拉人膀胱平滑肌細(xì)胞α-SMA出現(xiàn)先先下降后上升的現(xiàn)象,與細(xì)胞收縮功能密切相關(guān)的形態(tài)學(xué)表現(xiàn)一致,解除牽拉后,α-SMA仍能進(jìn)一步上升,牽拉過程中Erks出現(xiàn)顯著改變,而P38無明顯改變,抑制劑分別抑制Erk通路和P38通路后,前者致使收縮表型蛋白發(fā)生顯著改變。結(jié)論:α-SMA和細(xì)胞形態(tài)可反映人膀胱平滑肌細(xì)胞的收縮能力,短期牽拉人膀胱平滑肌細(xì)胞,其收縮功能先下降后回升,解除牽拉,其收縮功能也增加,這與Erk通路有關(guān),而與P38通路無關(guān)。

【文章頁數(shù)】:60 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖2?A.?Real-time?PC民人膀脫平滑肌細(xì)施a?-SMA?m民NA表達(dá)量與對(duì)照組相對(duì)量??柱狀圖統(tǒng)計(jì)

圖2?A.?Real-time?PC民人膀脫平滑肌細(xì)施a?-SMA?m民NA表達(dá)量與對(duì)照組相對(duì)量??柱狀圖統(tǒng)計(jì)

分為8沮:Os組(Control組即對(duì)照組)、30s沮、Imin組、5min組、lOmin組、15min??組、30min組、:lh組。牽拉后2h終止細(xì)胞培養(yǎng)。民eal-timePC民和Westemblot的結(jié)??果顯不出現(xiàn)一波形改變,其中在lOmin組和15min組表型蜜白表達(dá)....


圖2E.?Real-time?PC民人膀脫平滑肌細(xì)胞mRNA的溶解曲線,a;SM22、b:a-??SMA、C;?Smoot;helin、d;?Calponin、e:?GAPDH

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mRNA發(fā)生波形改變,出現(xiàn)先減少,后增加現(xiàn)象,波答位于lOmin組和??15min?姐。??圖2C?民eal-time?PC民人膀騰平滑肌細(xì)胞Calponin?m民NA表達(dá)量與對(duì)照組相對(duì)??量柱狀圖統(tǒng)計(jì)。*P<0.05?VS.對(duì)照組,提示在不同牽拉時(shí)間條件下,Calponin??....


圖2F.?Western?blot條帶提示人膀腕平滑肌細(xì)胞a-SMA在不同牽拉條件下也出現(xiàn)類??-似Real-time?PCR波形改變,出現(xiàn)先減少,后增加現(xiàn)象,波谷位于lOmin組??

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mRNA發(fā)生波形改變,出現(xiàn)先減少,后增加現(xiàn)象,波答位于lOmin組和??15min?姐。??圖2C?民eal-time?PC民人膀騰平滑肌細(xì)胞Calponin?m民NA表達(dá)量與對(duì)照組相對(duì)??量柱狀圖統(tǒng)計(jì)。*P<0.05?VS.對(duì)照組,提示在不同牽拉時(shí)間條件下,Calponin??....


圖2G:對(duì)圖2F的條帶用linage?J軟件進(jìn)行灰度分析,先與GAPDH內(nèi)參進(jìn)行比對(duì)后,??既而與Control組進(jìn)行比對(duì),做一柱狀圖,*P<0.05vs.對(duì)照組,結(jié)果更能直??

圖2G:對(duì)圖2F的條帶用linage?J軟件進(jìn)行灰度分析,先與GAPDH內(nèi)參進(jìn)行比對(duì)后,??既而與Control組進(jìn)行比對(duì),做一柱狀圖,*P<0.05vs.對(duì)照組,結(jié)果更能直??



本文編號(hào):3992900

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