發(fā)布時間：2020-03-21 10:59

【摘要】：根據(jù)國際糖尿病聯(lián)盟(IDF)的數(shù)據(jù)顯示,2017年我國罹患2型糖尿病的人群約有1.2億左右,為全球第一大糖尿病患病國,20-79歲人群中患病率達(dá)到9.8%左右。更嚴(yán)峻的是,根據(jù)我國2017年《糖尿病防治指南》指出,我國約有63%的糖尿病患者未被明確診斷,且處于糖尿病前期的患者約有4千萬。而所謂糖尿病前期主要分為兩種類型,分別是糖耐量減低(IGT)和空腹血糖受損(IFG)。糖耐量減低或空腹血糖受損是正常機(jī)體進(jìn)展為2型糖尿病的自然病程中重要的一環(huán)。已有的研究表明,及早發(fā)現(xiàn)并積極對IGT/IFG的人群進(jìn)行干預(yù),是降低2型糖尿病發(fā)病率的有效手段之一。已發(fā)表的大量文獻(xiàn)表明,天然植物中所含有的黃酮類和皂苷等成分能有效的改善機(jī)體胰島素抵抗?fàn)顟B(tài),且這些被研究的天然植物中不乏苦瓜、絞股藍(lán)和枸杞等常見的食物,其安全性在一定程度上高于直接使用藥物進(jìn)行干預(yù)。基于上述觀點(diǎn),本研究根據(jù)前期的研究基礎(chǔ),對石參(Urari crinita)這一盛產(chǎn)于兩廣地區(qū),以根入藥的豆科貍尾豆屬植物的有效成分的抗糖尿病活性作用及機(jī)制進(jìn)行研究。為了探討石參有效成分抗糖尿病的活性作用及其中可能的機(jī)制,本研究采用了棕櫚酸誘導(dǎo)HepG2人肝癌細(xì)胞株制備出肝細(xì)胞胰島素抵抗模型,然后以此模型作為基礎(chǔ)評估石參水提物、總黃酮以及總皂苷三種成分對胰島素抵抗的肝細(xì)胞攝取葡萄糖、細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)堆積等指標(biāo)的改善作用,然后通過酶反應(yīng)分析法、ELISA、RT-PCR以及Western Blot等方法研究上述成分改善肝細(xì)胞胰島素抵抗可能的機(jī)制。結(jié)果顯示:1)在200μM棕櫚酸誘導(dǎo)24h后,肝細(xì)胞無論是培養(yǎng)基上清中葡萄糖含量(加或不加胰島素)還是細(xì)胞內(nèi)的脂質(zhì)含量,都顯著高于空白組,說明模型構(gòu)建成功;2)石參水提物、總黃酮和總皂苷能在不同程度上增加模型細(xì)胞對葡萄糖的攝取及減少細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)的堆積,降低細(xì)胞內(nèi)甘油三酯的含量;3)石參有效成分能不同程度的對抗棕櫚酸對己糖激酶的活性的抑制作用,逆轉(zhuǎn)對葡萄糖-6-磷酸酶活性的增強(qiáng)作用,還能下調(diào)經(jīng)誘導(dǎo)而升高的脂肪酸合成酶的表達(dá)量;4)石參有效成分能不同程度地逆轉(zhuǎn)棕櫚酸提高ACC、PDK-1、PEPCK等和降低ATGL、CPT-1、HMGCR、GLUT-2、PGC-1α的作用;5)石參有效成分能通過不同程度地上調(diào)IRS-1和下調(diào)SREBP-1的表達(dá),增強(qiáng)AKT和FoxO1的磷酸化。綜上所述,本文首次研究分析了石參有效成分對肝細(xì)胞胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)的改善作用及其可能的機(jī)制,證明了石參有效成分能通過調(diào)節(jié)PI3K/AKT/Fox01信號通路,進(jìn)而改善細(xì)胞脂質(zhì)的從頭合成、抑制糖異生、改善葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)及代謝等方面對胰島素抵抗起干預(yù)作用,為在防治糖尿病領(lǐng)域開發(fā)利用石參這一廣東特色天然植物提供了一些基礎(chǔ)研究依據(jù)。
【圖文】：

等助溶劑和溶解時的加熱操作，節(jié)省了操作，增強(qiáng)了實(shí)驗的穩(wěn)定性。研究合適逡逑的誘導(dǎo)濃度時，取棕櫚酸母液，用基礎(chǔ)培養(yǎng)基梯度稀釋后，與細(xì)胞共孵育２４ｈ逡逑后用ＣＣＫ－８法檢測細(xì)胞活力，，結(jié)果如圖１－２所示，由于本研宄意圖制備胰島素逡逑抵抗的肝細(xì)胞模型，為非損傷性的模型，故根據(jù)本部分實(shí)驗數(shù)據(jù)，預(yù)計在逡逑５０－２００ｐＭ之間進(jìn)行后續(xù)的指標(biāo)研究以最終確定建模濃度。逡逑１．０－１逡逑＿邋ｎ邋＿

本文編號：2593230