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鱷嘴花抗肝損傷及抗HBV作用的研究

發(fā)布時(shí)間:2020-12-05 09:14
  目的:在體內(nèi)分別采用四氯化碳(CCl4)、α-荼基異硫氰酸鹽(ANIT)誘導(dǎo)小鼠肝損傷模型和體外CC14誘導(dǎo)L-02人正常肝細(xì)胞損傷模型,并通過測定相關(guān)指標(biāo),評價(jià)鱷嘴花(Clinacanthus nutans)(CN)對肝損傷的保護(hù)作用。采用HepG2.2.15細(xì)胞模型,測定其抗原的分泌量,評價(jià)鱷嘴花鮮榨汁含藥血清體外抑制乙型肝炎病毒(HBV)的效果。通過探討鱷嘴花的抗肝損傷及抗HBV作用,為鱷嘴花進(jìn)一步開發(fā)利用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:(1)鱷嘴花抗肝損傷作用的實(shí)驗(yàn)研究①將小鼠隨機(jī)分為正常對照組、CC14模型組、陽性對照組、鱷嘴花鮮榨汁高、低劑量組(CN-JH組、CN-JL組)、鱷嘴花鮮藥高、低劑量組(CN-FH組、CN-FL組)及鱷嘴花干藥高、低劑量組(CN-DH組、CN-DL組),每天1次,持續(xù)給藥15天。除正常對照組外,其余各組通過腹腔注射0.1%CC14花生油溶液進(jìn)行急性肝損傷造模實(shí)驗(yàn)。測定并比較相關(guān)指標(biāo)含量的變化及觀察肝臟組織切片病理變化。②將小鼠隨機(jī)分為正常對照組、ANIT模型組、陽性對照組、CN-JH組、CN-JL組、CN-FH組及CN-FL組,每天1次... 

【文章來源】:廣州中醫(yī)藥大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】:58 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

鱷嘴花抗肝損傷及抗HBV作用的研究


圖2鱷嘴花對小鼠肝臟(A;正常對照組;B:?ANIT模型組;C:CN-FH?組;G:3.4小結(jié)??本實(shí)驗(yàn)選擇2%ANIT溶液誘導(dǎo)小鼠膽

細(xì)胞存活率,含藥血清,細(xì)胞形態(tài)學(xué),濃度


4.3結(jié)果??4.3.1?CCL(誘導(dǎo)以02細(xì)胞損傷最佳濃度的確定??MTT試驗(yàn)測試結(jié)果如圖3,當(dāng)ecu終濃度分別為5、10、15、20、25、30mmoM??時(shí),L-02?細(xì)胞存活率分別為?95.24%、91說%、85.41%、55.5%、49.67%、33.26〇/〇。??伴著CQ4終濃度的升高,心02細(xì)胞存活率逐漸降低。與正常對照組比較,CCLt終濃??度為5mmol/L時(shí),鏡下細(xì)胞形態(tài)基本無變化,以02細(xì)胞存活率高達(dá)95.24%;當(dāng)CC14??終濃度上升為30?mmol/L時(shí),心02細(xì)胞存活率低至33.26%。結(jié)果顯示只有ecu終濃??度為25mmol/l時(shí),細(xì)胞存活率處于45?55%之間。因此,選取終濃度為25?mm〇yi的??CCLt作為誘導(dǎo)心02細(xì)胞損傷的造模濃度。??120%??100%?nr?氣,。'??J1.QJ9U—???rg*?80%??亡?60%?了化??霎桃?^^■'^260/0??養(yǎng)20%?? ̄?0%??1?---??§?5?10?15?20?25?30??Concentration(mmo。欤??圖3不同ecu濃度作巧6小時(shí)后L02細(xì)胞存活率的變化??4.3.2鱷嘴花鮮棺汁含藥血清對)枺粗灤模埃蠶赴?翁?в跋歟崳?心02細(xì)胞經(jīng)ecu損傷作用6小時(shí)及加藥培養(yǎng)2小時(shí)后,相差倒置顯微鏡下局部??細(xì)胞生長形態(tài)見圖4。正常對照組L-02細(xì)胞生長狀態(tài)良好

含藥血清,細(xì)胞存活率,陽性對照,細(xì)胞


圖3不同ecu濃度作巧6小時(shí)后L02細(xì)胞存活率的變化??4.3.2鱷嘴花鮮棺汁含藥血清對)枺粗灤模埃蠶赴?翁?в跋歟崳?心02細(xì)胞經(jīng)ecu損傷作用6小時(shí)及加藥培養(yǎng)2小時(shí)后,相差倒置顯微鏡下局部??細(xì)胞生長形態(tài)見圖4。正常對照組L-02細(xì)胞生長狀態(tài)良好,細(xì)胞貼壁生長,呈扁平狀,??邊緣清晰。與正常對照組相比,ecu模型組細(xì)胞的生長狀況明顯異常,心02細(xì)胞出??現(xiàn)細(xì)胞膜破損、細(xì)胞核溶解、結(jié)構(gòu)不清晰和細(xì)胞邊緣不清楚皺縮變圓,甚至死亡脫落。??陽性對照細(xì)細(xì)胞生長狀態(tài)較良好,大部分細(xì)胞表面光滑、輪廓清晰,細(xì)胞數(shù)較多。各??含藥血清組細(xì)胞生長狀況與模型組相比,結(jié)構(gòu)較模型姐清晰,皺縮程度減輕,細(xì)胞數(shù)??多于ecu模型組。其中陽性對照組和CN-SH姐細(xì)胞數(shù)大致恢復(fù)到正常對照組水平。??28??

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[4]肝損傷動(dòng)物模型制作研究進(jìn)展[J]. 布秀娟.  中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào). 2014(12)
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碩士論文
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[2]黑米花色苷對CCl4誘導(dǎo)小鼠肝損傷的保護(hù)作用及其抗氧化機(jī)制[D]. 侯方麗.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
[3]草藥扛板歸抗HBV及保肝活性的初步研究[D]. 汪瓊.中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院 2009
[4]葉下珠復(fù)方Ⅱ號抗乙肝病毒及免疫性肝損傷藥效學(xué)及機(jī)理研究[D]. 李小月.廣州中醫(yī)藥大學(xué) 2009
[5]中藥復(fù)方清肝排毒飲抗乙肝病毒和實(shí)驗(yàn)性肝損傷的藥效學(xué)研究[D]. 劉麗麗.廣州中醫(yī)藥大學(xué) 2007



本文編號:2899220

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