發(fā)布時(shí)間：2020-11-11 13:44

　　 目的：通過(guò)篩選適宜比例的絲素蛋白、明膠納米纖維膜,進(jìn)一步通過(guò)靜電紡絲技術(shù)將藥物黃芪甲苷復(fù)合于內(nèi),制備獲得載藥納米纖維敷料,探討其對(duì)于燒燙傷、創(chuàng)傷的治療以及抑制疤痕的作用并且進(jìn)一步探究其相關(guān)機(jī)制,希望達(dá)到抑制疤痕、促進(jìn)傷口快速愈合的治療效果。方法：1、采用靜電紡絲納米纖維技術(shù)制備絲素蛋白(SF)、明膠(GT)在SF/GT 100/0、SF/GT 75/25、SF/GT 25/75、SF/GT 0/100不同比例下的納米纖維膜,并對(duì)其直徑、表面形貌、力學(xué)性能、膨脹率、孔隙率、降解率以及生物相容性進(jìn)行了考察,從而篩選出適用于傷口敷料的最佳比例；2、將藥物黃芪甲苷載入納米纖維膜制備成載藥納米纖維敷料,對(duì)其性質(zhì)進(jìn)行考察。進(jìn)一步將其用于大鼠深二度燒燙傷傷口治療,考察了載藥納米纖維敷料對(duì)燒燙傷的治療效果,并且采用掃描電鏡、HE染色、天狼猩紅染色、馬森三色染色等方式驗(yàn)證載藥納米纖維敷料的燒燙傷修復(fù)效果；3、進(jìn)一步將載藥納米纖維敷料用于大鼠創(chuàng)傷傷口治療,考察其創(chuàng)傷修復(fù)效果,并在傷口愈合不同時(shí)間點(diǎn)取皮膚組織樣品進(jìn)行考察,對(duì)其促進(jìn)愈合的機(jī)理進(jìn)行研究。結(jié)果：1、采用靜電紡絲納米纖維技術(shù)成功制備了SF/GT 100/0、SF/GT 75/25、 SF/GT 25/75、SF/GT 0/100不同比例的納米纖維膜,隨著明膠成分含量的增大,其直徑增大、膨脹率增強(qiáng)、降解率加快,柔韌性增強(qiáng),且具有較好的孔隙率和生物相容性,綜合其性能,最終篩選SF/GT 25/75比例的納米纖維膜作為載藥納米纖維敷料的最佳比例。2、將藥物黃芪甲苷載入SF/GT 25/75比例的納米纖維膜中,結(jié)果顯示對(duì)納米纖維膜的直徑、膨脹率、孔隙率、力學(xué)性能、生物相容性等性能均未產(chǎn)生影響,同時(shí)顯示了控制藥物緩慢釋放的性能,分別在釋放1h,12h,48h時(shí),累計(jì)釋放率達(dá)到35%,80%及96%。在體內(nèi)藥效學(xué)考察中,載藥納米纖維膜用于燒燙傷顯示較明顯的治療效果,傷口的愈合速率加快,血管新生數(shù)量增加,膠原蛋白的有序排列增強(qiáng),對(duì)于燒燙傷治療及抑制疤痕有較好效果。3、載藥納米纖維敷料同樣適用于創(chuàng)傷傷口的治療,進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)其機(jī)制主要通過(guò)促進(jìn)巨噬細(xì)胞在傷口處數(shù)量增加,從而加強(qiáng)創(chuàng)面局部免疫功能,促進(jìn)傷口愈合；通過(guò)促進(jìn)VEGF的含量增加從而促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞的分裂和增殖進(jìn)而導(dǎo)致新生血管的生成；同時(shí),載藥納米纖維敷料能有效抑制成纖維細(xì)胞的α-SMA表達(dá),減少肌層纖維細(xì)胞的形成,從而產(chǎn)生了顯著的疤痕抑制作用。結(jié)論：作為較優(yōu)良的局部給藥體系,載有黃芪甲苷納米纖維敷料可促進(jìn)燒燙傷、創(chuàng)傷修復(fù),同時(shí)有疤痕抑制的效果。
【學(xué)位單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2015
【中圖分類】：R943
【部分圖文】：

圖１．?７巧化細(xì)胞在靜電紡納米纖維膜上的生長(zhǎng)增殖情況（＊：Ｐ＜０．０５，＊＊：Ｐ＜０．０１）。??１．３．?１．６．?３細(xì)胞生長(zhǎng)形態(tài)測(cè)試??圖１．８為７天后靜電紡納米纖維膜上角化細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖形貌圖，其反映??了角化細(xì)胞在納米纖維膜上生長(zhǎng)７天后的細(xì)胞的生長(zhǎng)形態(tài)，并進(jìn)一步顯示了細(xì)??胞在納米纖維膜上的鋪覆情況。在圖中的低倍鏡下可Ｗ看到，大量的細(xì)胞較好??的鋪覆于納米纖維膜上，質(zhì)地均勻且大小統(tǒng)一，同時(shí)存在較多的細(xì)胞與細(xì)胞間??的粗附與復(fù)合體。高倍鏡下圍片中可Ｗ看到，細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生了轉(zhuǎn)化，普通培??養(yǎng)的懸浮的角化細(xì)胞為圓形，而圖中粗附在納米纖維膜上的細(xì)胞逐漸轉(zhuǎn)化為梭??形Ｗ及王角形，而且在細(xì)胞的表面發(fā)現(xiàn)了非常大量的絨毛及偽足長(zhǎng)出，這種??細(xì)胞形態(tài)的轉(zhuǎn)化可Ｗ更巧的有助于細(xì)胞與納米纖維膜進(jìn)一步的姑附增殖。說(shuō)明??了明膠和絲素蛋白的復(fù)合支架可很好的模擬利于細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的細(xì)胞外基質(zhì)??的環(huán)境，促進(jìn)細(xì)胞的藉附與增殖，促進(jìn)細(xì)胞的集中，有利于組織的生成。進(jìn)而??也證明了混合的絲素、明膠納米纖維膜其生物相容性良好

?７ｄ??Ｔｉｍｅ?（ｄ）??圖１．?７巧化細(xì)胞在靜電紡納米纖維膜上的生長(zhǎng)增殖情況（＊：Ｐ＜０．０５，＊＊：Ｐ＜０．０１）。??１．３．?１．６．?３細(xì)胞生長(zhǎng)形態(tài)測(cè)試??圖１．８為７天后靜電紡納米纖維膜上角化細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖形貌圖，其反映??了角化細(xì)胞在納米纖維膜上生長(zhǎng)７天后的細(xì)胞的生長(zhǎng)形態(tài)，并進(jìn)一步顯示了細(xì)??胞在納米纖維膜上的鋪覆情況。在圖中的低倍鏡下可Ｗ看到，大量的細(xì)胞較好??的鋪覆于納米纖維膜上，質(zhì)地均勻且大小統(tǒng)一，同時(shí)存在較多的細(xì)胞與細(xì)胞間??的粗附與復(fù)合體。高倍鏡下圍片中可Ｗ看到，細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生了轉(zhuǎn)化，普通培??養(yǎng)的懸浮的角化細(xì)胞為圓形，而圖中粗附在納米纖維膜上的細(xì)胞逐漸轉(zhuǎn)化為梭??形Ｗ及王角形，而且在細(xì)胞的表面發(fā)現(xiàn)了非常大量的絨毛及偽足長(zhǎng)出，這種??細(xì)胞形態(tài)的轉(zhuǎn)化可Ｗ更巧的有助于細(xì)胞與納米纖維膜進(jìn)一步的姑附增殖。說(shuō)明??了明膠和絲素蛋白的復(fù)合支架可很好的模擬利于細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的細(xì)胞外基質(zhì)??的環(huán)境

２．?３．?１載藥納米纖維敷料的制備及性質(zhì)考察??２．３．?１．?１黃巧甲昔體化分析方法學(xué)的建立??從圖２．２可Ｗ看出，黃民甲昔在此ＨＰＬＣ條件下，保留時(shí)間在６．?５－６．?８分鐘??之間，峰形良好。??＿?化??９－??５０－??Ｉ??皂２５－??０－????＾?＾５?＇??Ｍｉｎ姐的??圖２．２黃巧甲昔標(biāo)準(zhǔn)品的ＨＰＬＣ圖譜。??２．３．?１．２分析方法學(xué)驗(yàn)證??２．３．?１．２．?１專屬性驗(yàn)證??２３??
【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 周岳平;張春新;陳貴彬;;磨痂術(shù)配合生物敷料A在四肢深I(lǐng)I度燒傷中的應(yīng)用[J];南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2006年05期

本文編號(hào)：2879257