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IRF-7在急性HBV感染小鼠模型肝臟中的表達(dá)變化分析

發(fā)布時(shí)間:2018-12-29 16:10
【摘要】:目的本文擬通過構(gòu)建急性乙型肝炎病毒(HBV)感染小鼠模型,觀察干擾素調(diào)節(jié)因子-7(IRF-7)的mRNA及蛋白表達(dá)水平在急性HBV感染小鼠模型中的變化,以期探討IRF-7在HBV急性感染清除機(jī)制中的作用。方法用高壓水動力法經(jīng)小鼠尾靜脈注射HBV基因組1.3倍體真核表達(dá)質(zhì)粒(pcDNA3.1-HBV1.3)構(gòu)建急性乙型肝炎病毒感染小鼠模型,用RT-PCR和Western blot檢測正常組(NC組)、模型組(pHBV組)及空載體組(pcDNA組)小鼠肝臟中IRF-7的mRNA和蛋白表達(dá)水平。結(jié)果 pHBV組在6 h即可檢測到肝臟內(nèi)HBsAg及HBcAg陽性,抗原表達(dá)在12 h達(dá)峰值,至第5天逐漸消失。pHBV組肝臟組織中IRF-7 mRNA和蛋白表達(dá)在6 h均顯著上調(diào)(P0.05),12 h達(dá)最高,隨后下降,48 h恢復(fù)至正常水平。而pcDNA組與正常組的IRF-7表達(dá)在各時(shí)間點(diǎn)均無顯著變化。結(jié)論成功構(gòu)建了急性HBV感染小鼠模型,該模型肝臟組織IRF-7 mRNA及蛋白水平變化與肝臟內(nèi)HBV抗原表達(dá)變化趨勢一致,提示肝臟內(nèi)IRF-7可能參與了HBV的急性感染清除過程。
[Abstract]:Objective to investigate the expression of interferon regulatory factor-7 (IRF-7) mRNA and protein in acute hepatitis B virus (HBV) infected mice by constructing a mouse model of acute hepatitis B virus (HBV) infection, and to observe the changes of the expression level of interferon regulatory factor 7 (IRF-7) in acute HBV infected mice. To explore the role of IRF-7 in the clearance mechanism of acute HBV infection. Methods A mouse model of acute hepatitis B virus infection was established by injecting HBV genome 1.3 ploidy eukaryotic expression plasmid (pcDNA3.1-HBV1.3) into mouse tail vein by high pressure hydrodynamic method. RT-PCR and Western blot were used to detect normal group (NC group). The expression of mRNA and protein of IRF-7 in the liver of model group (pHBV group) and empty carrier group (pcDNA group). Results the expression of HBsAg and HBcAg was detected in the liver of pHBV group at 6 h, and the expression of antigen reached its peak at 12 h, and gradually disappeared on the 5th day. The expression of IRF-7 mRNA and protein in liver tissue of pHBV group was significantly up-regulated at 6 h (P0.05), and reached the highest level at 12 h. Then it decreased and returned to normal level at 48 h. The expression of IRF-7 in pcDNA group and normal group showed no significant change at all time points. Conclusion the mouse model of acute HBV infection was successfully constructed. The changes of IRF-7 mRNA and protein levels in liver tissue were consistent with the change trend of HBV antigen expression in the liver, suggesting that IRF-7 in liver might be involved in the process of acute infection clearance of HBV.
【作者單位】: 重慶醫(yī)科大學(xué)病毒性肝炎研究所感染性疾病分子生物學(xué)省部共建教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院檢驗(yàn)科;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(30901264) 重慶市科委自然科學(xué)基金(2009BB5264) 重慶市衛(wèi)生局醫(yī)學(xué)科研計(jì)劃(2011-2-152)
【分類號】:R512.62

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