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新型抗感染藥物的發(fā)現(xiàn)及其分子機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2020-12-02 06:05
  在人類與各種疾病的斗爭(zhēng)中,抗感染藥物的研究取得了巨大的成就,主要包括了針對(duì)細(xì)菌(及真菌)、病毒、結(jié)核、寄生蟲等病原的各種藥物?垢腥舅幬锏淖饔冒悬c(diǎn)主要集中在病原微生物的成分上,包括病原體新陳代謝的關(guān)鍵分子、細(xì)胞壁的成分、生化酶、藥物酶、受體分子等。其作用靶點(diǎn)比較單一,作用機(jī)制相對(duì)明確。而當(dāng)病原微生物在不利環(huán)境中時(shí),會(huì)發(fā)生遺傳變異(如藥物靶點(diǎn)蛋白相關(guān)基因發(fā)生變異),病原耐藥問(wèn)題隨之出現(xiàn)。病原微生物耐藥也成為全球抗感染治療的巨大挑戰(zhàn)?垢腥舅幬锏难芯渴且粋(gè)持續(xù)而漫長(zhǎng)的過(guò)程,我們需要不斷地發(fā)現(xiàn)藥物作用新靶點(diǎn)、新的化學(xué)骨架、并使用聯(lián)合用藥等,為迎接新的挑戰(zhàn)做準(zhǔn)備。本研究論文主要針對(duì)抗寨卡病毒和抗結(jié)核分枝桿菌先導(dǎo)化合物進(jìn)行了研究。分別建立抗寨卡病毒和抗結(jié)核藥物篩選模型,對(duì)化合物庫(kù)進(jìn)行篩選,得到了具有抗寨卡病毒活性和抗結(jié)核分枝桿菌活性的先導(dǎo)化合物,并對(duì)其作用機(jī)制進(jìn)行了研究。第一部分:以NS5 RdRp蛋白為靶點(diǎn)的抗寨卡病毒先導(dǎo)化合物研究寨卡病毒(Zikavirus,ZIKV)為蟲媒傳播病毒,可以引起嚴(yán)重的神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥以及胎兒先天畸形。近年來(lái)ZIKV的大規(guī)模爆發(fā),加劇了抗ZIKV藥物研發(fā)的緊迫性。... 

【文章來(lái)源】:北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】:105 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

新型抗感染藥物的發(fā)現(xiàn)及其分子機(jī)制研究


圖1重組表達(dá)質(zhì)粒的PCR鑒定結(jié)果??M:?marker?;?1:?pET30a-RdRp?的?PCR?鑒定結(jié)果??

產(chǎn)物鑒定,重組表達(dá)質(zhì)粒,鑒定結(jié)果,瓊脂糖凝膠電泳


5000??2000^^^.??100〇H^?,'r.,??750??5.00?‘?]??250??100??圖1重組表達(dá)質(zhì)粒的PCR鑒定結(jié)果??arker?;?1:?pET30a-RdRp?的?PCR?鑒7l和///Will對(duì)pET30a-RdRp進(jìn)因是否插入。結(jié)果如圖2所示,20相符。再次證實(shí)目的基因插入成M?1??

誘導(dǎo)表達(dá),蛋白表達(dá),情況,蛋白


檢測(cè)蛋白表達(dá)情況。結(jié)果顯示20°C下誘導(dǎo)目的蛋白的表達(dá),分別在8、制備樣品,用SDS-PAGE檢測(cè)蛋白白表達(dá)量最大。??條件下,IPTG濃度為0.5、l.OmM時(shí)離心,SDS-PAGE檢測(cè)蛋白表達(dá)情白在上清中表達(dá)量沒(méi)有明顯區(qū)別。??進(jìn)行優(yōu)化的結(jié)果,確定在20?°C、0.5?8[21)誘導(dǎo)1611。并分別對(duì)口£丁3〇3(8、沉淀中NS5RdRp蛋白表達(dá)情況進(jìn),.M?1?2?3?4??


本文編號(hào):2895108

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