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尿液外泌體miRNA作為兒童特發(fā)性腎病綜合征新型分子標(biāo)志物的臨床研究

發(fā)布時(shí)間:2020-12-12 17:55
  研究背景外泌體是由細(xì)胞分泌的細(xì)胞外囊泡結(jié)構(gòu),可通過其攜帶的miRNA、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)等調(diào)節(jié)受體細(xì)胞的生物學(xué)活性,在細(xì)胞間的通訊交流過程中發(fā)揮重要作用。研究發(fā)現(xiàn),外泌體分泌的miRNA可以作為多種疾病潛在的新型生物標(biāo)志物,但在兒童特發(fā)性腎病綜合征(nephroticsyndrome,NS)中的研究尚少,臨床價(jià)值不清。研究目的全面系統(tǒng)地檢測特發(fā)性NS患兒尿液外泌體miRNA的表達(dá)譜,鑒定出在NS患兒中顯著升高的miRNA,評價(jià)其臨床診斷價(jià)值和作為NS診斷及治療監(jiān)測生物標(biāo)志物的可能。研究方法分別收集129例NS患兒和126例性別、年齡相匹配的正常兒童晨尿標(biāo)本,應(yīng)用超高速離心技術(shù)分別對5組NS混合尿液(n = 5/組)和4組對照混合尿液(n= 5/組)中的外泌體進(jìn)行提取,利用高通量Illumina SBS技術(shù)對外泌體中的miRNA測序分析,篩選出NS患者中顯著升高的miRNA,隨后用外泌體提取試劑盒對所有尿液樣本逐一提取外泌體,運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)(quantitative reverse-transcription PCR,RT-qPCR)在兩個(gè)獨(dú)立樣本組(復(fù)篩組和驗(yàn)證組)中進(jìn)行驗(yàn)證,并... 

【文章來源】:南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】:92 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

尿液外泌體miRNA作為兒童特發(fā)性腎病綜合征新型分子標(biāo)志物的臨床研究


圖1.1外泌體的形成與釋放[33]??Figure?1.1?Formation?and?release?of?exosomes??

靶細(xì)胞,橫向轉(zhuǎn)移,靶向,溶酶體


進(jìn)而釋放到細(xì)胞外。2)橫向轉(zhuǎn)移:外泌體與內(nèi)吞小體質(zhì)膜融合,從??而將其所含的蛋白質(zhì)、mRNA及miRNA釋放到靶細(xì)胞中。3)靶向溶酶體融合??而發(fā)生降解[26,36](如圖1.2所示)。??5??

功能圖,作用方式,功能,轉(zhuǎn)錄后


圖1.3植物與動(dòng)物miRNA生物形成過程m??Figure?1.3?miRNA?biogenesis?in?plants?and?animals??1.2.3?miRNA的作用機(jī)制及功能??成熟miRNA主要通過形成RISC復(fù)合體來發(fā)揮對下游靶基因的調(diào)控作用,??作用方式主要包括mRNA切割、轉(zhuǎn)錄后抑制或降解。作用方式的選擇主要取決??10??

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]特發(fā)性膜性腎病患者尿外泌體miRNA-193a表達(dá)的研究[J]. 劉書馨,常明,劉楊,梁雪,康喆.  中華腎病研究電子雜志. 2017(02)
[2]miR319在植物器官發(fā)育中的調(diào)控作用[J]. 羅茂,張志明,高健,曾興,潘光堂.  遺傳. 2011(11)



本文編號:2913021

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