發(fā)布時間：2020-12-06 13:43

　　群體感應現象是指細菌產生自誘導物或信號分子進入環(huán)境中,通過感知細菌群體密度,從而開啟特定基因的表達機制。革蘭氏陰性菌產生的最常見的信號分子為N-�；�-L-高絲氨酸內酯（N-acyl-L-homoserine lactones,AHLs）。在淡水魚腐敗菌中,AHLs能夠調節(jié)腐敗菌的濃度,并提高腐敗菌的腐敗能力,加速魚肉的腐敗過程。檢測腐敗菌的AHLs對研究魚肉腐敗有著重要的作用。本文以魚肉腐敗過程中特征腐敗菌產AHLs的含量變化為研究對象,應用PCR-DGGE技術從東北淡水魚中篩選出在低溫條件下魚肉到達腐敗點時的特征腐敗菌;通過熒光染色、流式測定及透射電鏡等方法確定AHLs能夠誘導肥大細胞產生特異性反應;通過海藻酸鈉和氧化石墨烯形成生物相容性材料成功構建傳感模型,將其與肥大細胞電化學傳感技術相結合對3種AHLs標品進行快速檢測,繪制標準曲線;同時模擬魚肉腐敗過程,對腐敗魚肉中的AHLs進行檢測。為淡水魚腐敗過程中AHLs檢測提供新的理論和依據,為AHLs的常規(guī)檢測提供了一種新型的、精確的檢測方法。本文主要研究方法和結果如下:1.以東北三種淡水魚—鳙魚、鯽魚和鯉魚為研究對象,應用PCR-D... 

【文章來源】：揚州大學江蘇省

【文章頁數】：53 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－２?１６Ｓ?ｒＤＮＡ?Ｖ３區(qū)ＰＣＲ擴增產物電泳結果??Ｆｉｇ．２－２?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?１６Ｓ?ｒＤＮＡ－Ｖ３??

２．３結果與分析??２．３．１?ＰＣＲ擴增結果??以２７Ｆ和１４９２Ｒ為引物的一次擴增產物大小為１５００?ｂｐ左右（圖２－１），以３３８Ｆ和??５１８Ｒ為引物的二次擴增產物大小為１９０?ｂｐ左右（圖２－２），所有樣品均有較亮的擴增條帶。??本實驗的ＰＣＲ擴增條件合適，用于后續(xù)的ＤＧＧＥ電泳分析。??Ｍ?１?２?３?４?５?６?７?８?９?１０?１１?１２??２００擎?＇??圖２－１?１６Ｓ?ｒＤＮＡＰＣＲ擴增產物電泳結果??Ｆｉｇ．２－１?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?１６Ｓ?ｒＤＮＡ??Ｍ?１?２?３?４?５?６?７?８?９?１０?１１?１２??圖２－２?１６Ｓ?ｒＤＮＡ?Ｖ３區(qū)ＰＣＲ擴增產物電泳結果??Ｆｉｇ．２－２?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?１６Ｓ?ｒＤＮＡ－Ｖ３??注：泳道Ｍ為ＤＮＡ?Ｍａｒｋｅｒ，１？４為鑛魚樣品，５？８為觸魚樣品，９？１２為鍵魚樣品，每種樣品分別對??新鮮點和腐敗點取樣，每個時間點２個平行。??

ｃ?〇??圖３－１３種八吼５信號分子對肥大細胞凋亡的熒光觀察（八）對照組；（８）１０｜＾〇４－吧１＾ＨＳＬ；?（Ｄ）?１０ｎＭ３ＯＣｉ２－ＨＳＬ??Ｆｉｇ．３－１?Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ?ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ?ｉｍａｇｅｓ?ｏｆ?ｍａｓｔ?ｃｅｌｌ?ｗｉｔｈ?ｔｈｒｅｅ?ＡＨＬｓ．?（Ａ）?ｃｏｎｔｒｏｌ．?（Ｂ）?１０｜ｉ１０ｐＭ?Ｃ６－ＨＳＬ．?（Ｄ）?１０［ｉＭ?３ＯＣ１２－ＨＳＬ??

【參考文獻】：
期刊論文
[1]遼寧省淡水魚中孔雀石綠殘留量檢測[J]. 崔松林.  安徽農業(yè)科學. 2014(13)
[2]氣相色譜-質譜法檢測細菌中N-�；�高絲氨酸內酯類信號分子[J]. 郭秀春,鄭立,張魁英,徐魯燕,王小如.  分析測試學報. 2012(03)
[3]深入貫徹中央精神 加快推進“十二五”現代漁業(yè)建設[J]. 牛盾.  中國漁業(yè)經濟. 2011(01)
[4]高效液相色譜-串聯質譜法同時測定細菌群體感應效應的11種AHLs類信號分子[J]. 馬晨晨,李柏林,歐杰,王婧,趙俊虹.  分析化學. 2010(10)
[5]南美白對蝦冰溫下菌相變化[J]. 郭紅,董士遠,劉尊英,趙元暉,曾名湧.  中國海洋大學學報(自然科學版). 2010(06)
[6]魚源假單胞菌群體感應信號分子與腐敗特性相關關系的研究[J]. 綦國紅,董明盛,陳曉紅,姜梅.  中國農業(yè)科學. 2007(07)
[7]淡水魚工業(yè)化生產的探討[J]. 陳奇,袁木平.  食品與機械. 2005(01)

碩士論文
[1]淡水魚中耐冷菌菌群分析與特征腐敗菌生物學特性研究[D]. 高祥英.揚州大學 2015
[2]冷藏養(yǎng)殖大黃魚特定腐敗菌及其群體感應信號分子DKPs鑒定與功能的研究[D]. 顧清清.浙江工商大學 2013



本文編號：2901475