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溫陽通脈方經內質網應激途徑對H9C2心肌細胞缺氧/復氧損傷的作用

發(fā)布時間:2020-12-06 00:45
  目的觀察溫陽通脈方含藥血清是否通過內質網應激途徑保護心肌細胞,減輕缺氧/復氧損傷,抑制心肌細胞凋亡。方法取33只SD大鼠,隨機分四組:空白對照組(15只);低、中、高劑量溫陽通脈方組(各6只)。用生理鹽水和3.24g/kg、6.48g/kg、12.96g/kg劑量的溫陽通脈方藥物給大鼠灌胃3天后,頸總動脈取血制備空白血清和溫陽通脈方含藥血清。將H9C2心肌細胞分為5組:空白血清對照組,模型組,低、中、高劑量溫陽通脈方含藥血清組。通過化學性缺氧劑(CoCl2)作用于H9C2心肌細胞22h建立缺氧模型,然后更換新鮮培養(yǎng)基處理2h建立復氧模型的方法建立缺氧/復氧模型,四甲基偶氮唑鹽法(MTT)測得最佳血清添加量(20%)和缺氧/復氧時最佳CoCl2濃度(600μM)?瞻籽鍖φ战M和模型組加入20%空白血清,低、中、高劑量溫陽通脈方含藥血清組分別加入20%低、中、高劑量溫陽通脈方含藥血清。用MTT法檢測各組細胞存活率;比色法檢測各組半胱氨酸蛋白酶3(Caspase3)酶活性和上清液中乳酸脫氫酶(LDH)活性;Hoechst33342熒光染色觀察各組... 

【文章來源】:錦州醫(yī)科大學遼寧省

【文章頁數(shù)】:60 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

溫陽通脈方經內質網應激途徑對H9C2心肌細胞缺氧/復氧損傷的作用


缺氧/復氧時不同CoCl2濃度對H9C2細胞存活率的影響(x±s,n=5)

細胞存活率,復氧,含藥血清


圖 1 缺氧/復氧時不同 CoCl2濃度對 H9C2 細胞存活率的影響( x±s,n=5)注:與空白對照組(0μM)相比,*P<0.05,**P<0.01三、MTT 測各組細胞存活率與空白血清對照組相比,模型組細胞存活率顯著降低(P<0.01);與模型組相比,低、中、高劑量溫陽通脈方含藥血清組細胞存活率均有明顯改善(均為P<0.01);與低劑量溫陽通脈方含藥血清組相比,中、高劑量溫陽通脈方含藥血清組細胞存活率均有不同程度的改善(分別為 P<0.05、P<0.01);與中劑量溫陽通脈方含藥血清組比,高劑量溫陽通脈方含藥血清組細胞存活率更佳(P<0.05)。(圖 2)

復氧,含藥血清


四、各組細胞上清液中 LDH 活性與空白血清對照組相比,模型組細胞上清液中 LDH 活性顯著升高(P<0.01);與模型組相比,低、中、高劑量溫陽通脈方含藥血清組 LDH 活性均明顯降低(均為 P<0.01);與低劑量溫陽通脈方含藥血清組相比,中、高劑量溫陽通脈方含藥血清組 LDH 活性均有不同程度的降低(分別為 P<0.05、P<0.01);與中劑量溫陽通脈方含藥血清組相比,高劑量溫陽通脈方含藥血清組 LDH 活性更低(P<0.05)。(圖 3)


本文編號:2900394

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